生物转化体系中天麻素和对羟基苯甲醇同步检测方法研究

目的:建立生物转化体系中天麻素和对羟基苯甲醇同步检测方法.方法:采用反相高效液相色谱法(RPHPLC)对这两种物质的检测方法进行研究.流动相为0.02%磷酸溶液(pH 2.6)-甲醇(二者体积比为5:95),流速0.5 mL/min,柱温35℃,检测波长220nm.结果:在此条件下,天麻素和对羟基苯甲醇线性良好,相关系数均达到0.9999,精密度高(RSD＜5%),回收率在95%～102%之间.结论:本方法可准确地同步测定生物转化体系中的天麻素和对羟基苯甲醇含量.     

发酵酒精饮品中氨基甲酸乙酯前体物的代谢调控机制研究进展

氨基甲酸乙酯（ethyl carbamate,EC）又称脲烷,是一种广泛存在于发酵酒精饮品中的氨基甲酰类物质。由于EC目前被证实能对实验动物造成多位点致癌,并且对人类具有潜在致癌性,因此其对发酵食品安全的影响是目前发酵工业中面临的重要问题。EC主要由氨基甲酰类物质和乙醇自发作用形成,其中重要的前体物包括尿素和瓜氨酸,并且二者均来源于精氨酸的分解代谢,因此对这三者代谢调控机制的研究能够为EC抑制途径的探索提供新的思路,本文主要就尿素、瓜氨酸及精氨酸分别在酿酒酵母及乳酸菌中的代谢调控机制进行系统的概述,并对未来EC的相关研究进行展望。     

白桦脂醇、白桦脂酸的研究进展及其前景

白桦脂醇、白桦脂酸属羽扇烷型三萜类化合物,近年来,这两种天然产物及其衍生物在抗艾滋病病毒、抗肿瘤等方面表现出较强生物活性受到广泛关注,已成为当今一个研究热点.本文从白桦脂醇、白桦脂酸的来源、衍生化研究、生物活性以及提取制备等方面对近年来的相关研究进行概括总结,并对其研究前景进行展望.     

微生物发酵生产纤溶酶研究进展

微生物是溶栓药物的重要来源,目前已知许多微生物,包括产生链激酶的溶血链球菌,产生葡激酶的金黄色葡萄球菌,产生纳豆激酶的枯草芽孢杆菌以及产生纤溶活性物质的芽孢杆菌、曲霉菌、镰孢菌、根霉菌等,都具有分泌蛋白酶的能力,这些微生物为开发新型高效溶栓药物奠定了基础。本文综述微生物发酵生产纤溶酶的研究背景、现状、意义及主要方向。     

嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中保护剂的筛选及液氮预冻

冻干乳酸菌发酵剂在乳品生产中的优势日益明显,对其研究尤为重要。通过正交试验设计,优化适合嗜酸乳杆菌的最佳冻干保护剂配方为：脱脂乳粉15%、海藻糖4%、VC 1%、谷氨酸钠1.5%。在冷冻干燥中,通过实验发现,用液氮预冻比在普通的冷冻干燥条件下预冻嗜酸乳杆菌的存活率要高。此外,用液氮预冻时,不同的液滴大小对嗜酸乳杆菌的存活率也有影响,液滴越小,存活率越高。     

响应面法优化肺炎克雷伯氏菌产酸性脲酶发酵培养基

为了提高酸性脲酶的酶活力,设计响应面方法优化酸性脲酶产生菌肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumonia ssp.)的发酵培养基.通过部分因子试验,从8种成分中筛选对酸性脲酶活性有显著影响的组分,再利用中心组合试验进一步优化培养基组成.试验结果表明,蛋白胨和KH2PO4对酸性脲酶活性有显著影响,优化后的培养基组成(g/L):葡萄糖8,酵母膏1.8,NaCl 5,尿素8,Na2HPO40.9,MgSO40.2,蛋白胨6.015.在此条件下,模型预测发酵液中酸性脲酶酶活力可达28.74U/mL,比优化前酶活提高了67%.     

微生物产弹性蛋白酶分子研究进展

本文从分子水平对微生物产弹性蛋白酶的研究概况进行了综述。内容包括不同菌源性弹性蛋白酶基因克隆、基因序列及功能分析、基因表达的调控、利用蛋白质工程对菌源性弹性蛋白酶进行改造,目的是从分子水平时弹性蛋白酶的转录表达、酶学反应机制进行阐释,最终提高酶的表达量,拓宽酶的应用范围。     

蛋白酶A敲除对酿酒酵母抗氧化性的影响

蛋白酶A(PrA)是酿酒酵母体内一种重要的非金属蛋白酶,参与液泡中多种酶的成熟加工和信号转导因子的调控等过程。本文考察蛋白酶A对单倍体酿酒酵母的抗氧化性影响。以正常单倍体酿酒酵母菌和蛋白酶A敲除的突变菌株为研究对象,探讨PEP4基因编码的蛋白酶A对酵母细胞氧化胁迫下的抗氧化调控作用。试验结果表明蛋白酶A敲除对酿酒酵母抗氧化能力有显著的负面影响。与对照菌相比,突变株在氧化应激下展现出抗氧化能力降低的特征。同时,逆境应激因子——海藻糖的积累也与酵母细胞中蛋白酶A的存在和氧化胁迫处理浓度有一定关联。     

工业酿酒酵母重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶部分酶学性质的研究

用刚果红法测定β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶活力,研究重组酿酒酵母(S.cerevisiae)菌株SC-βG分泌表达的重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的部分酶学性质,并与出发菌株枯草芽孢杆菌(B.subtilis)表达的原始酶的性质进行比较。结果表明,重组酶保持了与原始酶相同的底物专一性。重组酶的最适反应温度为35℃,而原始酶为55℃。重组酶的热稳定性也发生了改变,40℃热处理20min只保留63.4%的最初酶活力,但温度再升高时对热处理敏感度降低,70℃的热处理20min仍保留45.9%的最初酶活力;而原始酶50℃时稳定,60℃以上的热处理酶活力损失很大。与原始酶相比,重组酶的最适pH值下降为pH5.0,而原始酶为pH6.5;相比原始酶在pH7.0有最大稳定性,重组酶在pH5.5时有最大稳定性。重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的最适反应条件与原始酶相比更接近啤酒的实际生产条件。     

点青霉MH1发酵热稳定性外切菊粉酶的培养基优化及酶学性质研究

为了分离出热稳定性胞外菊粉酶产生菌,并使菊粉酶的生产、产酶最大化以及分析其酶学性质,进行了本实验。实验结果表明:1株产外切β-D-果糖转化酶的点青霉从菊芋生长的环境中被分离,并经过诱变命名为点青霉(Penicilliumnotatum)MH1。采用半部分因子设计和中心组合设计对影响菊粉酶生产的培养基组成中主要因子进行了优化,得到一最优培养基组成(g/L):菊芋粉24,牛肉膏5,酵母膏1,豆饼粉1,KH2PO43,MgSO4·7H2O0.2,初始pH3.5。优化试验结果显示:在34℃、200r/min摇床转速下培养48h,采用优化的培养基发酵生产得到的最大菊粉酶活力为32.46U/mL。对酶的部分性质进行了研究,其最适pH为4.2,酶在pH3～7具有反应活性,最适作用温度为55℃。粗酶液经过硫酸铵分级盐析,其适宜的盐析饱和度为20%～58%,盐析后酶液通过DEAE-纤维素DE52和SephadexG-100柱层析,纯化后得到的酶采用SDS-PAGE检测分析,结果显示该酶的分子质量为(108±1)KDa。