酵母菌促进单核细胞增生李斯特氏菌的生长

为了缩短单核细胞增生李斯特氏菌(单增李斯特氏菌)的前增菌时间,提升检测效率,本研究将酵母菌(ATCC9763)作为一种生长促进剂加入到单核细胞增生李斯特氏菌的前增菌培养基(LB1)中,结果表明添加适量的酵母菌可以使单增生李斯特氏菌的生长速度提升近100%,并且这种促进作用与培养过程中酵母菌的接种量、培养基的溶氧量以及培养方式密切相关。根据酵母菌的生长特性分析,这种促进作用产生的原因很有可能是由于酵母菌在生长过程中发酵分解了培养基中的糖类等营养物质,改善了单增李斯特氏菌的营养条件,从而提高了单增李斯特氏菌的繁殖速度。本研究为缩短单增李斯特氏菌检测的富集培养时间,提高检测效率奠定了很好的基础,同时也侧面提示我们要关注发酵类食品遭受单增李斯特氏菌污染的食品安全风险。     

凉茶中DNA提取方法的建立

以凉茶植物源性饮品为研究对象,比较了1种硅胶柱法商品试剂盒和传统CTAB法提取凉茶食品基因组DNA的效果;通过紫外分析法和实时荧光定量PCR法对所提取的DNA进行检测,比较所得DNA的浓度和纯度,以及对下游检测的适用性。结果表明,与传统CTAB法相比,研究所建立的方法提取到的DNA无PCR抑制剂,浓度和纯度能满足后续PCR检测要求。     

偏重亚硫酸钠对微生物法测定维生素B12含量的影响

摘 要: 目的 探究偏重亚硫酸钠对微生物法测定婴幼儿食品和乳品中维生素B12(VB12)含量的影响。方法 通过在标准工作液和样品待测液中添加质量浓度梯度为0、0.0025、0.005、0.02、0.08和0.16 mg/mL偏重亚硫酸钠, 测定不同处理组实验样品中VB12含量值并对质控样品进行质控结果分析, 研究偏重亚硫酸钠对莱士曼氏乳杆菌生长的促进作用及其对原生VB12提取的影响。结果 在标准溶液中添加质量浓度为0~0.16 mg/mL的偏重亚硫酸钠都可以促进莱士曼氏乳杆菌的生长。偏重亚硫酸钠能促进样品中原生VB12的提取。偏重亚硫酸钠终浓度在0~0.16 mg/mL的范围内都不会抑制莱士曼氏乳杆菌的生长, 同时在0~0.05 mg/mL的范围内, 随偏重亚硫酸钠质量浓度增加, 原生VB12的提取会成比例增加。结论 偏重亚硫酸钠在0~0.16 mg/mL浓度范围内可以促进莱士曼氏乳杆菌的生长, 提高食品原生VB12的提取率, 进而增加检测结果的稳定性和准确度。     

乳及乳制品中β-内酰胺酶检测方法的研究

基于酶活测定及青霉素分解实验,研究了市售的生鲜牛乳抗生素分解剂中所含β-内酰胺酶活力、其在乳制品中最低检出限及其在液态乳制品中活力残留,结果表明,市售的四种生鲜牛乳抗生素分解剂(A、C、D及E)主要成分为β-内酰胺酶,其酶活力分别为5672590、1174215、1008126、1414437U/mL;经十万倍稀释后,可检出它们在乳中残留的酶活;经百万倍稀释后,只能检出A在乳中残留的酶活。巴氏杀菌和UHT可导致乳中残留的β-内酰胺酶活力损失近50%。73份牛奶样品中,原料乳中β-内酰胺酶检出率较高,占所检样品总数的12·33%;而巴氏杀菌乳和UHT乳样品β-内酰胺酶检出率较低,仅分别占所检样品的2·74%和1·36%。     

灭菌乳中嗜热脂肪芽孢杆菌商业无菌的最低可视浓度的测定

目的 测定灭菌乳中嗜热脂肪芽孢杆菌的商业无菌检出限。方法 随机购买3种不同品牌的灭菌乳,分别添加10_⁵、10_⁴、10_³、10_²、10_¹、10_⁰ CFU/mL浓度的嗜热脂肪芽孢杆菌制成模拟样品,分别对培养4 d、7 d、9 d、10 d的样品按照GB 4789.26-2013《食品安全国家标准 食品微生物学检验 商业无菌检验》的检验方法检测。结果 3种品牌牛乳的模拟样品商业无菌的最低检出浓度均为10_¹ CFU/mL,同时发现培养10 d后样品中的嗜热脂肪芽孢杆菌并无明显的增殖也无菌落进入休眠状态。对培养10 d后的模拟样品进行菌落计数验证以上结论。结论 灭菌乳中嗜热脂肪芽孢杆菌商业无菌检出限为10_¹ CFU/mL,如果灭菌乳中存在嗜热脂肪芽孢杆菌浓度＜10_¹ CFU/mL时,可能在检验过程中对灭菌乳的芽孢菌出现漏检。灭菌乳中嗜热脂肪芽孢杆菌在培养后无明显增殖,符合商业无菌相对无菌标准。     

基于PCR-DGGE法快速识别肉种类的研究

目的:建立肉及肉制品中动物源性成分快速识别方法。方法:利用动物线粒体DNA设计通用引物,以样品中提取DNA为模板,基于PCR-DGGE技术确定肉及肉制品中所含有的动物源性成分。结果:该方法能准确、快速鉴别常见动物源性成分。结论:该方法可用于肉及肉制品中动物源性成分的准确识别。     

发酵乳活性双歧杆菌种类快速识别及定量研究

本文建立了发酵乳制品中双歧杆菌种类和数量快速测定方法。以发酵乳中双歧杆菌为靶标,采用PCR-DGGE技术快速识别双歧杆菌种类;采用Real-Tine PCR手段测定双歧杆菌数量。研究结果表明,PCR-DGGE能准确、快速鉴别双歧杆菌种类,检出限为105 CFU/g;Real-Tine PCR能准确、快速定量双歧杆菌,检出限为104 CFU/g。该方法可用于发酵乳中双歧杆菌的快速识别和定量。     

脂环酸芽孢杆菌的培养基筛选及优化

比较了脂环酸芽孢杆菌A.acidotcrrstris DSMZ 3922的芽孢在PDA、K培养基和SK培养基中的复苏情况,结果表明,SK培养基是三者中最适合于脂环酸芽孢杆菌生长的培养基;用正交试验L9(33)研究了Ca2+、Mn2+以及Tween 80在SK培养基中的添加浓度对A.acidotcrrstris DSMZ 3922、A.acidiphilus DSMZ14558生长情况的影响,结果表明,3因素对A.acidotcrrstris DSMZ 3922及A.acidiphilus DSMZ 14558生长情况影响的主次顺序均依次为Ca2+>Mn2+>Tween 80.在SK培养基中添加1.5g/L的Ca2+,0.1ppm的Mn2+,以及0.75mL/L的Tween 80是对A.acidotctrstris DSMZ 3922生长较为有利的组合;在SK培养基中添加1.5g/L的Ca2+,0.1ppm的Mn2+,以及0.25mL/L的Tween 80是对A.acidiphilus DSMZ 14558生长较为有利的组合.     

实时荧光定量PCR法鉴定婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种

该研究通过系统发育树分析确定目标基因,并设计引物和探针,建立一种婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）的实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-fqPCR）鉴定方法。通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对该方法进行验证,并对市售的64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的婴幼儿配方乳粉样品进行检测。结果表明,atpD基因在动物双歧杆菌乳亚种间具有较高的种间特异性,种间差异率＞10%,确定其为目标基因。基于该基因建立的RT-fqPCR方法能够特异性的检测动物双歧杆菌乳亚种,检测绝对灵敏度可以达到1 pg/μL,相对灵敏度可以达到103 CFU/mL;基因水平和培养物水平抗干扰能力良好。采用该方法从64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的乳粉样品中均能检测出动物双歧杆菌乳亚种,表明基于atpD基因建立的RT-fqPCR方法能够快速准确的对动物双歧杆菌乳亚种进行检测。     

2011~2015年花生和小麦制品中黄曲霉毒素B1的检测

目的 对2011~2015年花生和小麦制品中黄曲霉毒素B1进行检测分析和安全评价。方法 采用酶联免疫法对2011~2015年的1140个花生类和6475个小麦类制品的黄曲霉毒素B1的含量进行检测。结果 2011~2015年检测的花生类制品合格率分别为95.5%、98%、97.4%、98.3%和98.7%; 检测的各种小麦类制品合格率均为100%。结论 花生类制品合格率逐年上升, 但仍存在一定的质量隐患; 小麦类制品质量均符合国家规定限量。