嗜热糖苷酶Fpendo5A转化绞股蓝皂苷XLIX的产物鉴定及分离纯化

目的对嗜热糖苷酶Fpendo5A转化绞股蓝皂苷XLIX的产物进行鉴定及分离纯化。方法应用Fpendo5A酶转化绞股蓝皂苷XLIX,通过高效液相色谱法(HPLC)和快速分离液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(rapid resolution liquid chromatography-quadrupole-time of flight-mass spectrometry/mass spectrometry,RRLC-Q-TOF MS/MS)对转化产物进行鉴定,全制备型高效液相色谱对转化产物进行分离纯化。结果在65℃和p H 6.0条件下,利用Fpendo5A酶转化绞股蓝皂苷XLIX 48 h后,获得单一转化产物,该酶能够水解绞股蓝皂苷XLIX的C20位葡萄糖苷键,生成长梗绞股蓝皂苷Ⅰ。纯化后的转化产物纯度达95.42%,产率为21.6%。结论利用Fpendo5A酶能够成功转化绞股蓝皂苷XLIX,纯化后的绞股蓝皂苷转化产物纯度好,产率高,为今后的药理活性及相关基础研究奠定了基础。     

薯蓣皂苷元生物素标记探针的合成及其抗肿瘤活性评价

薯蓣皂苷元具有抗肿瘤作用,为了研究其具体作用机制,设计合成了2种生物素化薯蓣皂苷元分子探针.以薯蓣皂苷元和生物素为原料,经过酯化、酰胺化、取代、水解反应等步骤分别合成含有长臂亲脂性链和亲水性链的薯蓣皂苷元生物素标记探针3和8,并以MTT法对其进行抗肿瘤活性评价.合成得到的探针分子以及重要中间体采用MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR表征,确认结构与目标化合物一致.细胞活性实验结果表明合成的探针分子3和8具有与薯蓣皂苷元相当的抗肿瘤活性,为后续薯蓣皂苷元抗肿瘤靶标蛋白的发现奠定基础.     

HPLC法同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1的含量

目的:采用HPLC法同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1含量。方法:采用SGE protecol C18(5μm,4.6×250mm)色谱柱,流动相为乙腈—水梯度洗脱(0~12min,19∶81;12~60min,19~36∶81~64),检测波长为203nm,流速1.0mL/min,进样量20μL。结果:人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1分别在25.625~430mg/L、26.875~410mg/L、10.625~170mg/L范围呈线性,相关系数r分别为0.9999、0.9998、0.9996;该方法重复性及回收率均符合要求。结论:本法用于同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1的含量,具有简便、准确、高效等特点。     

人参皂苷CK、淫羊藿苷对体外培养精子的剂量负荷试验

目的:项目拟通过观察在培养液中加入较高剂量的人参皂苷CK(Ginsenoside,G组)、淫羊藿苷(Icraiin,I组)两种药物前、后精子死亡率数据,评估两种药物单体在较大剂量时对体外精子的死亡率的影响。方法:新鲜液化的精液(semen)标本40份,F-10培养液调整浓度为1.0×107/m L,分别添加不同剂量的人参皂苷CK(Ginsenoside,Gin CK)、淫羊藿苷(Icraiin,Icr)按照不同药物浓度,G组分为500μg/m L组(G1组),100μg/m L组(G2组),I组分为500μg/m L(I1组),100μg/m L(I2组);设不添加任何物质的F-10组(F-10,F组)为阴性对照组,培养24 h后分别检查各组精子活动率和死亡率。结果:培养24 h后,精子死亡率从低到高分别是培养24 h后,I2组死亡率为41.31±17.49,F组死亡率为47.50±19.85,G2组死亡率为55.75±24.93,I3组死亡率为58.05±19.06,G1组死亡率为98.84±1.62。精子死亡率从低到高分别是I2组、F组、G2组、I1组、G1组,各组比较有差异(P0.05)。结论:较大剂量的Gin CK、Icr,均可引起体外培养的精子死亡率增高;在0.1 mg/m L的浓度下的Gin CK对精子的致死作用已经比较明显,而0.5 mg/m L对体外培养精子来说是致死剂量(98.84%),在0.1 mg/m L的剂量下的淫羊藿苷对精子的致死作用并不明显,在0.5 mg/m L剂量下Icr对精子致死作用有所提高,但远未达到Gin CK 98.4%的致死率。     

大豆资源的开发利用（一）

论述了大豆资源综合开发利用现状及其途径，探讨了通过现代食品工程高新技术、研究开发适合现代人消费的具有生理活性物质和医疗、保健食品功能性成分的生理功能和多种功效，如异黄酮、卵磷脂、皂苷、维生素E、甾醇、低聚糖、膳食纤维。     

松香基吸附树脂纯化三七总皂苷及吸附机理

该研究以氢化松香（β-丙烯酰氧乙基）酯、甲基丙烯酸为单体,二乙烯基苯为交联剂合成了新型松香基吸附树脂（Rosin-Based Adsorption Resin,RBAR）,采用FT-IR、TGA、粒径分析、SEM和氮气吸附-脱附等温线对RBAR进行了表征,并研究了RBAR对三七总皂苷（Panna notoginseng Saponins,PNS）的吸附。结果表明RBAR具有良好的热稳定性、均一的颗粒粒径、规整的球形、较高的比表面积（563.37 m2/g）和丰富的微/介孔结构。在PNS初始质量浓度6 mg/mL,温度328 K,固液比0.046 g/mL,吸附时间 180 min下,平衡吸附量127.97 mg/g,树脂用φ=70%乙醇再生,重复使用10次后吸附率为97%以上。最佳条件下用RBAR对PNS初提物纯化,三七总皂苷质量分数从46%提升到80%,与商业树脂D101相比有更好的解吸和纯化效果。通过吸附动力学、吸附等温线、热力学模型拟合和孔结构分析探讨了吸附机理。吸附动力学符合准一级动力学,主要由液膜扩散控制传质过程;吸附等温线符合Freundlich模型;吸附机理为非均质多层物理吸附,主要由疏水作用、氢键作用和孔隙填充效应共同提供吸附驱动力。为三七总皂苷纯化新技术的开发提供了理论依据。     

酸枣仁总皂苷提取工艺优化及其改善睡眠作用机制研究

目的 优化酸枣仁总皂苷的提取工艺, 并研究其改善睡眠作用。方法 本研究采用单因素和响应面实验优化高压脉冲电场法提取酸枣仁总皂苷的工艺参数。同时采用随机法把小鼠分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组和酸枣仁总皂苷低、中、高剂量组。除正常对照组外, 其余5组灌胃对氯苯丙氨酸(parachlorophenylalanine, PCPA)溶液构建失眠小鼠模型。记录各组小鼠3 min内的水平、垂直和修饰活动得分, 测定小鼠神经递质中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)、去肾上腺素(noradrenaline, NE)、多巴胺(dopamine, DA)、谷氨酸(glutamic acid, Glu)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)的含量。结果 最佳提取工艺条件为: 乙醇浓度71%、电场强度20 kV/cm、脉冲数10, 此条件下酸枣仁总皂苷得率为7.18%。改善睡眠实验结果表明: 酸枣仁总皂苷能降低PCPA诱导失眠模型小鼠的水平、垂直和修饰得分, 升高失眠模型小鼠神经递质中5-HT和DA的含量, 降低NE的含量, 同时降低Glu含量和Glu/GABA的比值, 提高GABA含量, 表明其对PCPA诱导失眠模型小鼠有良好的改善睡眠作用。结论 该研究获得了酸枣仁总皂苷的最佳提取工艺, 得到的酸枣仁总皂苷对PCPA诱导失眠模型小鼠有良好的改善睡眠作用。     

油茶籽饼中茶皂苷的超声-微波辅助法提取工艺优化

为提高茶皂苷的提取率,扩大茶皂苷的应用范围,以脱脂油茶籽饼为原料,采用超声-微波辅助法提取茶皂苷。以油茶皂苷提取率为考察指标,在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman试验设计筛选出具有显著影响的试验因素,再通过响应面法对茶皂苷提取工艺进行优化。另外,将超声-微波辅助法提取茶皂苷的工艺与超声辅助法和微波辅助法提取工艺进行了对比。结果表明：超声-微波辅助法提取茶皂苷的最佳工艺条件为乙醇体积分数59%、料液比1∶12、提取液pH 7、超声功率475 W、超声时间4 min、超声工作2 s间隔2 s、微波功率480 W、提取温度59℃、微波提取时间8 min,在此条件下茶皂苷提取率为98.40%,产品纯度为64.7%;超声辅助法和微波辅助法茶皂苷的提取率分别为69.06%和71.40%。与超声辅助法和微波辅助法相比,超声-微波辅助法能够显著提高茶皂苷提取率。     

虎眼万年青皂苷提取工艺研究及其口服液的研制

通过正交实验确定纤维素酶酶解提取虎眼万年青皂苷最佳工艺,并将所得皂苷研制成一种保健食品—虎眼万年青皂苷口服液。酶解提取最佳工艺为料液比1∶15,纤维素酶1%,50℃酶解30min。虎眼万年青皂苷口服液配方为虎眼万年青皂苷1.2%、香精0.04%、白砂糖5%、异抗坏血酸钠0.015%、苹果酸0.25%。     

防刺参不同部位营养成分的分析及综合评价

对仿刺参体壁、肠、呼吸树营养成分作了分析和测定,结果表明,参肠、呼吸树中蛋白质、粗脂肪、多糖、皂苷含量均高于体壁,氨基酸的EAA/TAA、EAA/NEAA指标更接近FAO/WHO的理想模式,脂肪酸EPA的含量高于体壁。经综合评价分析,海参肠、呼吸树具有较高的营养价值。