一种改良的大肠杆菌质粒平板转化方法

改良了大肠杆菌质粒平板转化法,在储存液中添加PEG(聚乙二醇)、MgSO4和甘油,在-30℃保存受体大肠杆菌细胞,然后将保存菌与分子量大小不同的质粒DNA混匀,直接在Ca2+离子选择平板上进行转化和筛选。改良的平板转化法对大分子量DNA的转化无论在转化效率还是转化保持能力上都大大优于传统CaCl2转化法。     

PCR-核酸薄膜层析法检测创伤弧菌

采用自行建立和优化的PCR-核酸薄膜层析检测体系,对创伤弧菌(Vibriovulnificus)进行检测。采用创伤弧菌的vvhA基因为目的片段设计特异性引物,建成可快速检测创伤弧菌的PCR-核酸薄膜层析检测法,并进行了特异性和灵敏度试验。结果表明,所建立起的检测法灵敏度为3.6×102 cfu·mL-1,比PCR-琼脂糖凝胶电泳检测方法高一个数量级。创伤弧菌的PCR-核酸薄膜层析检测方法具有较高灵敏度和良好特异性,操作简单,检测速度快,同时又保护了操作人员的身体健康,具有广阔的推广前景。     

小型精酿啤酒企业如何建立品评制度

本文通过对精酿啤酒的特点分析,从成立品评小组、确定品评项目、制定相应约束制度、品评工作如何实施等方面介绍了小型精酿啤酒企业如何建立行之有效的品评制度。     

胡萝卜高效再生和遗传转化体系的建立

对培养基中的激素组成和添加物种类进行了研究,建立了胡萝卜下胚轴外植体的高效再生系统,为生产植物可食性疫苗提供了良好的再生和转化技术平台。首先在较高生长素(2,4D)浓度下诱导胡萝卜(黑田五寸)愈伤组织,然后降低生长素浓度诱导胚状体,添加质量分数0.2%的酵母提取物,可使胚状体的诱导率达78.27%。沿此再生途径用农杆菌侵染法进行转化,预培养96h,共培养黑暗72h,卡那霉素20mg·L-1筛选20d,然后在卡那霉素75mg·L-1的条件下筛选到了抗性植株。抗性植株经PCR检测,80%的抗性植株都检测到报告基因nptII片段。     

木聚糖酶产生菌的分离筛选及酶学性质

利用透明圈法从云南腾冲温泉出水口土样中粗筛出12株木聚糖酶产生菌,其中Xylan-12菌活力较高,对其进行了16S rDNA部分序列测定,经BLAST同源性分析确定其为Bacillus flavothermus。对Xylan-12产生的木聚糖酶进行了酶学性质的初步研究,结果表明,该酶的最适pH为6,最适温度为65℃。     

利用SMART RACE克隆STGA3 cDNA的5''''末端

阐述了SMART RACE的原理，克隆了草莓贝壳杉烯氧化酶基因（STGA3）5’端未知序列。所得到的STGA3 cDNA的5’末端共有1474bp，其中非编码区共34bp，编码区1440bp，编码氨基酸480个，此序列在NCBI的注册号为：AY462247。它与已克隆到的同源基因拟南芥GA3和南瓜CYPT 01A1之间的同源性分别为56．9％和59．2%。     

利用SMART RACE克隆STGA3 cDNA的5′末端

阐述了SMART RACE的原理,克隆了草莓贝壳杉烯氧化酶基因(STGA3)5′端未知序列。所得到的STGA3 cDNA的5′末端共有1 474 bp,其中非编码区共34 bp,编码区1 440 bp,编码氨基酸480个,此序列在NCBI的注册号为:AY462247。它与已克隆到的同源基因拟南芥GA3和南瓜CYPT01A1之间的同源性分别为56.9%和59.2%。     

一种适合富含多糖、多酚植物的RNA提取方法

研究了一种适合富含多糖、多酚植物的RNA提取方法。采用CTAB(十六烷基溴化三甲胺)裂解植物材料,与细胞中的核酸形成核酸-CTAB复合体,然后用氯仿-异戊醇去除细胞裂解液中的蛋白,最后采用LiCl选择性沉淀其中的RNA。此方法适用于多种植物组织包括根、茎、叶、花、果实等的总RNA提取,所提RNA适合进行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)。     

金黄色葡萄球菌噬菌体的分离纯化

分离纯化了抑制金黄色葡萄球菌的噬菌体,并对其进行效价测定。将宿主菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)培养制成悬液后与污水样品37℃共培养16 h,共培养物离心、过滤除菌后得到该菌的噬菌体原液。噬菌体原液采用双层平板进行3次纯化,得到直径相同的噬菌斑。纯化后金黄色葡萄球菌噬菌体的效价是8.1×108pfu。     

微生物方法选择性生产生物燃料的研究进展

目前,工程荫已经广泛应用于食品、药品及酒精燃料等产品的生产中。尽管如此,工程菌发酵技术的潜力仍然没有充分发掘。交通运输业对于耐用燃料的需求日益增强,迫切地需要开发生物燃料的生产技术。为此,科研人员经过几十年的努力,建起了微生物生理学和途径控制学数据库,使得微生物工程成为生物燃料生产的一项理想技术。虽然目前乙醇在生物燃料市场上占有统治地位,但是它在某些物理性质上存在缺陷,并不足一种理想的燃料。回顾了微生物工程的研究进展,综述了一些新型生物燃料的微生物工程生产。