可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在E.coil中的表达、纯化及其生物学活性

目的表达纯化可溶性肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosisinducing ligand,TRAIL)蛋白,并测定其生物学活性。方法利用E.coli中表达C-端带有6×His标签的可溶性TRAIL蛋白,并优化诱导时间(4、6和8 h)和诱导剂IPTG的浓度(0.06、0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)。表达产物经Ni亲和层析和离子交换层析纯化后,采用MTT法测定不同浓度TRAIL(终浓度分别为100、200、400 ng/ml)的活性,并检测亲和层析过程中两种洗脱方式(洗脱液4℃留柱过夜后进行洗脱和洗脱液进柱后直接收集流出液)及纯化过程中两次透析的时间(均为24和48 h)对TRAIL活性的影响。结果最佳诱导时间为6 h,最佳IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L。表达产物的表达量占菌体总蛋白的20%,相对分子质量为20 000,可与兔抗人TRAIL单克隆抗体发生特异性结合。TRAIL终浓度为100、200和400 ng/ml的实验组的抑制率分别约为36%、53%和73%。亲和层析的两种洗脱方式的TRAIL活性差异无统计学意义(P0.05),透析48 h比透析24 h获得的TRAIL活性显著降低(P0.05)。结论 TRAIL蛋白成功在E.coli中表达,具有抑制肿瘤细胞生长的作用,优化后的TRAIL诱导条件和纯化方法可进一步大量生产高TRAIL蛋白的活性,满足了TRAIL的基础及临床相关研究的要求。     

大型碳化塔设计方案推介

作者在对纯碱生产碳酸化过程的研究及丰富实践的基础上,提出新设计单塔能力450t纯碱的大型碳化塔。介绍用于氨碱法生产的大型碳化塔设计方案,包括塔体的结构材料、塔直径和塔高、塔板形式、冷却结构等方面,并对大型碳化塔的优点、可靠性进行分析。     

75%肟菌·戊唑醇水分散粒剂的研制

研究了润湿剂、分散剂、填料对75%肟菌·戊唑醇水分散粒剂理化性能的影响,重点考察了不同种类分散剂在不同烘干温度条件下对产品崩解时间、悬浮率的影响。75%肟菌·戊唑醇水分散粒剂优选配方为:50%戊唑醇、25%肟菌酯、4%MORWET D-425、3%RQ-206、3%RQ-106、3%Terwet-1004,玉米淀粉补足至100%。田间药效试验结果表明,75%肟菌·戊唑醇水分散粒剂112.5~225.0 g/hm2对草莓炭疽病的防效为82.93%~94.97%。     

改良半固体四硫磺酸钠煌绿培养基用于鸡肉中沙门菌的检测

目的使用改良半固体四硫磺酸钠煌绿(MSTT)培养基对鸡肉样品中的沙门菌进行初筛,作为附加步骤对ISO 6579.2002方法进行改良,以节约人力物力和时间。方法将MSTT培养基经虹吸法装入玻璃毛细管,插入预增菌液或增菌液类液体培养基,使半固体培养基和液体培养基相结合,预增菌或增菌过程同动力增菌过程同步进行。此外对使用MSTT培养基改良ISO 6579.2002方法分为纯菌种组和自然鸡肉样品组分别试验,并对结果进行评估。结果应用改良ISO 6579.2002方法,沙门菌株检出率纯菌种组为98%(126/129),自然污染的沙门菌阳性鸡肉样品检出率为92%(35/38),而原ISO 6579.2002方法对自然污染的沙门菌阳性鸡肉样品检出率为87%(33/38),低于改良法;与原方法相比,72%(264/367)的阴性样品不需要进一步分离和鉴定试验。结论应用MSTT培养基改良后的ISO 6579.2002方法能够应用于鸡肉中沙门菌的检测,且优势明显。     

四川绵竹远德微生物研究所——酿酒技术和酿酒微生物的科研机构

中华酿美酒川艺铸曲魂节约资源增香高产川艺回糟曲酒香飘万里1993年,本所陈远德所长发明了仅用于清香型白酒的单菌系<白酒高产剂>专利技术(专利号:ZL93110850.0),大幅提高了白酒工艺的出酒率。现又开发出数十株生香功能细菌,研制出了多香型、多菌系的新型白酒高产剂和用于大曲白酒回糟工艺的专用型酒曲——川艺回     

菌型叶根动叶片叶根叶冠内径向的加工

菌型叶根动叶片是一种新型的动叶片,采用数控铣加工叶根内径向面时留0.1~0.2mm余量,然后在进行叶根内径向磨削,叶冠直接加工到位,没有后序磨削加工,由于叶根叶冠在加工过程中不是一次装夹完成的,根冠存在一定的落差,在后续的装配中容易产生配合间隙,无法达到要求。文中介绍了一种新的加工工艺,解决了这一问题。     

Burkholderia thailandensis E264/pBMTL3-tdpR发酵生产抗癌药物ThailandepsinA的研究

在伯克氏菌Bth264野生株产新型抗癌药物Thailandepsin A以及调节基因tdp R正向调控Thailandepsin A生物合成的基础上,利用基因工程菌Bth264/p BMTL3-tdp R发酵生产Thailandepsin A,以提高产量。以0.5%乳糖为诱导剂,确定最佳诱导条件:发酵15 h添加乳糖,诱导时间6 h;通过单因素实验,确定葡萄糖和胰蛋白胨作为碳氮源、装液量65/250 m L以及接种量1%;同时结合优化发酵培养基进行发酵,Thailandepsin A产量达到252.14 mg·L-1,比优化前的产量提高56%;另外在发酵过程中,添加大孔树脂HP-20原位吸附产物,Thailandepsin A产量可达283.75 mg·L-1,比不加树脂提高13.8%;最后,基于RT-PCR和比较Ct值法,基因工程菌和野生菌相比,Thailandepsin A生物合成基因tdp B、tdp C1的转录水平分别提高11.4倍和6.0倍,对应的产量增加4.6倍,从而在很大程度上说明调节基因tdp R的过表达促进生物合成基因转录水平的提高以及产量的增加。