抗玉米赤霉烯酮单克隆杂交瘤细胞系的建立及单抗生产

为快速检测食品中的玉米赤霉烯酮 (Zearalenone以下简称ZEN) ,建立了抗ZEN的单克隆杂交瘤细胞株。用ZEN BSA偶联物免疫 8～ 10周龄雌性BalB c小鼠后 ,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2 0融合 ,经过 4～ 5次亚克隆建立了稳定分泌抗ZEN抗体的杂交瘤细胞株 ,分别命名为Z2A4、Z8D6。将上述 2种杂交瘤细胞分别注入BalB c小鼠腹腔 ,获得含抗ZEN单克隆抗体的腹水。将腹水用饱和硫酸铵盐析法纯化 ,得到Z2A4、Z8D6单克隆抗体。经鉴定 ,其亚类为IgG1,抗体腹水效价Z2A4和Z8D6分别为 1∶1 6× 10 6和 1∶3 2× 10 6;分子量均为 15 0 0 4 0 (15 0kD) ;参考工作浓度分别为1∶4 0 0 0 0和 1∶10 0 0 0 0 ;纯化后抗体IgG含量分别为 34和 39mg ml ;抗体与其它霉菌毒素无交叉反应(交叉反应率 <1% ) ,具有较高特异性 ;抗体亲和力常数Z2A4和Z8D6分别为 5 5 2× 10 8和 4 6 8×10 9mol L。     

抗赭曲霉素A单克隆杂交瘤细胞系的建立及特性

为快速检测食物中的赭曲霉素A ,建立了抗OchratoxinA的单克隆杂交瘤细胞株。用OA -匙孔嘁血蓝素 (OA KLH)偶联物免疫 8～ 10周龄雌性Balb c小鼠后 ,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2 0融合 ,经过 3～ 4次亚克隆建立了 3个稳定分泌抗赭曲霉素A抗体的杂交瘤细胞株 ,分别命名为 10G7、10G10和 5G11。将上述 3株杂交瘤细胞分别注入Balb c小鼠腹腔 ,获得含抗赭曲霉素A单克隆抗体的腹水。将腹水用饱和硫酸铵法纯化 ,得到 10G7、10G10和 5G11单克隆抗体。其中10G10、5G11单克隆抗体的Ig亚类为IgG1,10G7单克隆抗体的Ig亚类为IgG2a。抗体腹水的稀释度为 1∶6 4× 10 6～ 1∶1 3× 10 8,参考工作浓度为 1∶1 0× 10 6～ 1∶3 2× 10 7。纯化后 10G7抗体的IgG含量为 16 4g L ,亲和常数为 9× 10 -8mol L。 10G7抗体与其它结构类似物无交叉反应 ,具有较高的特异性。