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电泳制备家蝇幼虫抗菌肽及其性质 总被引:10,自引:0,他引:10
通过体壁损伤法诱导家蝇幼虫产生免疫血淋巴,经沸水浴热变性,透析浓缩处理,后经Tricine—SDS—PAGE得到诱导前后家蝇幼虫血淋巴中蛋白差异表达带,将该条带电泳回收,复性,抗菌活性检测等步骤,分离纯化得到3种抗菌肽:MDL—1、MDL—2、MDL—3,研究结果表明:MDL—1分子中富含Gly,相对分子质量为6200,对革兰氏阴性菌E.coli有较强抗性;MDL—2分子中富含Pro,相对分子质量为11000,对革兰氏阴性菌E.coli和革兰氏阳性菌S.aureus均有抗性;MDL—3分子中富含Gly,相对分子质量为14000,对革兰氏阳性菌S.aureus有较强抗性;3种抗菌肽具有很强的温度耐受性,均没有凝血活性和溶血活性,同时电泳制备抗菌肽的实验方法为此类微量生物活性物质的分离纯化提供了有效的途径。 相似文献
2.
乳酸杆菌肽聚糖的分离鉴定及其免疫活性 总被引:10,自引:0,他引:10
研究了乳酸杆菌细胞壁肽聚糖的分离、鉴定及其对肽聚糖生物活性的影响,实验获得了SDS处理粗细胞壁的适宜条件为SDS质量浓度8g/dL,处理时间为沸水浴10min,SDS结合胰蛋白酶和TCA处理,可有效去除乳酸杆菌中的非共价结合蛋白质及共价结合蛋白质,经化学分析鉴定,所提取的乳酸杆菌成分为肽聚糖,肽聚糖中丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸和赖氨酸浓度分别为1.181,0.943,0.770和0.456mmol/g,是肽聚糖中的组分氨基酸,SDS结合TCA处理,方能较有效地去除DNA,TCA处理是去除细胞壁磷壁酸、脂磷壁酸的有效方法。此外,小白鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验、C3b受体实验以及血清溶菌酶活力实验证实,所分离纯化肽聚糖的免疫学活性未受影响。 相似文献
3.
营养基因组学研究与应用 总被引:5,自引:0,他引:5
营养基因组学是高通量基因组技术在日粮营养素与基因组互作及其与健康关系研究中的应用.随着人类和模式动物基因组的阐明以及近年有关技术的进展,同时进行生物样品中DNA,mRNA和表达的蛋白质分析,确定基因的多样性已成为可能.它将加速认识营养如何影响代谢途径和机体稳态控制,发现与营养有关疾病早期调节失控与基因型的关系.应用营养基因组学建立评价营养素利用效率的标识和方法,可为公众健康提供有效的科学依据.利用营养基因组学技术能够提高产品质量与生产效率,促进食品工业发展和开拓新的市场. 相似文献
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目的:研究GOS(低聚半乳糖)和xos(低聚木糖)对乳酸菌(L.bulgaricus Fn009)耐H202胁迫能力的影响.方法:利用H2O2建立氧化应激模型,以MTT法(四甲基偶氮唑盐比色法)检测GOS和XOS对乳酸菌存活率影响,以流式细胞技术检测GOS和XOS对乳菌细胞膜完整性的影响,并测定GOS和XOS对乳酸菌抗氧化酶活力和应激蛋白基因表达水平的影响.结果:H202胁迫条件下,GOS和XOS干预组乳酸菌存活率提高了1.83~1.96倍,细胞膜完整率分别提高了17%和13%,T-SOD和GSH-Px酶活力均显著上升(p<0.05),Dnak、GroEL和Gsp65应激蛋白基因的表达水平显著下调(p<0.05).结论:GOS和XOS能够提高乳酸菌自身的抗氧化活力,降低H2O2胁迫对菌体细胞膜的损伤程度,增强乳酸菌对氧化胁迫的抗性. 相似文献
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6.
通过SDS PAGE凝胶电泳确定了目的重组阿片肽存在于包涵体中,系统研究了影响大肠杆菌表达的重组阿片肽包涵体溶解的因素,确定了重组阿片肽包涵体制备溶解的最佳工艺条件,即菌体超声破碎5min,间隔时间6s,破碎效果最好;包涵体洗涤温度为4℃,尿素洗涤液的浓度为2mol/L,洗涤时间7~8h,8mol/L的尿素溶液对包涵体进行溶解,蛋白质质量浓度约为600μg/mL,其效果最佳. 相似文献
7.
营养基因组学是高通量基因组技术在日粮营养素与基因组互作及其与健康关系研究中的应用.随着人类和模式动物基因组的阐明以及近年有关技术的进展,同时进行生物样品中DNA,mRNA和表达的蛋白质分析,确定基因的多样性已成为可能.它将加速认识营养如何影响代谢途径和机体稳态控制,发现与营养有关疾病早期调节失控与基因型的关系.应用营养基因组学建立评价营养素利用效率的标识和方法,可为公众健康提供有效的科学依据.利用营养基因组学技术能够提高产品质量与生产效率,促进食品工业发展和开拓新的市场. 相似文献
8.
猪用生长激素脂质体的化学稳定性 总被引:1,自引:0,他引:1
通过逆相蒸发法制备猪用生长激素脂质体,重点探讨外界环境和主要原料对猪用生长激素脂质体化学稳定性的影响。经过实验研究发现,猪用生长激素脂质体在环境液pH为7左右和冷藏状态下较稳定,包封率达到89%左右。 相似文献
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在阿片类生物活性短肽的结构和生理特点基础之上,通过重复叠加的方法设计了此类生物活性肽基因.借助Primer软件,设计了3条引物;并通过引物延伸和PCR等步骤,实现了基因的人工合成并克隆至表达载体pPIC9K.PCR及酶切鉴定后测序,表明所合成基因已成功克隆. 相似文献
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