温莪术不同溶剂提取物体外抗氧化活性评价

目的:探讨温莪术不同溶剂提取物体外的抗氧化活性。方法:分别用蒸馏水、95%乙醇、乙酸乙酯等不同极性溶剂提取温莪术中活性物质,采用清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、羟自由基(.OH)、亚铁离子螯合和还原能力等方法考察温莪术不同提取物的抗氧化活性。同时用Folin-Cioeaile法测定不同提取物中的总酚含量,考察总酚含量与抗氧化清除率的关系。结果:DPPH自由基、.OH清除能力及还原能力结果表明95%乙醇及乙酸乙酯提取物在较低的质量浓度显示了较高的清除率;同时总酚含量测定结果显示95%乙醇和乙酸乙酯提取物所含总酚含量较高,这表明这两种溶剂提取物的抗氧化性与其提取物含有较高的酚类密切相关;亚铁离子螯合实验结果显示水提物的螯合效果优于其他溶剂提取物。结论:不同溶剂提取物抗氧化能力差别较大,总酚含量与抗氧化清除率具有相关性。     

核苷酸在营养免疫中的作用

<正>瞟呤核苷酸和嘧啶核苷酸是组成细胞的主要成分，是DNA和RNA的基本组成单位，在细胞结构。代谢、能量和功能调节等方面起重要作用。核苷酸是核酸在体内的代谢产物，其中部分核苷酸又可进一步水解为核苷。核苷酸及其水解产物均可被肠粘膜吸收肠粘膜细胞可将核苷酸运输到其他细胞。     

没食子酸甲酯类似物的设计、合成及体外抗炎活性研究

过度炎症反应严重危害人类身体健康,目前的抗炎药物大多存在多种副作用,寻找新的抗炎药物是治疗炎症反应的一种有效途径。本文以没食子酸甲酯为先导化合物,合成了一系列没食子酸甲酯结构类似物,所有化合物均经过核磁共振氢谱、碳谱和质谱和分析进行结构确认,并初步进行了体外抑制脂多糖(LPS)诱导的炎症因子释放的抗炎活性测试。     

生物制药专业实践教学创新模式的探索

实践创新能力的培养是生物制药专业培养目标的重要内容。温州医科大学药学院全方位探索本专业实践教学新模式,提出了"三个三"的生物制药专业实践教学改革新理念:三种结合,三项改革,三个阶段。期望本校所尝试的实践教学创新模式的探索,能为提高我国生物制药专业学生的实践能力提供新的思路和启示。     

低剂量电离辐射对糖尿病小鼠血清中炎症因子表达的影响

目的探讨低剂量电离辐射(LDR)对链尿佐菌素(STZ)诱导的Ⅰ型糖尿病(DM)小鼠血清中炎症因子表达的影响。方法取健康C57BL/6J小鼠,经腹腔注射STZ复制小鼠糖尿病模型,并设空白对照组。将糖尿病模型小鼠分为DM和DM/LDR组,空白对照组分为LDR组及对照组。DM/LDR组和LDR组给予25mGyLDR,隔日照射1次,共照射4周;DM组和对照组不经LDR照射。分别于照射后2、4、8、12及16周,采用ELISA法检测小鼠血清中不同炎症因子的表达水平。结果LDR照射前,4组小鼠血清中ICAM-1和IL-18的表达水平较为接近,而糖尿病小鼠血清中TNFα和MCP-1的表达水平显著高于非糖尿病小鼠;给予LDR照射后,在不同时间点DM/LDR组小鼠血清中IL-18、MCP-1及TNFα的表达水平与DM组相比,均显著降低,LDR组小鼠血清中IL-18、MCP-1及TNFα的表达水平较对照组明显增加。ICAM-1表达的变化与其他因子不同,LDR照射4周时,糖尿病小鼠显著高于非糖尿病小鼠,但在任何时间点,DM/LDR与DM组、LDR与对照组之间差异均无统计学意义。结论在糖尿病状态下,LDR能有效降低血清中IL-18、TNFα和MCP-1的表达水平,缓解糖尿病肾脏中的炎症反应强度;但在正常机体中表现为提高免疫力,促进免疫相关因子的释放。表明LDR针对机体所处的不同状态发挥着不同的生物调节功能。     

枣脯生产过程中最佳硫用量和最佳熏制时间的探讨

采用枣脯生产企业通用的加工方法,对影响硫残留量的 硫用量和熏制时间两个因素进行探讨,通过实验确定了 最佳硫用量和最佳熏制时间。最终的结论是:硫用量比熏 制时间对硫残留量影响显著,500g干枣最佳硫使用量 1.2g,最佳熏制时间12h。     

bFGF生物蛋白海绵体外生物学活性检测方法的建立及其稳定性评价

目的:建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)生物蛋白海绵体外生物学活性测定方法,观察bFGF生物蛋白海绵常温放置的稳定性.方法:bFGF生物蛋白海绵供试品融于稀释液中,离心后获得浸提液,以bFGF标准品为对照,与NIH3T3细胞共培养,MTT法检测bFGF生物蛋白海绵浸提液对NIH3T3细胞的促增值作用,用bFGF标准品计算bFGF生物蛋白海绵的相对百分效价,对该方法进行验证;以常温储存2、3和4年的bFGF生物蛋白海绵为供试品,以低温储存30 d的bFGF生物蛋白海绵为标准对照,以不含bFGF生物蛋白海绵和bFGF的培养液为空白对照,测定各组生物学活性效价,比较不同储存时间bFGF生物蛋白海绵的体外生物学活性效价的稳定性.结果:bFGF生物蛋白海绵供试品浸提液随浓度增加其吸光度(A值)增高,即NIH3T3细胞增殖作用增加,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01),与bFGF标准品比较差异无统计学意义(P>0.05);bFGF标准品和bFGF生物蛋白海绵在该方法中均存在量效关系,且符合四参数方程式:y=(A-D)∕[1+(X/C)B]+D;常温条件下储存2、3和4年生物蛋白海绵体与低温储存30 d比较,其生物学活性效价(U·mL-1)下降率分别为0.5%、0.6%和0.8%,均低于15%的国家标准.结论:bFGF生物蛋白海绵在体外能够促进NIH3T3细胞增殖,具有良好生物学活性;应用NIH3T3细胞检测bFGF生物蛋白海绵体外生物学活性可作为常规检测方法;bFGF生物蛋白海绵常温储存2～4年稳定性良好.     

吸血蝙蝠纤溶酶原激活剂α2的原核表达及抗体制备

利用人工合成的吸血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂α2(DSPAα2)基因,研究了其在细菌中的表达及表达产物的纯化和抗体制备.首先人工合成DSPAα2基因,并构建原核表达载体转化大肠杆菌.经IPTG诱导后,DSPAα2在细菌中得到了高效表达.SDS-PAGE结果显示,以包涵体的形式存在的DSPAα2重组蛋白占到细菌总蛋白的32%.包涵体裂解后经亲合层析柱纯化,100mL菌液中能得到2.2mg纯的重组蛋白.用纯化的DSPAα2分别免疫大鼠和小鼠,经ELISA检测,获得了效价达到1∶12800以上的高质量的抗血清.Western blot结果显示抗体能与DSPAα2特异性地结合.     

构建人Cu,Zn-SOD毕赤酵母转化子及其高表达研究

设计人Cu,Zn-SOD酵母偏爱密码子并化学合成,与pPIC9K连接,构建酵母偏爱密码子的人Cu,Zn-SOD基因真核表达载体,通过电转化和持续加压筛选毕赤酵母GS115高拷贝转化子,获得的重组高表达酵母菌株建立主种子批。经Southern blot鉴定,基因拷贝数提高2～8倍,活性检测显示提高2～4倍。重组菌的目的基因拷贝数与表达产物呈正相关;表达产物为二聚体,其分子质量为40kD左右,低糖基化,均为分泌表达。Western blot法分析,对Cu,Zn-SOD抗体具有特异性反应。转化子在培养16h后进入对数生长期,24h后进入生长稳定期;转化子培养20h左右进行诱导表达最为合适。高拷贝的3株重组菌经50次传代后插入的目的基因保持稳定;Cu,Zn-SOD转化子用正交试验筛选摇瓶的诱导表达条件,经诱导表达,Cu,Zn-SOD表达上清最高活性大于600U/mL。确立最适摇瓶培养条件为pH6.0、30℃、体积分数1.5%甲醇诱导72h测得上清的目的蛋白表达最好,表明构建了高表达菌株。     

油料种子在脂解途径中相关信号分子的研究进展

本文介绍了油体脂解途径中相关信号分子的研究进展。通过对信号分子进行荧光探针标记,利用荧光显微镜技术和共聚焦显微镜成像分析可以准确、迅速地对相关信号分子的定位和表达进行跟踪研究,从而揭示油体的生物学发生和分解机制。