生物素标记的布鲁菌多克隆抗体的制备

目的制备生物素标记的兔抗牛种布鲁菌544A多克隆抗体,并进行鉴定。方法复苏并扩大培养牛种布鲁菌544A,灭活后制备灭活疫苗,经背部皮下多点注射免疫新西兰大白兔,5次免疫后,经心脏采血,分离血清,采用硫酸铵盐析法对血清中的多克隆抗体进行粗提,再通过蛋白亲和柱层析法对抗体进一步纯化,利用SDS-PAGE分析抗体的纯度,间接ELISA法检测抗体的效价和特异性,Bradford法检测抗体的蛋白含量,并利用生物素对抗体进行标记。结果制备的牛种布鲁菌544A的兔多克隆抗体纯度较高,效价为1:256 000,特异性较好,蛋白含量为2.83 mg/ml,每摩尔蛋白中标记的生物素摩尔数为3.09。结论成功制备了生物素标记的牛种布鲁菌多克隆抗体,为下一步研制牛种布鲁菌免疫检测试剂盒奠定了物质基础。     

未知菌的实验室基础研究

在活化培养放线菌A45时,发现原平板上放线菌有被抑制现象,通过进一步分离培养及接种,确定其确有抑制放线菌A45的能力。为了研究该菌的抑菌效果,通过有机试剂乙酸乙酯萃取该菌发酵液,制备滤纸片,发现该菌发酵液对甲型副伤寒杆菌和表皮葡萄球菌抑菌能力较好。通过微量肉汤稀释法测定其最低抑菌浓度,可得该菌产生的抑菌成分对表皮葡萄球菌、伤寒杆菌、甲型副伤寒杆菌、痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为8mg/mL,对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的抑菌浓度为16mg/mL。最后通过薄层层析最佳流动相的测定探索出两个较好的系统,分别为甲醇:正丁醇:冰乙酸:蒸馏水=9:7:1:2(体积),正丁醇:乙醇:蒸馏水=3:7:7(体积)。     

菌渣中土霉素残留的高效液相检测法

为准确检测土霉素菌渣中土霉素残留的含量,为土霉素菌渣无害化处理处置提供技术支撑,建立了一种菌渣中土霉素残留的高效液相色谱测定法。以甲醇+冰乙酸为提取剂,以甲醇+0.5%甲酸溶液为流动相、以C18柱为色谱柱,对样品进行检测。该方法在0.32～1000mg·L~(-1)线性范围内,线性相关系数为0.999 98,土霉素检出限(S/N=3)为6.07 mg·kg~(-1)。在0.4、1.2、2.0 mg·g~(-1)添加水平下,回收率达到87.33%～94.16%,相对标准偏差为5.46%,该方法定性定量准确,重现性好,可满足制药菌渣中土霉素残留检测的要求。     

胞外聚合物在强化生物除磷中的作用研究

强化生物除磷(EBPR)是经济有效去除污水中磷的重要方法,已广泛应用于水环境保护领域。普遍认为EBPR的成功运行是基于聚磷菌具有超磷的能力,通过排放剩余污泥可实现除磷的目的。然而最近研究表明,活性污泥胞外聚合物(EPS)中也聚集了一定数量的磷,这意味着EPS在强化生物除磷(EBPR)过程中的作用不可忽视。归纳了不同EPS提取方法的特点,总结了EPS中磷的分布特征及EPS在维持EBPR系统稳定中的具体作用,最后讨论了现有认识的差距。     

35%氟吡菌酰胺·戊唑醇悬浮剂的高效液相色谱分析

使用C_(18)柱和紫外检测器,以甲醇-水为流动相,对试样中氟吡菌酰胺和戊唑醇进行分离和测定。结果表明,氟吡菌酰胺和戊唑醇的线性相关系数均为0.999 3,标准偏差分别为0.15、0.16,变异系数分别为0.84%、0.92%,平均回收率分别为99.08%、98.88%。该方法具有较高的准确度和精密度,适用于检测氟吡菌酰胺和戊唑醇。     

急性炎性疾病患者乳酸林格氏液液体动力学

目的:探索炎性疾病患者的乳酸林格氏液（Ringer's lactate,RL）液体动力学特征以及炎性生物标记物是否可以作为协变量影响RL分布和排泄。方法:本研究为前瞻性队列研究。选择40例美国麻醉医师分级（ASA）I-II级，腹腔镜下择期胆囊切除术（胆囊炎组，n=20）或者腹腔镜下急诊阑尾切除术（阑尾炎组，n=20）。所有患者麻醉诱导前开始输注RL，按15 mL/kg，35 min内输毕。采用酶联免疫（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）方法测定血浆炎症（TNF-α,IL-10和CRP）或者内皮损伤生物标记物（syndecan-1,SDC-1）；利用血红蛋白（Hb）稀释-时间曲线和尿量，使用Phoenix软件，采用非线性混合效应模型分析计算RL液体动力学参数和协变量的影响。结果:与胆囊炎组相比，阑尾炎组RL从组织间隙到血浆的转运速率常数（k21）显著降低（14×10-3min-1 versus 35×10-3min-1;P=0.012）。阑尾炎组C反应蛋白（CRP）升高［中位数38.1(1.8-143.6) μg/mL versus 1.3(0.1-159.0) μg/mL;P<0.001］；与清醒状态相比，麻醉期间（输液开始后30～45 min），液体从中央室中到外周室的转运速率常数（k12）显著增加（57×10-3min-1 versus 32×10-3min-1；P<0.01）。清除速率常数（k10）降低90%（0.6×10-3min-1 versus 5.3×10-3min-1;P<0.001）。无论在清醒状态还是麻醉状态下低血压均能降低液体清除；炎症或者内膜损伤的生物标记物不能作为显著影响RL液体动力学参数的协变量。结论:阑尾炎或者胆囊炎患者术前输入液体后“炎症反应的生物标记物”不是RL的液体动力学的协变量，但是两组患者中，全身麻醉期间输入液体的清除率下降。     

废菌渣活性炭的制备及对废水中硝基苯的吸附

以废菌渣为原料制备活性炭，采用能量-色散光谱（EDS）和傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）进行表征，结果表明：活性炭表面具有多种官能团，有利于提高对硝基苯的吸附。并研究了活性炭吸附硝基苯的影响因素（pH、初始浓度、吸附时间、投加量）、吸附等温线及热力学。结果表明：在常温中性pH条件下，初始浓度为50mg/L，活性炭用量为0.15g时硝基苯去除率可达98%，出水水质满足《污水综合排放标准》（GB 8978－1996）中对硝基苯浓度低于2.0mg/L的要求。活性炭对硝基苯的吸附具有较快的吸附速率，即1min接近平衡。该吸附行为是自发放热反应，可以用Freundlich模型很好地拟合。废菌渣活性炭对硝基苯的吸附主要是疏水作用和氧化钼活化共同作用的结果。因此，以农业废弃物-废菌渣制备得到的废菌渣活性炭具有良好的经济实用性，可用于废水处理中，实现以废治废的目的。     

干巴菌多糖提取工艺优化及抗氧化活性的研究

以产于云南曲靖的干巴菌为原料,以多糖提取率为评价指标,采用单因素实验及正交实验优化干巴菌多糖的提取工艺,通过测定干巴菌多糖对DPPH自由基及羟基自由基的清除率来评价其抗氧化活性。结果表明,干巴菌多糖的最佳提取工艺为:提取温度70℃、提取时间2.5 h、料液比1∶15(g∶mL),在此条件下,多糖提取率达到10.08%;当干巴菌多糖浓度为5 mg·mL~(-1)时,其对DPPH自由基的清除率为86.99%,对羟基自由基的清除率为87.46%,有较好的抗氧化作用。