微滴式数字PCR检测冷冻草莓中GⅠ、GⅡ型诺如病毒

目的:建立一种检测冷冻草莓中诺如病毒(GⅠ和GⅡ)的逆转录微滴数字PCR (RT-ddPCR)方法。方法:根据ISO标准选定检测引物,优化反应体系,退火温度,进行了方法学实验,建立了一种快速检测冷冻草莓中GⅠ和GⅡ亚型诺如病毒的新方法。结果:确定了数字PCR检测GⅠ型诺如病毒退火温度为56.5℃,GⅡ型诺如病毒退火温度为58.1℃。RT-ddPCR检测GⅠ质粒标准品标准曲线的R2=0.9947,RT-ddPCR检测GⅡ质粒标准品标准曲线的R2=0.9950,说明该方法具有良好的线性关系。与RT-qPCR灵敏度对比,RT-ddPCR法的灵敏度比RT-qPCR法高一个数量级。在检测范围内,最低检测限低至个位拷贝数。RSD最小为3.8%,表明该实验重复性良好。浓度较低100 copies/μL左右时,RT-ddPCR的重复性不佳。结论:本研究建立的诺如病毒数字PCR法具有特异性强、灵敏度高、检测限低等优点,可用于冷冻草莓中诺如病毒的定量检测。     

稳定同位素稀释-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中A1型和A2型β-酪蛋白含量

目的 建立基于纯化蛋白和稳定同位素稀释-超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法定性及定量测定牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中A1和A2两种β－酪蛋白变异体的分析方法。方法 首先将β-酪蛋白标准品中A1和A2两种β－酪蛋白变异体在高效液相色谱仪上分离，通过各自的纯化蛋白确定两种变异体在标准品中的含量，再将试样中的牛β-酪蛋白经胰蛋白酶酶解成肽，经超高效液相色谱串联三重四级杆质谱检测。通过筛选的特异肽段，经β-酪蛋白标准品及稳定同位素稀释内标法计算，获得试样中牛β-酪蛋白A1变异体和A2变异体的含量。结果 本研究采用的β－酪蛋白标准对照品中A1和A2β－酪蛋白变异体含量分别为20.8%和55.1%，且在检测中两种变异体标准曲线的线性相关系数均大于0.99，方法重现性中相对标准偏差2.29%-4.72%。结论 本方法溯源性及精密度好，适用于牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中两种β-酪蛋白变异体的测定。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法对环境中芽孢杆菌的鉴定及溯源

目的 使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术 (matrix assisted laser desorption lionization-time of flight mass spectrometer, MALDI-TOF MS)，对芽孢杆菌进行快速鉴定和聚类分析，用于研究MALDI-TOF MS对芽孢杆菌溯源的可行性。方法 对实验菌株纯化培养后，使用甲酸提取法提取实验菌株蛋白，并使用MALDI-TOF MS，对22株环境分离菌株和1株标准菌株(CGMCC(B)1.1086)进行鉴定。进一步采集22株实验菌株的蛋白质指纹图谱，使用SARAMIS软件，对实验菌株进行聚类分析。结果 经鉴定，标准菌株(CGMCC(B)1.1086)的鉴定结果可信度为99.9%。22株环境菌均为芽孢杆菌，其中，6株菌鉴定到属水平，16株菌鉴定到种水平。在相似水平为80%的条件下，22株芽孢杆菌分为22个分支。结论 可以使用MALDI-TOF MS对芽孢杆菌进行快速鉴定与分型，对于微生物溯源有重要意义，能够满足食品检测及溯源的需求。     

稳定同位素比质谱法鉴别焦亚硫酸钠处理大蒜

目的 基于硫稳定同位素比质谱法鉴别焦亚硫酸钠处理过的大蒜。方法 通过收集全国主要食品级商家的焦亚硫酸钠与山东、黑龙江和辽宁三省大蒜及全国主要食品级商家的焦亚硫酸钠，比较δ34S值与的分布差异，进而开展焦亚硫酸钠模拟浸泡实验从而获得大蒜硫同位素的比值变化(Δδ34S)。结果 焦亚硫酸钠的δ34S值分布在-2.0‰~2.0‰和4.0‰~12.0‰两个区间。山东、黑龙江、辽宁三省大蒜δ34S范围分别为1.0‰~8.2‰、1.3‰~6.5‰和1.7‰~6.3‰，东北两省大蒜硫同位素值均小于8.0‰。采用δ34S值为10.6‰的焦亚硫酸钠浸泡东北大蒜，浸泡前后?δ34S发生显著变化。未剥皮组大蒜在质量浓度为5 g/L~100 g/L，?δ34S基本不变，约为1.0‰；剥皮组大蒜在质量浓度为0~20 g/L范围内， ?δ34S逐渐升高，在质量浓度为20 g/L~100 g/L，?δ34S基本不变，其值约为1.8‰。大蒜δ34S值先升高，而后在某一浓度后基本保持不变， 即Δδ34S保持不变。 结论 硫稳定同位素比质谱法可鉴别焦亚硫酸钠处理的大蒜，为评价与进一步跟踪判定试剂的合规使用提供了新的检测思路。     

刍议印度化学品法规及管理体系

近年来，印度的化学工业取得了长足的进步，背后离不开相关企业的创新发展以及政府管理法规的有效服务和监管。通过介绍印度的危险化学品相关法规和化工行业相应管理体系，旨在为我国的化工行业管理提供新视角，为完善改进化学品管理法规制度拓展新思路。     

苯联三唑(磺)酰胺衍生物的合成及抑菌活性

[目的]寻找新杀菌活性的苯联三唑(磺)酰胺衍生物。[方法]设计合成了系列N-(4-(3-苯基-1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)苯磺酰胺或苯甲酰胺衍生物,以菌丝生长速率法对其抑菌活性进行了初步评价。[结果]合成了3类12个N-(4-(3-苯基-1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)苯磺酰胺或苯甲酰胺衍生物,结构经1H及13C NMR确证。[结论]目标化合物收率为60.7%～81.3%;该类化合物对番茄灰霉病菌有较强抑制作用,其中11个化合物的抑菌率均大于85%,优于对照药剂烯唑醇(80.8%);5个化合物对苹果腐烂病菌的抑菌率大于74%,优于烯唑醇(68.6%)。