β_2肾上腺素受体基因在Sf9细胞中的表达及纯化

通过密码子优化、昆虫杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac)构建、表达条件筛选及镍柱亲和层析,研究β_2肾上腺素受体(β_2 adrenergic receptor,β_2AR)基因(β_2AR)在昆虫细胞Sf9中的高效表达及纯化策略。方法:人工合成改造后的β_2AR基因,将其克隆至转移载体p Fast Bac1中,构建重组杆状病毒表达质粒p Fast Bac1-β_2AR’,转染昆虫细胞Sf9,优化表达条件,采用镍离子亲和层析法纯化重组蛋白并进行活性鉴定。结果:适宜的表达条件为感染细胞使用的感染复数5、感染后表达时间48 h,Western blot分析显示在47 k D左右处出现清晰的特异性条带,与预期结果一致。纯化的受体蛋白纯度大于90%,活性鉴定结果显示该受体蛋白可特异性吸附盐酸克伦特罗、沙丁胺醇及莱克多巴胺3种β激动剂的酶标记物,OD值分别为0.983、0.947和0.912。结论:本研究实现了β_2AR受体在Sf9细胞中的表达,且纯化后的受体蛋白保持了较好的β激动剂亲和活性,为利用β_2AR受体开展β激动剂多残留快速检测技术提供了依据。     

高密度CO2对虾肌球蛋白微观形貌的影响

以凡纳滨对虾肌球蛋白为研究对象,用原子力显微镜观察高密度CO2（dense phase carbon dioxide, DPCD）处理压强、温度和时间对肌球蛋白微观形貌的影响,探讨DPCD处理过程中肌球蛋白的聚集行为特征。结果 表明：在不同的DPCD处理压强、温度和时间条件下,肌球蛋白变性和聚集的程度有显著差异;DPCD诱导肌球蛋白 变性聚集过程中,不仅有热效应引起的蛋白质分子间的相互作用,还有高压下CO2与蛋白质分子间的相互作用。     

β2肾上腺素受体基因的改造及在无细胞合成体系中的表达

依据大肠杆菌密码子偏好性,设计合成β2肾上腺素受体（β2 adrenergic receptor,β2AR）基因序列,应用大肠杆菌无细胞系统对其进行高效表达,经负载镍离子的顺磁颗粒MagneHis? Ni-Particles纯化后,对受体蛋白进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）和活性鉴定。结果表明：改造后的β2AR基因密码子适应指数（codon adaptation index,CAI）为0.96,GC含量从58%降低到46.17%,更有利于该基因在大肠杆菌系统中的表达。表达体系中优化后的Mg2＋浓度为22?mmol/L,此时表达量为1 250 μg/mL。SDS-PAGE分析显示,纯化蛋白在47?kDa左右出现清晰的特异性条带,与预期结果一致,纯度大于90%。直接酶受体分析检测结果显示,当纯化受体蛋白1∶500稀释包被时,该重组受体与盐酸克伦特罗、沙丁胺醇及莱克多巴胺的酶标记物结合的OD值分别为0.976、0.836和0.728,亲和活性依次降低。β2AR蛋白在无细胞体系中的成功表达,为研发基于受体的β激动剂多残留快速检测技术提供了理论支持。     

基于人性化设计的新型刹车油门合成装置

刹车油门误操作、刹车油门的转换动作不合理一直是困扰驾车一族的两大难题。以人机工学理论为依据,对其进行全方位综合研究,设计出基于人性化的新型刹车油门合成装置。陈述了该装置设计思路、结构组成与特点等。     

儿童玩具包装的趣味性

从儿童的消费心理、玩具包装趣味性的价值和儿童玩具包装趣味性的表现这3个方面来阐述儿童玩具包装的趣味性,并列举一些学生的作品和各种实例来进行分析。     

电火花加工放电爆炸力对材料蚀除机理的研究

通过对不同电源、不同电极材料、不同介质条件下单脉冲放电爆炸力及放电蚀坑形貌和尺寸的实验研究,对增爆电源放电爆炸力的蚀除机理进行了初步研究。研究结果表明,虽然增爆电源的单个脉冲能量仅为普通电源的1／2,但其放电冲击波峰值压力及放电蚀坑直径却远远大于普通电源,因而提高了加工效率。研究结果还表明,增爆电源的材料蚀除机理主要是热爆炸蚀除,即材料是先被放电通道的瞬时高温熔化,处于熔化状态的材料在放电爆炸力的作用下被抛出的。放电爆炸力的大小与放电介质密度有关,介质密度越大,放电爆炸力越大。     

响应式Web技术的传统村镇虚拟旅游平台设计与实现

中国保存数量众多、资源价值较高的传统村镇。针对其空间和属性信息查询困难、旅游服务信息匮乏的问题,本文应用响应式网页设计与虚拟现实等技术搭建了中国传统村镇虚拟旅游Web GIS平台,通过一套代码实现多类硬件设备环境的自适应响应调整。系统不仅提供基于传统村镇位置的图文、视频、美食、酒店、停车场、银行及导航等生活信息服务,而且提供传统村镇的全景照片与三维在线虚拟游览服务,对中国传统村镇文化的传播、共享、挖掘具有积极作用。     

燃气锅炉绝氮燃烧数值模拟分析

本文阐述了数值模拟技术在燃气锅炉绝氮燃烧上的应用,根据燃气锅炉相关设计参数及运行数据,通过燃气锅炉仿真数值模拟,分别在空气燃烧工况、绝氮(CO₂+O₂)燃烧工况、变负荷工况进行流场和温度场数值模拟测试;过量空气系数为1.15与1.1时不同氧气、二氧化碳比例的锅炉燃烧情况;以及变负荷下燃气锅炉的运行燃烧情况。为燃气锅炉绝氮燃烧试验装置奠定坚实的理论基础。     

北京市南水北调环线工程2021年防汛工作与思考

北京市南水北调环线工程是北京市南水北调配套工程的重要组成部分,承担着向北京市东部、南部主要水厂输送南水北调水的任务.汛期,该工程沿线大量地下阀井易积水威胁井下设备安全,且作为南水北调中线下游工程,水质水量易受工程上游省份险情影响.2021年,北京市南水北调环线管理处围绕"工程沿线阀井积水防治"及"水质水量调度"两大重点...