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621.
依据大肠杆菌密码子偏好性,设计合成β2肾上腺素受体(β2 adrenergic receptor,β2AR)基因序列,应用大肠杆菌无细胞系统对其进行高效表达,经负载镍离子的顺磁颗粒MagneHis? Ni-Particles纯化后,对受体蛋白进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和活性鉴定。结果表明:改造后的β2AR基因密码子适应指数(codon adaptation index,CAI)为0.96,GC含量从58%降低到46.17%,更有利于该基因在大肠杆菌系统中的表达。表达体系中优化后的Mg2+浓度为22?mmol/L,此时表达量为1 250 μg/mL。SDS-PAGE分析显示,纯化蛋白在47?kDa左右出现清晰的特异性条带,与预期结果一致,纯度大于90%。直接酶受体分析检测结果显示,当纯化受体蛋白1∶500稀释包被时,该重组受体与盐酸克伦特罗、沙丁胺醇及莱克多巴胺的酶标记物结合的OD值分别为0.976、0.836和0.728,亲和活性依次降低。β2AR蛋白在无细胞体系中的成功表达,为研发基于受体的β激动剂多残留快速检测技术提供了理论支持。 相似文献
622.
针对云环境中采用属性基加密机制所引起的隐私泄露和策略更新开销大的问题,提出支持访问策略半隐藏和动态更新的多机构属性基加密方案.该方案采用策略半隐藏方式,将属性分为属性名和属性值两部分,通过对用户的属性值进行隐藏,保护用户的所有属性隐私,避免用户的具体属性值泄露给第三方.另外,方案采用线性秘密共享技术,引入动态策略更新算法,支持与、或、非等任何类型的策略更新,减少传统策略更新中的计算和通信开销.经安全性分析证明,该方案在标准模型下满足选择明文攻击安全.通过与其他方案对比,用户密钥大小、密文大小和解密代价均有所优化,更加适用于云环境中需保护用户隐私及支持策略更新的情况. 相似文献
623.
以改性海藻酸钠(聚丙烯酸钠接枝海藻酸钠)作为新型的乳酸菌微胶囊壁材,研究改性海藻酸钠的毒性和对多种乳酸菌的包埋效果。结果显示,该材料对大鼠无急性毒性,且对组织细胞亦无明显毒性,可安全食用;与海藻酸钠相比,该材料制备的微胶囊结构更为紧致,有助于阻隔多种不利因素对乳酸菌活性的影响,同时提高了对植物乳杆菌MA2、嗜酸乳杆菌563和乳酸乳球菌WH-C1的包埋率(分别提高4.5%、4.4%和7.1%),降低了粒径(分别降低0.34 cm、0.26 cm和0.21 cm)。因此,该材料有望成为一种安全、有效的乳酸菌微胶囊壁材。 相似文献
624.
625.
626.
通过密码子优化、昆虫杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac)构建、表达条件筛选及镍柱亲和层析,研究β_2肾上腺素受体(β_2 adrenergic receptor,β_2AR)基因(β_2AR)在昆虫细胞Sf9中的高效表达及纯化策略。方法:人工合成改造后的β_2AR基因,将其克隆至转移载体p Fast Bac1中,构建重组杆状病毒表达质粒p Fast Bac1-β_2AR’,转染昆虫细胞Sf9,优化表达条件,采用镍离子亲和层析法纯化重组蛋白并进行活性鉴定。结果:适宜的表达条件为感染细胞使用的感染复数5、感染后表达时间48 h,Western blot分析显示在47 k D左右处出现清晰的特异性条带,与预期结果一致。纯化的受体蛋白纯度大于90%,活性鉴定结果显示该受体蛋白可特异性吸附盐酸克伦特罗、沙丁胺醇及莱克多巴胺3种β激动剂的酶标记物,OD值分别为0.983、0.947和0.912。结论:本研究实现了β_2AR受体在Sf9细胞中的表达,且纯化后的受体蛋白保持了较好的β激动剂亲和活性,为利用β_2AR受体开展β激动剂多残留快速检测技术提供了依据。 相似文献
628.
本实验选用鸟胺牛磺酸部分替代NaCl,在NaCl使用量为2.5%的前提下,通过单因素试验考察鸟胺牛磺酸替代比(0~40%)对灌肠pH值、水分活度、色泽、质构特性以及感官品质的影响。结果表明:与未替代组相比,20%~40%的鸟胺牛磺酸替代比可显著降低灌肠的pH值、水分活度和a*值,而b*值则显著升高(P<0.05);30%~40%的鸟胺牛磺酸替代比可显著升高灌肠的L*值、硬度和胶黏性(P<0.05);40%的鸟胺牛磺酸替代比可显著增大灌肠的咀嚼性(P<0.05);感官评定结果表明,随着鸟胺牛磺酸替代比的增加,灌肠颜色变浅,咸味有所下降。综合评价结果显示,适宜的鸟胺牛磺酸替代比水平为20%。 相似文献
629.
630.
电火花加工放电爆炸力对材料蚀除机理的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过对不同电源、不同电极材料、不同介质条件下单脉冲放电爆炸力及放电蚀坑形貌和尺寸的实验研究,对增爆电源放电爆炸力的蚀除机理进行了初步研究。研究结果表明,虽然增爆电源的单个脉冲能量仅为普通电源的1/2,但其放电冲击波峰值压力及放电蚀坑直径却远远大于普通电源,因而提高了加工效率。研究结果还表明,增爆电源的材料蚀除机理主要是热爆炸蚀除,即材料是先被放电通道的瞬时高温熔化,处于熔化状态的材料在放电爆炸力的作用下被抛出的。放电爆炸力的大小与放电介质密度有关,介质密度越大,放电爆炸力越大。 相似文献