甲巯咪唑致中国人群胰岛素自身免疫综合征的临床特点分析

目的:探讨中国人群甲巯咪唑致胰岛素自身免疫综合征（IAS）的临床特点。方法:收集1985年1月1日至2019年6月30日国内外期刊公开发表的中国人群甲巯咪唑致IAS病例文献,进行回顾性分析。结果:共统计95例甲巯咪唑致IAS患者,男性发病年龄早于女性,性别比为1∶2.31;服用甲巯咪唑30 mg/d后在1月至3月内发生IAS最多,主要在夜间及凌晨以神经性低血糖为首发症状,血糖一般在2 mmol/L以下,胰岛素浓度常≥100 mU/ L,胰岛素自身抗体（IAA）阳性。胰腺影像学无明显异常;停用甲巯咪唑,给与对症及激素治疗后,症状逐渐缓解,激素治疗与非激素治疗低血糖消失时间无明显区别。结论:甲巯咪唑致IAS是一种临床上少见的自身免疫性疾病,服药期间如出现低血糖或高血糖现象,应及时就诊和处理,正确治疗后,一般预后良好。     

免疫初乳中IgG1和IgG2的分离纯化

采用硫酸胺盐析,DE－52离子交换色谱,SephacryIS-100凝胶过滤色谱从免疫初乳分离纯化出了IgG1和IgG2,经SDS－PAGE电泳及免疫电泳证实为纯品,并对IgG1和IgG2的抗体凝集价进行了测定。     

副溶血弧菌胶体金检测试纸条的改进

研制一种快速、灵敏、简便的胶体金免疫试纸条,用于改进副溶血弧菌的检测。通过胶体金与特异性针对于副溶血弧菌的单抗偶联,同时在NC膜上包被兔多抗、驴抗鼠的IgG分别作为检测线和质控线,制备免疫层系试纸条,测定试纸条的灵敏性与特异性。结果表明,当加入由胶体金标记的羊抗鼠二抗,能将显色强度提高5倍,明显有利于肉眼的观察。在纯培养物中试纸条的灵敏度为106CFU/mL,且与3株不同的副溶血弧菌均有阳性反应,与26株常见的菌均无交叉反应。同时在添加阪崎肠杆菌、志贺氏菌的鱼肉样本中,检测限为107CFU/mL。改良的副溶血弧菌胶体金免疫层系试纸条的建立,有助于加强食品中该菌的检测,提供了一种快速、灵敏、简便的方法。     

双抗体夹心酶联免疫吸附法检测鱼糜制品中鸡蛋卵白蛋白

目的 建立双抗体夹心酶联免疫吸附(sandwich enzyme linked immunosorbent assay, sELISA)法检测鸡蛋卵白蛋白(ovalbumin, OVA)的方法,组装定量检测鱼糜制品中OVA含量的ELISA检测试剂盒。方法 确定各步骤反应时间,使用棋盘法确定捕获抗体和检测抗体的最佳工作浓度,建立检测方法并对其性能进行评价。结果 反应最佳条件为:抗原孵育20 min,检测抗体孵育20min,酶促反应显色10 min。兔抗OVA抗体为捕获抗体,工作质量浓度为1μg/mL,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)标记兔抗OVA抗体为检测抗体, 1:5000 (V:V)稀释。采用四参数逻辑曲线拟合标准曲线,所建立sELISA方法的检测范围为8.5～200.0 ng/mL,检出限为3.5 ng/mL,定量限为8.5 ng/mL。批次内和批次间的变异系数分别为2.31%～4.58%和6.06%～12.23%;鱼糜基质中的回收率为80%～130%;测得28种常见食物样品中4种样品的交叉反应率小于0.002%;试剂盒在4℃保存6个月期间,...     

可视化普鲁士蓝纳米酶免疫亲和柱快速检测植物源性食品中氯吡脲

目的 建立快速检测植物源性食品中氯吡脲的可视化普鲁士蓝纳米酶免疫亲和凝胶柱的检测方法。方法 首先通过水热法制备了类过氧化氢酶性质的普鲁士蓝纳米粒子。其次,通过3-巯基丙酸衍生反应合成了氯吡脲半抗原,通过活泼酯法原理偶联合成氯吡脲完全抗原,通过免疫小鼠成功制备了氯吡脲多克隆抗体。最后,制备了普鲁士蓝纳米酶标记抗原、琼脂凝胶闭合胶体、抗体胶,组装了普鲁士蓝纳米酶可视化免疫亲和凝胶检测柱,建立了检测方法,测试了凝胶检测柱的特异性,检测了4种实际样品,得到方法检出限。结果 合成的普鲁士蓝纳米粒子呈立方体形状,分布均匀集中,粒径约为145.68 nm±12.00 nm,能够催化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)和过氧化氢(hydrogen peroxide,H₂O₂)混合溶液显蓝色,具有类过氧化氢酶性质。制备的氯吡脲多克隆抗体半数抑制率(50%inhibiting concentration,IC50)为2.35 ng/mL,抗血清效价最高为1:72000倍。凝胶检测柱的最佳组装条件...     

副溶血性弧菌多克隆抗体制备及应用

以热灭活副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP ATCC17802)免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,用间接酶联免疫吸附法测定抗血清效价,纯化后的多克隆抗体效价为512000。该抗体与5株副溶血性弧菌均能特异性结合,但与其他12株非副溶血性弧菌无交叉反应。在此基础之上建立了间接竞争酶联免疫吸附法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA),并优化了抗原抗体浓度、二抗浓度、封闭液等条件。结果表明,该法的线性范围为5×10^4~107CFU/m L,线性回归方程为y=0.21x-0.74(R2=0.99),IC50为106CFU/m L,最低检出限为1.7×10^4CFU/m L,板内变异系数为2.61%~4.15%,板间变异系数为4.71%~8.74%。用建立的ic-ELISA检测市场中鱼、贝类养殖水和实验室用水中的VP,实验结果与国标检测方法的结果一致。该方法快速便捷,灵敏度高,准确性好,为进一步研究VP的快速检测奠定了基础。     

蛋白A免疫吸附治疗高群体反应性抗体肾移植受者的研究

目的探讨葡萄球菌蛋白A免疫吸附治疗高群体反应性抗体肾移植受者的临床疗效。方法采用蛋白A免疫吸附柱对5例高群体反应性抗体(PRA)肾移植受者进行免疫吸附治疗,共治疗21次,治疗后择期进行肾移植。结果4例患者肾移植前伴有高水平PRA的患者,蛋白A免疫吸附治疗后血清PRA和IgG、IgM水平明显下降,肾移植术后未发生急性或超急性排异反应;1例伴有高水平PRA、肾移植术后发生急性排异反应的患者,蛋白A免疫吸附治疗后血清PRA和免疫球蛋白水平明显下降,急性排异反应迅速缓解。结论蛋白A免疫吸附能有效降低患者血清群体反应性抗体水平,防治肾移植术后排斥反应。     

抗玉米赤霉烯酮单克隆杂交瘤细胞系的建立及单抗生产

为快速检测食品中的玉米赤霉烯酮 (Zearalenone以下简称ZEN) ,建立了抗ZEN的单克隆杂交瘤细胞株。用ZEN BSA偶联物免疫 8～ 10周龄雌性BalB c小鼠后 ,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2 0融合 ,经过 4～ 5次亚克隆建立了稳定分泌抗ZEN抗体的杂交瘤细胞株 ,分别命名为Z2A4、Z8D6。将上述 2种杂交瘤细胞分别注入BalB c小鼠腹腔 ,获得含抗ZEN单克隆抗体的腹水。将腹水用饱和硫酸铵盐析法纯化 ,得到Z2A4、Z8D6单克隆抗体。经鉴定 ,其亚类为IgG1,抗体腹水效价Z2A4和Z8D6分别为 1∶1 6× 10 6和 1∶3 2× 10 6;分子量均为 15 0 0 4 0 (15 0kD) ;参考工作浓度分别为1∶4 0 0 0 0和 1∶10 0 0 0 0 ;纯化后抗体IgG含量分别为 34和 39mg ml ;抗体与其它霉菌毒素无交叉反应(交叉反应率 <1% ) ,具有较高特异性 ;抗体亲和力常数Z2A4和Z8D6分别为 5 5 2× 10 8和 4 6 8×10 9mol L。     

酶联免疫法快速测定原料乳中αs-酪蛋白质量浓度

用牛αs-酪蛋白纯品免疫新西兰白兔，制得兔抗牛αs-酪蛋白的多克隆抗体。以αs-酪蛋白包被抗原，自制抗体为一抗，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为二抗，邻苯二胺（OPD）为底物，建立了牛乳中αs-酪蛋白的间接ELISA检测方法。检测的线性范围是25～1200ng／mL，相关系数是0．9825，回收率在91．97％‖115．61％之间，证明可以用酶联免疫法简单快速地测定牛乳中的αs-酪蛋白，因为该蛋白在酪蛋白中质量浓度稳定，所以可以计算出牛乳中酪蛋白的质量浓度。显然该方法可以用于牛乳掺杂使假的鉴别和原料奶酪蛋白质量浓度是否合格的快速检测。     

基于改进免疫克隆选择算法的电动汽车充电站选址定容方法

随着电动汽车渗透率的提高,充电基础设施规划应更加科学、合理,提出一种基于改进免疫克隆选择算法的电动汽车充电站选址定容方法.首先,分析充电站的容量、位置和服务范围之间的关系,以充电站的覆盖率和重合度、规划区域内的功率以及充电站的充电功率为约束条件,建立以充电站年总成本最小为目标的充电站选址定容模型.然后,提出一种抗体间亲...