新疆发酵驼乳中分解植酸盐酵母菌的筛选及鉴定

为发掘和保护新疆牧区传统发酵驼乳中潜在益生酵母菌资源，从新疆伊犁地区不同牧区采集12份传统发酵驼乳样品，通过酵母浸出粉胨葡萄糖（YPD）培养基分离酵母菌，通过富含植酸二钾的培养基初筛及降解植酸盐能力的测定从中筛选可降解植酸盐的酵母菌，通过形态观察、生理生化试验及5.8S rDNA ITS1/ITS4区域序列同源性分析进行菌种鉴定，并测定其耐酸及耐胆盐性能。结果表明，筛选出11株可分解植酸盐的酵母菌，鉴定8株为库德毕赤酵母（Pichia kudriavzevii），2株为白地霉（Geotrichum candidum），1株为乳酸克鲁维酵母（Kluyveromyces lactis），其中库德毕赤酵母菌BJ9-12在模拟胃液和模拟肠液中的存活率分别为87.79%和81.50%，耐酸及耐胆盐性能较好，且培养48 h时分解植酸盐的透明圈直径达到3.45 cm，在发酵食品中具有良好的应用潜力。     

老年人肠道乳酸菌的分离与鉴定及其来源发酵乳杆菌的遗传进化分析

首先对湖北襄阳和恩施地区的健康老年人肠道乳酸菌进行分离与鉴定，然后从中选择发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）进行多位点序列分型（multilocus sequence typing，MLST）分析。结果显示，基于可培养方法，湖北襄阳与恩施地区老年人肠道乳酸菌可以鉴定为以乳杆菌属（Lactobacillus）为主的5 个菌属，15 个种。总的来说，发酵乳杆菌和唾液乳杆菌（L. salivarius）占老年人肠道源乳酸菌分离株总量的55%左右，表明人体肠道可以作为发酵乳杆菌的重要分离来源。基于8 个持家基因的MLST分析表明，25 株来源于肠道的发酵乳杆菌可以划分为25 个序列型，具有极高的遗传多样性；基于选择压力分析与phi-test，选用的8 个持家基因均受到纯化选择作用，且其中仅基因rpoB显著经历了基因重组事件；另外，基于Prim’s和goeBURST的进化分析表明，一半左右的肠道源发酵乳杆菌倾向于形成单独的分支，表明它们具有一定的宿主特异性，可能的原因是为适应肠道环境，这些发酵乳杆菌经历了有异于发酵食品生境的进化历程。     

渗透压胁迫对耐盐乳酸菌发酵特性的影响

采用传统分离培养法从新疆伊犁昭苏县土壤样品中分离筛选耐盐乳酸菌，通过形态观察及分子生物学技术对其进行鉴定，并探究高盐胁迫（7%、8% NaCl）下其生长速率、产酸性能、耐酸、耐胆盐胁迫能力的变化。结果表明，筛选得到4株耐盐乳酸菌，其中菌株a、b、c被鉴定为海氏肠球菌（Enterococcus hirae），菌株d被鉴定为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。在高盐胁迫（7%、8% NaCl）下，L. plantarum d的生长特性、产酸及耐酸性能最好，但耐胆盐能力最差，E. hirae a、b、c的耐胆盐胁迫能力更佳；在10%和12%的NaCl含量下胁迫3 h，4株菌的存活率均能维持在36%以上，其中E. hirae b的耐盐能力最佳，存活率最高。     

氢过氧化物氧化对核桃蛋白结构和乳化特性的影响

采用脂肪氧合酶催化亚油酸氧化的反应体系进行氧化修饰核桃分离蛋白,代表脂质氢过氧化物氧化核桃分离蛋白。通过对不同亚油酸含量下核桃分离蛋白的结构指标进行表征,探讨氢过氧化物氧化对其结构的影响。采用氧化修饰后的核桃分离蛋白制备乳状液,对其乳化特性进行综合评价,结果表明,随着亚油酸添加量的增加,羰基和二硫键含量增加,巯基含量减少,表面疏水性下降,溶液可溶性聚集体转变成不可溶性聚集体,粒径变大。乳液内源荧光光谱分析检测到核桃分离蛋白乳液的构象发生改变。不同的氧化程度,乳液油滴粒径分布不同。适度的氧化,使蛋白质结构展开,暴露出更多的疏水基团,形成可溶性聚合物,乳液油滴粒径降低,乳化活性有所提高,进一步氧化,促进液滴的聚合,致乳化活性下降。结构和乳化功能指标之间的皮尔逊相关系数表明,由HPODE氧化引起的蛋白质结构的改变对核桃蛋白乳化性的影响并不显著。     

传统发酵酸牛奶中产蛋白酶酵母菌的筛选及产酶条件优化

从新疆哈萨克族传统发酵酸牛奶中分离筛产蛋白酶酵母菌菌株,并确定了各菌株的产酶能力。试验从新疆塔城地区采集酸牛奶样品,以蛋白酶活性作为筛选指标进行初筛、复筛,得到5株高产蛋白酶菌株并对其产酶条件进行优化。经形态观察及26S rDNA序列分析鉴定菌株D1-3为Pichia kudriavzevii,E1-5为Issatchenkia orientalis,S1-7为Kluyveromyces marxianus,W1-10为Candida parapsilosis,S1-16为Saccharomyces cerevisiae。对其产酶条件优化得出:在最佳产酶发酵液条件下,菌株D1-3最佳产酶活力达78 U/m L、S1-7为79 U/m L、S1-16为55 U/mL、E1-5为82 U/mL、W1-10为64 U/mL,其最适产酶温度为28℃,W1-10为37℃;菌株最适产酶初始p H、接种量和时间分别为5.0、3%、48 h。     

哈萨克族传统奶酪中NSLAB的分离鉴定

以12份新疆塔城地区哈萨克族传统奶酪为原料,采用ROGOSA和MRS两种培养基分离纯化,共筛选出38株菌种,其中球菌29株,杆菌9株。结合其酸化能力、自溶度、生理生化试验进行筛选,利用16S r DNA分析鉴定。结果表明:24 h酸化能力最弱的菌株为2-4,仅为1.57°T;4-10自溶度最低,为4.09%。经生理生化及16S r DNA基因序列分析鉴定,5-2、8-4、5-4、7-1为乳酸片球菌,4-10、8-7为戊糖片球菌,1-2、2-4、3-5为表皮葡萄球菌,11-1为干酪乳杆菌,11-3、11-6为鼠李糖乳杆菌。新疆塔城地区哈萨克族传统奶酪中优势NSLAB菌株为乳酸片球菌。     

新疆塔城牧区原料乳中酵母菌的分离鉴定

为研究新疆塔城牧区原料乳中酵母菌的分布情况,从该地区采集了7份原料乳样品,通过传统培养方法,采取形态学、生理生化特性鉴定、5.8S rDNA序列同源性分析相结合的方法,分离得到33株酵母菌,共鉴定出6个属8个种,其中20株库德毕赤酵母Pichia kudriavzevii(61%)为优势菌株;2株发酵毕赤酵母Pichia fermentans(6%);3株美极梅奇酵母Metschnikowia pulcherrima (9%);2株乳酸克鲁维酵母Kluyveromyces lactis (6%);2株马克思克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus(6%);2株胶红酵母Rhodotorula mucilaginosa(6%);1株葡萄有孢汉逊酵母Hanseniaspora uvarum(3%);1株单孢酿酒酵母Kazachstania unispora(3%)。研究表明,该地区原料乳中的酵母菌多样性较好,有其独特的酵母菌资源,这为研究本地区的微生物资源提供了基础资料。     

PB试验优化德氏乳杆菌增殖培养基的研究

试验对一株来源于传统酸奶的优良德氏乳杆菌（Lactobacillus delbrueckii）ATx生长所需的增殖因子进行了研究。在MRS培养基的基础上,测定了菌株ATx的生长曲线,并选取谷氨酸钠、磷酸吡哆醛、抗坏血酸、啤酒、乳糖、胡萝卜汁、番茄汁、pH为增殖因子。采用单因素试验确定每个因子的最优水平,Plackett-Burman试验考察各因子对菌株ATx细胞增殖的影响,通过最陡爬坡与中心组合试验对增殖因子进行优化。结果表明,谷氨酸钠、啤酒以及pH对菌株ATx的增殖具有显著影响（P＜0.05）,当MRS培养基中添加谷氨酸钠21.5 g/L、啤酒26.8 mL/L、初始pH值为6.4时,德氏乳杆菌ATx的活菌数最大为（7.56±0.23）×109 CFU/mL,为高活性发酵剂的制备提供了理论参考。     

自然发酵哈密瓜果汁中酵母分离与鉴定

从自然发酵的哈密瓜汁中分离得到25株形态较好的酵母菌株,经过初筛、复筛,得到1株产酒精能力好,产气较快,最适温度28℃,能耐受150mg／L的SO2,耐浓度为15％的酒精的酵母菌株HM02。经鉴定该酵母为酵母属的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisive）。     

嗜热β-葡聚糖酶产生菌的筛选及其培养基优化研究

以大麦β-葡聚糖为唯一碳源,从吐鲁番地区采集的土样中筛选到1株热稳定性β-葡聚糖酶产生菌株XTP-5,经初步鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。对该菌株产酶培养基优化实验结果表明:最佳培养基配方:麦糟粉20g/L、酵母粉4/L、K2HPO41.0g/L、NaCl0.5g/L、FeSO·47H2O0.01g/L、MgSO·47H2O0.5g/L、(NH4)2SO42.0g/L、Tween-800.06%。接种上述液体培养基(pH7.0)中,于37℃、180r/min摇瓶培养60h达到产酶高峰,酶活力可达9.52U/mL。