荧光定量PCR在预测微生物学中的应用

食品微生物是影响食品安全的重要因素之一,快速准确预测食品加工和贮存过程中的微生物变化对食品风险评估具有重要意义。本文首先介绍了荧光定量PCR技术的历史及其发展,着重介绍了荧光染料法和水解探针法的基本原理,讨论了其优缺点并对其应用进行总结和展望。然后介绍了预测微生物学的历史及其发展,同时对一二三级模型进行了归纳和分类,并讨论预测模型的意义及在食品领域研究所需要注意的问题。最后介绍了荧光定量PCR技术在预测微生物学中的应用,归纳了当前国内外研究的现状,并指出发展缓慢的可能原因,提出荧光定量PCR技术只停留在检测层面并没有很好用于预测微生物学模型的构建。通过本综述以期推动荧光定量PCR技术在预测微生物学领域的全面应用,进而推动预测微生物学的进一步发展。     

水产品批发市场中抗生素抗性基因的污染分析

为了探究待售水产品中抗生素抗性基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)在水产品批发市场中的扩散污染情况,选取上海市3个大型水产品批发市场作为研究对象,采用PCR的方法,对市场内部和市场附近的排污沟表层淤泥中5大类(4种磺胺类、8种四环素类、6种β-内酰胺类、5种氯霉素类、4种链霉素类)共27种ARGs进行了检测,并利用PCR-DGGE技术分析了细菌种群多样性。结果显示共有17种ARGs在批发市场淤泥中被检出,其中磺胺类、四环素类和链霉素类ARGs的检出率较高且检出种类较多,表明水产品批发市场含有种类丰富的ARGs,水产品以磺胺类、四环素类和链霉素类ARGs污染为主。对市场外围的检测显示市场外围区域ARGs的种类分布略低于市场内部,表明水产品批发市场中ARGs的存在会通过污水排放途径扩散到周边环境。DGGE图谱的分析结果显示,3个批发市场污泥样品细菌种类差异性较大,表明环境中ARGs的种类分布与细菌的种类并无直接关联。本研究表明水产品携带的ARGs会扩散到水产品批发市场中,导致水产品批发市场成为ARGs的重要储存库,以此造成的污染会进一步传播到周边环境,此外,这些种类丰富的ARGs重新扩散到待售水产品中的风险很大,需引起人们足够的重视。     

酸性电解水冰对小黄鱼品质及肌肉组织中酶活力变化的影响

为探讨酸性电解水(acidic electrolyzed water,AEW)冰对水产品的保鲜效果,以小黄鱼为对象,研究小黄鱼贮藏7 d过程中酶活力及微生物菌落总数的变化。结果表明,AEW冰抑制酸性磷酸酶、组织蛋白酶B活性的效果不明显,但对组织蛋白酶D、脂肪酶活性有显著的抑制效果(P0.05);传统平板计数以及聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳结果显示,AEW冰能抑制鱼体上腐败微生物的生长,且最大减少量可达0.34(lg(CFU/g))。因此,AEW冰技术作为一种新型高效杀菌保鲜技术,具有广阔的应用前景,相比于自来水冰更加有利于水产品的贮藏保鲜。     

上海市生食三文鱼中副溶血性弧菌污染的风险分析

为了解上海市生食水产品的安全状况,为食品安全分析和监管提供理论依据,研究上海市生食三文鱼为代表的生食水产品中副溶血性弧菌的污染情况,对上海市3 个批发市场进行监测分析,在2013年基于GB/T 4789.7-2008《食品卫生微生物学检验：副溶血性弧菌检验》方法共检测了90 个样品,副溶血性弧菌检出率为20.00%,其中致病性副溶血性弧菌（tdh＋）的检出率为1.10%,使用MEGA软件根据16S rDNA序列开展了菌株多样性分析;根据调查的副溶血性弧菌在生食三文鱼中的污染情况,使用@Risk 5.5 软件分析了生食三文鱼可能引发副溶血性弧菌食物中毒的风险,经Beta-Poisson剂量反应模型、蒙特卡洛模拟等分析后表明,生食三文鱼患病的概率为2.02×10－6,即每百万人有2 人发病;根据上海市三文鱼的平均消费总量,上海市居民每年生食三文鱼因副溶血性弧菌污染可能的患病人数为111 人。上海市居民生食三文鱼由副溶血性弧菌污染引起疾病的风险较小,控制副溶血性弧菌的污染量和每次三文鱼的消费量是减少风险的关键。     

南美白对虾养殖水体5株疑似病原菌的分离与初步鉴定

应用TCBS(硫柠胆蔗琼脂)培养基从上海金山区南美白对虾(Litopenaeus vannamei)养殖水体中分离筛选出5株优势疑似病原菌(编号为S1、S2、S3、S4、S5),应用ARDRA图谱分析、ERIC-PCR分析结合16S rD- NA的PCR扩增与测序等多相分子生物学方法对其进行了鉴定。结果表明,S1为Pseudomonas属细菌;S2为Leclercia属细菌;S3为Exihuobacterium属细菌;S4为Jeotgalibacillus属细菌;S5为Staphylococcus属细菌。GenBank登录号为EU251039～EU251043。其中S2、S3、S4是首次从南美白对虾养殖水体中分离出来的疑似病原菌。结果还表明,TCBS培养基并非专一性选择培养弧菌的培养基,其他疑似病原菌也可以在该培养基中生长。     

气味指纹技术在肉品品质及安全检测中的应用

气味指纹技术是借助色谱、质谱以及传感器等技术手段,结合多元统计分析方法,对挥发性化合物进行分析用以表征样品信息的技术。近年来在食品中的应用领域越来越活跃,本文简要介绍气味指纹技术(odor fingerprint technique),主要包括电子鼻技术、气质联用技术及其数据处理方法,综述其在肉品品质及安全检测中的应用,具体阐述其在肉品新鲜度、风味和微生物检测中的应用。同时展望气味指纹技术在肉品品质及安全检测中的存在问题及发展前景,为更好应用该技术对肉品质量安全控制提供参考。     

应用PCR-DGGE监测酸性电解水对虾的杀菌效果

目的：考察酸性电解水对虾的杀菌效果。样品虾处理方法为：室温(20℃)条件下酸性电解水处理不同时间(处理1min或5min);不同温度(20℃或50℃)酸性电解水处理5min;室温(20℃)条件下不同处理液(酸性电解水或2%乙酸)处理5min。利用平板培养结合PCR-DGGE技术监测酸性电解水对虾的杀菌效果。结果：50℃酸性电解水处理,虾中菌数减少1.44 lg(CFU/g),其他处理减少小于1.0 lg(CFU/g);不同处理时间对杀菌效果影响不显著;2%乙酸或50℃酸性电解水的杀菌效果显著高于室温酸性电解水(P＜0.05);PCR-DGGE指纹图谱分析结果显示：50℃酸性电解水处理后,虾中细菌种类不变,其他处理比对照(无处理)有不同程度的减少;处理1min的DGGE指纹图谱和对照极相似;50℃酸性电解水处理和对照中等不相似;其他处理和对照中等相似。结论：50℃酸性电解水对虾具有较好的杀菌效果,PCR-DGGE技术能用于监测酸性电解水对虾的杀菌效果。     

基于量子点可视技术快速检测鲜食农产品中食源性致病菌的应用研究进展

鲜食农产品营养损失少，食用方便，已成为健康饮食新食材和膳食结构的重要组成部分。但由于在运输、贮藏等环节中易受到环境条件影响导致食源性致病菌的污染，从而引发腐败变质和食品安全事件，因此，针对鲜食农产品食源性致病菌的污染开发出操作简单、可视化的快速检测技术至关重要。量子点是一类能够产生荧光的纳米级半导体颗粒，具有稳定性好、可视性强、灵敏度高、量子产率高等优点，近年来在食品检测中的应用呈数量级增长。文章在总结了量子点的理化性质、合成制备的基础上，综述了其在食源性致病菌检测中的应用研究进展，并对量子点在鲜食农产品快速检测的主要挑战和应用前景进行阐述，以期为基于量子点的快速检测在食品安全中的广泛应用提供借鉴，为食品安全以及人类健康保驾护航。     

基于生物利用度分析食品中营养强化的价值——以DHA为例

随着生活水平的提高，人们对于食品中的营养要求越来越高。DHA在人体内具有促进神经系统发育等重要作用，尤其在婴幼儿时期更为重要，而食物是人体内DHA补充的重要来源，尤其是深海鱼类和海藻类食物作用更佳。为给大食物观下的精准营养提供参考依据，基于生物利用度的角度，以DHA为例分析食品中营养强化的价值。从天然食品和人工富集食品两个方面介绍了DHA的食品来源，综述了影响DHA食品生物利用度的因素，总结了提高DHA生物利用度的方式，指出了以DHA为代表的营养强化型食品存在的问题以及未来的发展方向。微藻是DHA营养强化食品的重要来源。DHA的生物利用度与其存在形式、结合位点、氧化程度相关，可通过膳食搭配、乳化或微胶囊化处理、加工及烹饪手段选择提高食物中DHA的生物利用度。未来应进一步加强氧化后DHA的活性、DHA精准营养及丰富DHA营养强化食品种类等方面的研究。