含功效成分电子烟对动物模型止咳平喘作用研究

为考察电子烟作为功效成分递送器具的效果,选取L-薄荷醇、L-茶氨酸、丁香酚、木香烃内酯、西贝碱、菖蒲酮、7,4'-二羟基黄酮7种功效化合物和1种臭灵丹提取物,通过氨水引咳小鼠咳嗽模型和卵清蛋白(OVA)引喘大鼠哮喘模型,评价上述物质在电子烟中止咳平喘疗效.结果 显示:1)止咳效果方面.上述8种物质均减少了咳嗽模型小鼠的咳嗽次数,同时不同程度延长了咳嗽模型小鼠咳嗽潜伏期;2)平喘效果方面.上述8种物质对哮喘模型大鼠肺功能各指标均有改善,其中L-薄荷醇对呼气时间(简称"Te")、50％的呼气流速(简称"EF50％")有明显改善;L-茶氨酸对Te、最大呼气流速(简称"PEF")和EF50％有明显改善;丁香酚对PEF、EF50％和呼气量(简称"EV'")有明显改善;木香烃内酯对PEF和EV有明显改善;西贝碱对Te、PEF有明显改善;菖蒲酮对Te、PEF有明显改善;7,4'-二羟基黄酮对PEF和EV有明显改善;臭灵丹提取物对PEF和EF50％有明显改善;3)Model组大鼠存在明显哮喘病理改变:肺基底膜增厚并发生玻璃样变,相比Model组,8组接受功效型电子烟烟雾暴露的哮喘模型大鼠支气管哮喘均有改善.以上说明,电子烟作为具有止咳平喘功效成分的递送器具效果明显,这为功效型电子烟的开发提供了参考.     

红河传统发酵豆豉中高纤溶活性菌株的分离筛选及其纤溶酶基因分析

运用脱脂乳固体培养基及纤维蛋白固体培养基的两步分离筛选法,从云南红河传统发酵豆豉中分离筛选具有高产豆豉纤溶酶活性的菌株,同时对它们的豆豉纤溶酶基因进行克隆分析,以期为新型功能性豆豉的研发提供备选菌株及理论依据。研究结果表明,两步分离筛选法能有效地从云南红河传统发酵豆豉中筛选到高产豆豉纤溶酶的菌株Bacillus subtilis LC-2-1,对该高产菌株的豆豉纤溶酶成熟肽基因分析及预测结果表明,菌株B subtilis LC-2-1确实能分泌一种由825个碱基编码275个氨基酸残基且分子量约为27.4kDa的豆豉纤溶酶,与纳豆激酶及其他豆豉纤溶酶相比差异显著,同源性仅为85.1%。同时其豆豉纤溶酶活性分析结果则表明,菌株B subtilis LC-2-1所产纤溶酶活性较高,可达79.84 U/mL。因此,本研究结果将为新型且具有溶血栓功能发酵豆豉的研发提供备选菌株及理论依据。     

利用高通量测序分析云南两个地区豆豉微生物群落的多样性

豆豉是一种具有独特风味的传统发酵食品。研究豆豉的微生物群落多样性,对于提高豆豉质量和食用安全性具有重要意义。本研究分别采取云南西双版纳州的景洪市和勐海县的两个豆豉样品,提取DNA,PCR扩增细菌16S r DNA和真菌ITS区域并进行焦磷酸测序,通过分析测序所得结果比较两个豆豉样品中的细菌和真菌群落多样性。结果表明:景洪样品的最优势细菌是Leuconostoc mesenteroides,其次是Leuconostoc fallax。勐海样品中丰度最高的细菌是Staphylococcus gallinarum,其次是Tetragenococcus halophilus。两个样品中都含有少数序列与能够产细菌素的Weissella confusa和Weissella cibaria具有较高相似性。两个样品的优势真菌都是耐盐的Candida etchellsii和Candida versatilis。总之,西双版纳的豆豉具有较高的微生物群落多样性,以嗜盐菌居多。     

不同植物乳杆菌发酵液抑菌活性及其主要有机酸组成比较

对分离自云南传统发酵食品的18 株植物乳杆菌代谢产物的主要有机酸成分及对病原菌抑菌活性进行分析。采用Spot-on-lawn及琼脂扩散法研究不同植物乳杆菌代谢产物抑菌活性;通过高效液相色谱法分析主要有机酸的种类和产量;选取其中3 株植物乳杆菌对其进行包括生长曲线、pH值、抑菌活性在内的动态监测。结果表明,抑菌活性取决于不同的植物乳杆菌菌株、病原菌及发酵碳源。当大肠杆菌O157:H7作为病原菌、葡萄糖作为碳源时,植物乳杆菌YmL-4-5具有最高的抑菌活性;当沙门氏菌ATCC 6538作为病原菌、果糖作为碳源时,植物乳杆菌S5抑菌作用最强。数据证明植物乳杆菌发酵液的抑菌活性受上清液低pH值的影响,且主要抑菌物质为有机酸。有机酸的主要成分是乳酸（930.9～3 008.7 μg/mL）,其次为苹果酸和乙酸。其中乳酸和乙酸的产量与其对大肠杆菌O157:H7的抑菌活性呈正相关（r分别为0.474、0.488,P＜0.05）。本研究为研发新的生物防腐剂提供了理论依据。     

具有高催化活性的P-TiO_2结构及制备条件的探究

通过简便的凝胶-溶胶法成功地将P5+引入TiO_2晶格内部,从而提高光催化活性。当P和Ti的摩尔比为1∶15时,P-TiO_2的光催化性能达到最佳,对亚甲基蓝的降解率达到73. 55%,与TiO_2相比降解率提高11. 83%。该工艺具有经济、环保、高效的优点,适用于处理水体和大气中有机污染物的处理,以及其他环保领域的应用。     

具有高效ACE抑制活性乳酸菌的筛选及其益生特性研究

本研究运用紫外分光光度法初筛,再以HPLC法进行复筛,从31株源自云南传统发酵食品的乳酸菌中筛选具有高效ACE抑制活性菌株,同时研究其益生特性及脱脂乳发酵过程中ACE抑制率的动态变化。综合各项研究结果,最终筛选出ACE抑制率较高、抑菌谱广、耐酸耐胆盐性强,且对抗生素敏感的Lactobacillus plantarum YM-4-3作为研究菌株。益生特性研究表明,该菌株对Escherichia coli O 157:H 7和Listeria monocytogenes的抑菌圈直径可分别达41.30 mm和42.00 mm,甚至在高胆盐(0.3%)及强酸(p H 2.5)处理后仍保持较高活菌数(大于105 cfu数量级)。脱脂乳发酵过程中ACE抑制活性的动态监测表明,37℃发酵48 h是Lb.plantarum YM-4-3菌株发酵产生ACE抑制肽的最适培养条件,该发酵条件下获得的发酵乳的ACE抑制率可高达81.23%,菌体生物量、游离氨基酸及多肽含量也均达到最大值。本研究成果将为新型具有高效ACE抑制活性发酵乳制品的研发提供理论依据及菌株保证。     

植物乳杆菌YM-2菌株胞外多糖生物合成工艺优化

对从云南传统发酵豆豉分离得到的植物乳杆菌YM-2(Lactobacillus plantarum YM-2)菌株胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)生物合成条件进行优化。首先对培养基成分中的碳源、氮源种类进行筛选;然后利用单因素试验分析碳源含量、氮源含量、培养时间以及培养温度对EPS产量的影响;最后采用Box-Behnken法进行四因素三水平响应面分析以确定其最优工艺条件。结果表明,植物乳杆菌YM-2菌株生物合成EPS最佳条件为碳源(葡萄糖)含量30 g/L、氮源(酵母粉)含量30 g/L、培养时间30.05 h、培养温度36.36℃,在此工艺条件下,植物乳杆菌YM-2 EPS产量为257.362 mg/L。     

植物乳杆菌素产生条件及分离方法的优化

目前植物乳杆菌常规发酵产生的植物乳杆菌素产量一般较低,优化植物乳杆菌素的产生条件和分离纯化方法是提高其产量的有效途径。本文以3株Lb.plantarum为实验材料,研究了发酵时间、温度、培养液初始pH值和培养基成分等因素对Plantaricin产量的影响。基于优化培养条件的研究结果,再探究五种不同Plantaricin的分离纯化方法,使两者达到最佳组合。研究发现:(1)发酵时间在28~35 h内,温度30~37℃,培养液初始pH在6.5~7.0,10 g/L葡萄糖和10 g/L蔗糖为碳源,10 g/L蛋白胨、5 g/L牛肉膏和5 g/L酵母粉为氮源,2 g/L磷酸氢二钾、0.2 g/L硫酸镁、0.05 g/L硫酸锰、2 g/L柠檬酸铵和5 g/L乙酸钠为无机盐,1 mL/L吐温-80为乳化剂,优化后Plantaricin产量较优化前提高了1.5倍以上;(2)最佳分离方法为超滤法。发酵液通过超滤法分离后,回收率达到了71%。本研究为获得尽量多的Plantaricin以及Plantaricin工业化开发利用提供理论基础和技术支撑。     

植物乳杆菌近亲种中叶酸生物合成途径的基因多态性分析

研究从传统发酵食品中分离植物乳杆菌并进行近亲种鉴定,通过直接测序法对8株植物乳杆菌近亲种的叶酸生物合成途径中5个关键基因fol B,fol E,fol K,fol P和fol Q进行扩增,并采用系统进化分析、核苷酸和氨基酸序列比对对基因多态性进行分析.结果发现,fol B,fol E和fol K基因具有较高的同源性,同时存在1处同义替换的SNP位点,fol P基因存在的14处SNP位点中,仅1处发生非同义替换,说明这些基因在氨基酸水平上相对保守.8株植物乳杆菌近亲种存在fol Q基因,但编码蛋白与Fol Q蛋白不具有同源性,故推测其拥有与Fol Q蛋白功能相似的生物酶,这些拟似酶有待进一步克隆鉴定与功能研究.本实验为植物乳杆菌近亲种中叶酸生物合成途径的分子调控机理提供前期基础.