响应面法优化杏仁粕蛋白酶解工艺及酶解液抗氧化活性研究

以脱脂杏仁粕为原料,研究蛋白酶种类、加酶量、酶解温度和酶解时间对水解度和DPPH自由基清除率的影响。在单因素试验的基础上,采用Box-Benhnken中心组合设计优化杏仁粕蛋白酶解工艺。结果表明:选用碱性蛋白酶,在酶添加量2 266 U/g、酶解温度48℃、酶解时间209 min的条件下,水解度最高,可达30.16%,与理论预测值29.35%相比,其相对误差约为2.76%,说明模型拟合良好。抗氧化活性研究结果显示,杏仁粕蛋白酶解液具有较高的DPPH自由基清除率(达86.16%),且与常用抗氧化剂BHA和维生素C相比,其DPPH自由基清除能力显著高于0.01%的BHA(P<0.05),但低于0.01%的维生素C(P<0.05)。     

褐口蘑营养乳制作工艺优化

为了丰富褐口蘑精深加工产品种类,提高其附加值。研究以褐口蘑为研究对象,在单因素试验基础上,采用正交优化试验,研究了浆水比,白砂糖添加量,柠檬酸添加量,黄原胶添加量对褐口蘑营养乳感官评分和几种营养成分(酸度、总糖、蛋白质)指标的影响。结果表明,浆水比为1︰7 (g/mL),白砂糖添加量为6%,柠檬酸添加量为0.15%,黄原胶添加量为0.225%时所制成的褐口蘑营养乳在色泽、滋味、气味、组织状态四部分的感官得分最高,得分为88分。此时,各项理化指标的含量分别为酸度0.127%,总糖8.29%,蛋白质0.175%。     

食物营养素降血糖功效和机制研究进展

目前常见降血糖功效的食品营养素主要分为水溶性膳食纤维、多糖、黄酮类、皂苷、微量元素5类。相关营养素降血糖功效研究大多采用动物试验。基于此,本文对不同种类、不同来源及不同剂量的营养素对糖尿病小鼠和大鼠的降血糖效果与降血糖机理进行了系统分析与综述,以期为糖尿病患者日常饮食选择提供科学合理的建议,并为适合糖尿病患者食用的保健食品研发提供参考。     

分子印迹掺杂金属有机框架固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定大米中10种磺酰脲类除草剂

为研发能同时检测多种磺酰脲类农药的高效方法,本研究以甲磺隆为模板分子,4-乙烯吡啶(4-VP)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)为交联剂,利用沉淀聚合法合成分子印迹聚合物(MIP)。将其与制备的金属有机框架(MOFs)材料掺杂混合作为复合填料制成MOFs-MIP固相萃取柱,结合高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS),建立了大米样品中单嘧磺隆、甲磺隆、噻吩磺隆、氯磺隆、氟磺隆、氟胺磺隆、氯嘧磺隆、烟嘧磺隆、苄嘧磺隆、吡嘧磺隆共10种磺酰脲类除草剂残留的高通量痕量分析方法。采用扫描电镜分别对MIP和MOFs材料的表面形态进行表征,优化活化液、上样液、淋洗液和洗脱液等固相萃取条件。结果表明,5 mL乙腈、5 mL水为活化液,80%乙腈-水为上样液,3 mL水淋洗,10 mL乙酸-甲醇(1:9,V/V)与5 mL丙酮先后洗脱,40 mg MIP与10 mg MOFs材料混合作为SPE柱填料配比,此时检出限(LOD)在0.07~0.5 μg/kg之间,样品浓度在1~100 μg/kg范围内线性关系良好(R2>0.991),回收率在79.75%~99.05%之间,相对标准偏差在6.7%~13.8%之间。本方法具有检测灵敏度高、稳定性强等优点,可实现对大米样品中磺酰脲类除草剂残留的类特异性快速检测。     

β2肾上腺素受体基因的改造及在无细胞合成体系中的表达

依据大肠杆菌密码子偏好性,设计合成β2肾上腺素受体（β2 adrenergic receptor,β2AR）基因序列,应用大肠杆菌无细胞系统对其进行高效表达,经负载镍离子的顺磁颗粒MagneHis? Ni-Particles纯化后,对受体蛋白进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）和活性鉴定。结果表明：改造后的β2AR基因密码子适应指数（codon adaptation index,CAI）为0.96,GC含量从58%降低到46.17%,更有利于该基因在大肠杆菌系统中的表达。表达体系中优化后的Mg2＋浓度为22?mmol/L,此时表达量为1 250 μg/mL。SDS-PAGE分析显示,纯化蛋白在47?kDa左右出现清晰的特异性条带,与预期结果一致,纯度大于90%。直接酶受体分析检测结果显示,当纯化受体蛋白1∶500稀释包被时,该重组受体与盐酸克伦特罗、沙丁胺醇及莱克多巴胺的酶标记物结合的OD值分别为0.976、0.836和0.728,亲和活性依次降低。β2AR蛋白在无细胞体系中的成功表达,为研发基于受体的β激动剂多残留快速检测技术提供了理论支持。