硫醚类香料对沙门氏菌和副溶血性弧菌的抑制作用

研究硫醚类香料对沙门氏菌和副溶血性弧菌两种常见食源性致病菌的抑制作用,探讨该香料抑菌活性与其结构间的关系。采用滤纸片法测定抑菌圈直径,倍比肉汤稀释法确定不同香料的最小抑菌浓度(MIC),并用波长600 nm下菌液的吸光值绘制生长曲线。采用qRT-PCR法研究硫醚类香料对副溶血性弧菌特异性毒力基因tdh基因的调控作用。结果表明,这些硫醚类香料对两种菌的作用效果不同,其中甲基丙基二硫醚、甲基糠基二硫醚、糠基异丙基硫醚、二烯丙基硫醚、二烯丙基二硫醚对两种菌都有抑制效果。二烯丙基二硫醚抑制作用最显著,对沙门氏菌的MIC为19.5 mmol/L,对副溶血性弧菌为4.88 mmol/L。二烯丙基二硫醚对副溶血性弧菌毒力基因tdh的表达存在明显的抑制作用并与浓度呈正相关。硫醚类香料中硫原子个数和烯丙基可促进其抑菌效果,其中二烯丙基二硫醚抑菌效果最好。本研究结果为硫醚类香料在食品中的应用提供参考。     

芽孢杆菌产细菌素的分离及性质研究

实验室筛选到的枯草芽孢杆菌C119对某些革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及真菌均有抑制作用.研究发现芽孢杆菌C119所产细菌素在硫酸铵质量分数为25%的条件下能较好的分离;对温度和pH的稳定性较高;对蛋白酶的抗性较弱;对有机溶剂的稳定性较低.     

鲍鱼贮藏过程中细菌的多样性

为探索鲍鱼贮藏过程中细菌的多样性及变化,以鲍鱼样本中的细菌总DNA为模板,使用细菌的通用引物(27f和1 492r),采用聚合酶链式反应——限制性片段长度多样性(PCR-RFLP)方法分析冷藏(4℃)和常温(20℃)贮藏过程中细菌菌群多样性。结果表明,鲍鱼在4和20℃贮藏开始时的优势系统类群均为变形杆菌门。随着贮藏时间的延长,细菌的多样性总体均呈现下降趋势。在贮藏过程中,弧菌和弓形菌属有明显增加现象。在贮藏结束时,细菌的多样性略有不同,4℃贮藏18d的优势菌为梭杆菌(29%),20℃贮藏72h的优势菌为乳酸乳球菌(30%)。相比较于传统的培养方法,PCR-RFLP法能更加全面、准确地探究鲍鱼贮藏过程中的细菌菌群多样性。     

一株引起番茄果腐病病原菌的分离鉴定

番茄果实上的病害能引发叶片及果实腐败等多种症状,对番茄生产构成极大的威胁。实验从番茄病果上分离纯化得到病原菌株,命名为BC1402,其形态学特征与灰葡萄孢霉菌极其相似。根据柯赫式法则,用BC1402菌株对健康番茄进行侵染,测试致病力。结果表明,被侵染的番茄叶片和茎部发黄褐色、干软枯萎,证明菌株有致病力,与预期结果一致。CTAB法提取BC1402菌株的总DNA,并对rDNA-ITS序列进行PCR克隆,DNA电泳表明克隆结果为阳性。对BC1402进行系统发育树分析,结果表明该菌为灰葡萄孢霉菌(Botrytis cinerea)。     

榆耳液态发酵培养的优化及多糖的抑菌活性

对榆耳进行液态发酵培养条件的优化,并考察榆耳多糖的抑菌活性.采用响应面中心复合设计方案,确定了麦芽糖(X1)、豆粕(X9及维生素B6(X3)的加入量,运用二阶多项式回归模型进行响应值预测,并进行试验验证.结果表明,榆耳液态培养最优条件为麦芽糖12.96g/L,豆粕11.68g/L,维生素B6 159mg/L,配合无机盐的条件下榆耳菌丝体湿重为11.27g/100mL.多元二次回归模型为:Y=10.50+0.75X1+0.63X2+ 0.20X3+0.044X1X2-0.075X1X3+ 0.088X2X3-0.51X12-0.79X22-0.55X32,因变量的总变化中有92.57％可以由回归曲线解释.利用杯碟法考察榆耳多糖的抑菌活性,结果显示,榆耳胞内和胞外多糖对福氏志贺氏菌、枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌及产气杆菌有较强的抑制效果.以上结果说明,利用麦芽糖、豆粕、维生素B6配合无机盐可获得较高产量的榆耳菌丝体,其胞内多糖和胞外多糖均有一定的抑菌作用.     

胆固醇氧化酶出发菌株的筛选及鉴定

对从不同地点采集到的11个样品进行分离筛选,从中筛选出27株以胆固醇为唯一碳源的菌株,确定其中1株胞外胆固醇氧化酶高产菌株,其胆固醇氧化酶的酶活力为839.35 U/L。综合形态学和生理生化实验及16SrDNA序列分析结果,确定该菌株属于施氏假单胞菌(Pseudomonas.stutzeri)。     

产脂肪酶根霉的诱变及其酶促酯化反应的研究

本文通过紫外线诱变获得产脂肪酶菌株ＵＶ_７－２，使其脂肪酶活力比原始菌株提高了３０％。同时对该酶的酯化性质进行了研究，并用正交试验方法确定了合成油酸正丁醇酯的最佳条件。最佳条件为温度３５℃，时间１０ｈ，加酶量为３００μ（约干细胞粉０．８５ｇ）。     

产脂肪酶根霉和诱变及其酶促酯化反应的研究

西方通过紫外线诱变获得产脂肪酶菌株ＵＶ６－２，使其脂肪酶活力比原始菌株提高了３０％，同时对该酶的酯化性质进行了研究，并用正交试验方法确定了合成油酸正丁醇酯的最佳条件，最佳条件为温度３５℃，时间１０ｈ，加酶量为３００μ。     

刺参体壁胰/类胰丝氨酸蛋白酶的性质及其在自溶中的作用

以刺参体壁中丝氨酸蛋白酶为研究对象,对其部分酶学性质及其与刺参自溶的关系进行研究。采用Tris-HCl缓冲溶液提取、硫酸铵盐析、透析及超滤获得刺参体壁粗酶液。结果显示,以Boc-Phe-Ser-Arg-MCA为底物时,粗酶液的丝氨酸蛋白酶活力最高;以其为底物,测得该类蛋白酶在pH值为6.2和8.5时呈现较强酶活力峰值,两者最适温度范围均为50～55?℃;Cu2＋、Fe3＋、Pb2＋、Zn2＋强烈抑制该酶的活性,Ca2＋可提高该酶活力;邻菲咯啉、乙二胺四乙酸以及半胱氨酸修饰剂均能够部分抑制该酶活力。4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐、苯甲基磺酰氟、Na-对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基酮、(3S)-7-氨基-1-氯-3-磺酰氨基-2-庚酮盐酸盐、大豆胰蛋白酶抑制剂能够显著抑制蛋白酶的活力以及自溶过程中可溶性蛋白、三氯乙酸可溶性多肽的生成。上述结果表明,刺参体壁中存在至少2?种具有一定的金属离子依赖性的胰/类胰丝氨酸蛋白酶,其活性中心或底物识别位点可能有半胱氨酸的参与,该类蛋白酶很可能参与刺参自溶过程中蛋白质的降解。     

环境因素对即食海参蜂房哈夫尼菌群体感应的影响

本文探究了即食海参腐败菌蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei H4)生长阶段N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)的分泌规律及环境因素对AHLs分泌的影响。以紫色杆菌CV026为报告菌,采用报告菌平板法检测H4分泌AHLs含量;以根癌农杆菌KYC55为报告菌,采用β-半乳糖苷酶法检测AHLs的活性。研究表明菌株H4分泌的AHLs含量及其活性具有密度依赖性,在细菌对数生长后期(OD600≈1.6)AHLs的分泌量达到最高,此时培养液的pH为5.71。环境因素对AHLs分泌影响的结果显示,在一定浓度范围内,添加Na Cl对H4分泌AHLs有促进作用;弱酸和弱碱都能使AHLs的分泌能力降低,pH为7.0时AHLs分泌量最大;H4分泌AHLs的最适温度为30℃,低温下AHLs分泌能力较弱。经不同碳源或氮源培养时,H4分泌AHLs的能力有明显差异,以果糖为碳源时,AHLs的活性最高,以硫酸铵为氮源时,AHLs的活性最高。综上所述,蜂房哈夫尼菌的群体感应系统具有密度依赖性,并且受环境因素影响,呈现规律性变化。