化脓隐秘杆菌对奶牛脾脏组织细胞凋亡的影响

目的观察化脓隐秘杆菌自然感染奶牛脾脏组织的病理学变化,并检测组织细胞中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax和Bcl-2的表达,以确定化脓隐秘杆菌感染对奶牛脾脏组织细胞凋亡的影响。方法筛检2头化脓隐秘杆菌阴性健康奶牛(对照)和5头自然感染化脓隐秘杆菌的奶牛,收集脾脏组织样本,采用本课题组国家发明专利方法,进行石蜡制片和HE染色,观察脾脏组织病理学变化;采用免疫组织化学方法与本课题组国家发明专利方法相结合,检测奶牛脾脏组织中与细胞正负凋亡相关的调节基因Bax和Bcl-2及凋亡通路蛋白Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表达情况。结果肉眼观察可见化脓隐秘杆菌自然感染奶牛脾脏肿大、柔软,有出血;病理组织学观察可见脾脏组织出血,水肿,淋巴细胞数量减少,有坏死;脾脏淋巴细胞Caspase-3、Caspase-9和Bax表达阳性,与对照组相比,差异有统计学意义(P <0.05),少量淋巴细胞Caspase-8和Bcl-2表达阳性,与对照组相比,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论化脓隐秘杆菌能够引起奶牛脾脏淋巴细胞发生坏死和凋亡;可通过调节脾脏中淋巴细胞Bcl-2家族的活性,引起其Bax和Bcl-2比率改变,增加淋巴细胞线粒体内外膜通透性,导致与凋亡相关因子的释放,激活Caspase-9,进一步激活Caspase-3,从而引起脾脏中淋巴细胞发生凋亡。     

萝卜硫素介导Akt/p70S6K信号传导诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡

目的:研究萝卜硫素对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡的影响及其对Akt/p70S6K信号传导的作用。方法:采用CCK-8实验分析萝卜硫素对CNE-2细胞生长增殖的影响，流式细胞仪检测萝卜硫素对CNE-2细胞凋亡率及细胞周期分布的影响，Western blot技术检测CNE-2细胞中调控细胞周期的相关蛋白及Akt/p70S6K信号通路关键蛋白的表达水平。结果:采用萝卜硫素干预CNE-2细胞后，细胞增殖抑制率及凋亡率相对于对照组呈浓度依赖的方式显著增高，差异有统计学意义（P<0.05）；流式细胞仪分析提示，萝卜硫素干预能够将细胞停留在S期及G2/M期，并且萝卜硫素还能抑制细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E以及CDK/p34的表达水平，与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）；此外，萝卜硫素还能抑制Akt/p70S6K信号通路关键蛋白p-Akt及p70S6K蛋白表达水平（P<0.05），但萝卜硫素与Akt激动剂IGF-I共同处理细胞后，上述蛋白表达量与对照组相比没有统计学差异（P>0.05）。结论:萝卜硫素可能通过干扰CNE-2细胞中Akt/p70S6K信号传导而发挥有效的抗增殖及促凋亡的作用。     

PI3K/AKT/GSK3β信号通路参与腺苷A1R介导异丙酚对缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用

目的：探讨PI3K/AKT/GSK-3β信号通路参与异丙酚对缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及机制。方法：健康雄性SD大鼠72只，所有大鼠参照Zea Longa法建立局灶性脑缺血再灌注损伤的模型。随机分成6组（n=12），A-假手术组，B-模型组（MCAO），C-异丙酚组，D-异丙酚+腺苷A1R拮抗剂组（DPCPX），E-异丙酚组+PI3K特异性抑制剂（LY294002），F-异丙酚+GSK-3β抑制剂组（SB216763），观察大鼠术后24 h神经功能评分情况；LDF监测插栓前后脑血流变化；采用TTC染色法检测各组大鼠的脑梗死体积；用HE染色方法观察大鼠脑组织形态学改变；免疫组织化学法检测Bcl-2阳性细胞表达；采用TUNEL检测各组大脑脑皮质缺血周围神经元凋亡细胞的百分率。结果：与A组比较，B、C、D、E及F组大鼠行为学、脑梗死体积、细胞凋亡率、Bcl-2蛋白表达量均增加（P<0.05）；与C组比较，B、D、E组大鼠行为学评分，脑梗死体积及细胞凋亡率均明显增加，Bcl-2蛋白表达量均明显减少（P<0.01），F组Bcl-2蛋白表达量却增加，细胞凋亡率降低（P<0.05），行为学评分减少、梗死体积减少（P<0.05）。 结论：腺苷A1R介导的异丙酚对缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用可能与PI3K/AKT/GSK-3β信号转导通路有关。     

基于秀丽隐杆线虫的真菌毒素毒性评价研究进展

由于作用范围广、毒性大和时间长等特征,食品中真菌毒素研究受到广泛关注。应用秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)进行毒理学评价具有成本低、易观察、周期短、信号转导途径高度保守等优点而广泛应用到毒理学研究领域,在真菌毒素的毒性评价方面也得到快速发展。该文介绍秀丽隐杆线虫评价真菌毒素的指标及其研究进展,重点关注秀丽隐杆线虫评价真菌毒素毒性的致死率、个体发育与运动行为和生殖能力与寿命等指标。真菌毒素对于胰岛素/类胰岛素生长因子-1(insulin/insulin-like growth factory-1,IIS)、细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)、转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)、丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)4种先天免疫信号通路的影响的研究进展,为进一步基于秀丽隐杆线虫真菌毒素的研究提供理论依据。     

Hedgehog信号通路分子在食道鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨Hedgehog信号通路分子Gli1、Hip、PDGFRα、Smo和Su(Fu)基因在食道鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法:应用原位杂交方法检测内蒙古医科大学附属医院胸外科2013年3月-2014年5月经手术切除、病理科确诊的12例食道鳞状细胞癌组织及距肿瘤边缘2 cm处经病理证实为正常组织的12例食管黏膜(阳性对照)中Hedgehog信号通路分子Gli1、Hip、PDGFRα、Smo和Su(Fu)基因的表达。结果:12例癌组织中,10例癌组织中均检测到Hedgehog信号通路分子Gli1、Hip、PDGFRα、Smo基因的表达,8例癌组织中检测到Hedgehog信号通路分子Su(Fu)基因的表达,而其在对照组中均未表达,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Gli1、Hip、PDGFRα、Smo及Su(Fu)基因的表达与患者的年龄、性别、组织学分级、临床分期无关,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Hedgehog信号通路在食道鳞状细胞癌组织中存在高表达,其可能作为肿瘤治疗的新靶点。     

网络药理学筛选天麻素防治糖尿病的分子机制

目的:基于网络药理明确天麻素发挥药理作用的分子机制。方法:天麻素化学结构基于中药系统药理学数据库和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology,TCMSP)下载,靶标蛋白筛选基于SwissTargetPrediction(http://www.swisstargetprediction.ch/)数据库,基于DAVID数据库对靶点进行生物过程(biological process,BP)、细胞成分(cellular component,CC)以及分子功能(molecular function,MF)进行分析,100个靶标通过STRING进行相互作用分析,基于Cytoscape 3.5.1中的Cytohubba模块筛选出关键基因。结果:天麻素筛选出100个靶点,共参与102条通路(P<0.05);主要参与one-carbon metabolic process(碳代谢过程)、response to drug(药物反应)、proteolysis(蛋白水解)等生物过程;主要存在plasma membrane(质膜)、melanosome(黑素体)、dendrite cytoplasm(树突细胞质)等细胞成分;分子功能上,100个靶点主要有insulin receptor substrate binding(胰岛素受体底物结合)、phosphatidylinositol 3-kinase binding(磷脂酰肌醇3-激酶结合)等,甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)为关键靶点。通过分子对接明确天麻素与GAPDH有较强的结合活性(Total-Score=7.5)。结论:初步明确天麻素调节的靶点,为动物、细胞实验提供理论依据。     

LPS诱导小鼠骨质疏松症模型及其细胞分子机制研究进展

炎症介导的免疫系统功能失常在原发性骨质疏松症的发生过程中具有重要作用。从构建方法、细胞机制、分子机制等三方面对近年来国内外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠骨质疏松症模型的研究进展进行了综述。LPS不仅对破骨细胞增殖分化具有明显的促进作用,还会对成骨细胞骨架蛋白F-actin造成损伤;LPS通过激活RANKL/RANK/OPG信号通路、TLR4/NF-κB信号通路、Connexin43蛋白和TNF-α因子来诱导破骨细胞增殖分化,从而促进骨吸收;研究LPS诱导的炎症性骨质疏松症的发病机制对发掘骨质疏松症抗炎药物具有重要作用。     

借力垂直电商,推动产业整合

<正>工业革命之后,纵观全球经济发展,商品流通模式经历了从分销模式到连锁模式的演变过程。目前全球新兴市场国家还主要以分销模式为主导,而欧美等成熟市场国家,在经历了30~50年的行业整合之后,流通领域已经转变为连锁模式。一、从分销经济走向连锁经济在分销经济中,每个行业有成百上千条产品销售通路,而演变为连锁经济后,每个行业的竞争结果只剩下3~5家连锁     

苦参碱对结肠癌SW480细胞凋亡的影响

目的:观察苦参碱对结肠癌SW480细胞凋亡的影响,并分析其作用机制。方法:使用苦参碱对结肠癌SW480细胞进行处理,作为实验组;同时选择空白组作为对照组。采用噻唑蓝比色法检测苦参碱对细胞增殖的作用,Hoechst检测对细胞凋亡的作用,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测苦参碱对蛋白表达的影响。结果:培养24 h、48 h、72h后,实验组SW480细胞均出现明显的生长抑制,并随着药物质量浓度的提高和时间的延长而增强。对照组SW480细胞凋亡率为(4.26±0.25)%,明显低于实验组的(9.85±1.03)%、(15.62±1.98)%、(19.69±2.86)%、(26.58±3.58)%、(33.95±5.26)%;SW480细胞经过不同质量浓度的苦参碱作用48 h后出现了明显的细胞凋亡,并且随着质量浓度的提高,细胞凋亡率增加(P<0.05)。与对照组比较,实验组Bcl-2含量降低,Bax含量升高(P<0.05);实验组各组中p-Akt含量均明显降低(P<0.05),总Akt含量无明显变化(P>0.05)。结论:苦参碱能够通过抑制Akt信号通路,抑制SW480细胞生长,并且能够诱导细胞发生凋亡。     

单宁的抗氧化调控机制及其在肉品中的应用

肉品的过度氧化严重影响产品质量，给肉品企业造成巨大的经济损失。单宁作为天然抗氧化剂具有资源丰富、可再生、价格低廉、食用安全等优势，且抗氧化效果与合成抗氧化剂相当。单宁在生物体内对机体具有抗氧化作用，其调控机制是一个多途径、多靶点的复杂过程。在肉品加工贮藏过程中，单宁也可通过清除自由基、螯合金属离子等机制发挥抗氧化作用。因此单宁不仅可添加到动物日粮中减缓屠宰后肉的氧化，而且可通过直接添加到肉或肉品包装材料中等方式发挥作用。本文综述单宁在动物体内及肉品加工贮藏过程中的抗氧化调控机制和氧化评价方法，并分析单宁的抗氧化作用在肉品中的应用现状，以期为单宁作为抗氧化剂的广泛应用提供理论参考。