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β-木糖苷酶在完全快速降解木聚糖类半纤维素为木糖的过程中起重要作用.海栖热袍菌(Thermotoga maritima)是一个极端嗜高温厌氧细菌,所产耐热酶类具有非常可观的工业应用前景,但这类酶在大肠杆菌中的表达很低.采用基因重组技术将源自海栖热袍菌的具有阿拉伯糖苷酶活性的耐热β-木糖苷酶基因克隆至表达载体pET-28a,与组氨酸标签融合表达构建重组质粒pET-28a-xyl,然后转化不同大肠杆菌宿主,结果在大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中获得高效表达;重组酶蛋白经诱导表达、破胞和热处理后纯度在90%以上,经Ni2 亲和层析后达电泳纯;用HPLC和TLC检测酶解产物,β-木糖苷酶和木聚糖酶联合水解后,酶解产物主要为木糖,外加阿拉伯糖苷酶后能使其酶解产物中木糖含量明显提高.因此,具有阿拉伯糖苷酶活性的耐热β-木糖苷酶在木糖制备中具有重要的工业应用价值. 相似文献
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阿拉伯糖苷酶作为木聚糖降解的限速酶之一,在植物残体的生物转化、食品加工、饲料工业以及纸浆漂白中具有广泛的应用潜力。实验中选择pET—28a作为表达载体,优化核糖体结合位点RBS与起始密码子ATG间距离,使来自海栖热袍菌(Thermotoga maritima)极耐热性阿拉伯糖苷酶得到高效表达,重组酶蛋白经一步热处理后纯度达到90%以上;木聚糖酶解试验结果表明,阿拉伯糖苷酶和木聚糖酶间存在协同作用;阿拉伯糖苷酶与木聚糖酶和β-木糖苷酶联合水解木聚糖能明显提高酶解产物中木糖含量,因此,开发极耐热性阿拉伯糖苷酶在酶法制备木糖中的应用具有重要的经济效益和社会效益。 相似文献
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介绍了TLD测量系统中的读出器、TL控测器、退火炉、冷却系统、刻度源和刻度方法诸方面的质量控制问题,同时介绍了一些人们在测量中容易忽略但又很重要的测量技术问题,如擦洗加热盘和滤光片,退火温度控制和退火时间的计时方法等,对从事TLD测量的工作人员会有一定的帮助。 相似文献
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茶叶儿茶素单体的分离纯化及鉴定 总被引:8,自引:0,他引:8
将茶提取物(茶多酚)先经SephadexLH-20柱层析分离,脱除咖啡因和色素,并将其中7种儿茶素分成2个流分,再用半制备型HPLC分离纯化,得到7种儿茶素的单体化合物。用UV、 IR、NMR及MS等方法鉴定和验证了其化学结构,7种单体儿茶素化合物的纯度均大于99%,总得率为66.7%,总回收率为82.1%. 相似文献
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在生活垃圾分类背景下上海市可回收物回收体系逐步完善, 生活源废塑料回收再利用量获得极大提升。通过现场调研与统计资料分析, 对当前上海市生活垃圾废塑料分类回收现状、再利用技术进行分析梳理, 结果显示当
前生活垃圾废塑料回收类别以PET、PP 为主, 分别占总回收量的45.3% 和30.7%; 另有近30% 具有回收价值的废塑料未被回收, 主要以PP 和PET 为主。在此基础上, 提出需进一步完善分类回收标准与补贴政策、推动PET 同级利
用等回收技术创新、强化宣传教育与主体监管等优化策略, 以期促进废塑料回收与再利用行业进一步发展。 相似文献