重组大肠杆菌共表达D-海因酶和N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶

通过PCR分别扩增得到N-carbamoylase基因和上游带有RBS区的D-hydantoinase基因,并将其依次克隆入pBAD/His A质粒中,得到呈多顺反子结构的双酶表达质粒pBAD-CRH,转化E. coli Top10F￠得到重组菌TaraCRH. 实验证明,E. coli TaraCRH对外源蛋白的表达控制严紧,而加入阿拉伯糖诱导后可以成功表达两酶基因. 诱导条件优化结果表明,诱导温度采用29℃,培养基中阿拉伯糖浓度0.05 g/L可达到最高酶活. 进一步尝试采用玉米浆培养基代替LB培养基,在经过优化的玉米浆培养基中培养TaraCRH菌株,经阿拉伯糖诱导,海因酶和水解酶酶活分别达到3.52和4.21 U/mL.     

工业发酵液中谷氨酸结晶介稳区测定及其对生产的意义

本文测定了在三种体系内,即纯水、含1％NH_4离子浓度水溶液及实际工业发酵液体系中谷氨酸的溶解度和超溶解度曲线。将这些曲线用数学表达式拟合,便可计算出谷氨酸等电点结晶的介稳区宽度。实验结果表明,介稳区宽度在纯水、含1％NH_4离子浓度的水溶液和实际工业发酵液体系内相应逐渐变窄,即谷氨酸在这些体系中的溶解度逐渐变大。其拟合的饱和度和超饱和度曲线具有以下形式:C=ae~(bt)从介稳区宽度数学模型出发,提出了用计算机控制的连续等电结晶新工艺来提高谷氨酸收率的设想。     

PURIFICATION OF RECOMBINANT HUMAN INTERFERON-γ BY IMMUNOAFFINITY CHROMATOGRAPHY WITH MONOCLONAL ANTIBODY

E.coli cells expressing recombinant human interferon-γ was disrupted by sonication anddissolved in 7mol·L~(-1) guanidine hydrochloride.The extract obtained was then renaturated by 70 folddilution with PBS.HulFN γ was purified by affinity chromatography with monoclonal antibody fromthe renaturated crude feed solution.After washing the column with PBS,the adsorbed HulFN γ waseluted with PBS containing 0.5mol·L~(-1) NaCl.The column was regenerated with 2mol·L~(-1) GuHClfor reuse.After one step of affinity purification the purity of interferon-γ was over 95%.and thespecific activity of the HulFN-γ reached 1.2×10~7 IU·mg~(-1) protein.92.8% of recovery was obtainedin the elution step.Total recovery of HulFN γ activity in the affinity chromatography was 78%.     

亚砜萃取铑(Ⅲ)的动力学研究

本文以二庚基亚砜为萃取剂,研究了从盐酸介质中萃取铑(Ⅲ)的动力学,考察了水相氯离子浓度、氢离子浓度、有机相亚砜浓度以及温度等因素对萃取速度的影响。运用参数估值法、借助电子计算机计算了金属萃取一级正逆反应的表观速度常数,建立了该萃取过程速度的数学模型。根据动力学研究的结果,讨论了亚砜萃铑(Ⅲ)的机理。最后探讨了加速该取过程的可能性。     

多孔高硅氧玻璃对镤的吸附

报告了多孔高硅氧玻璃对镤的吸附性能的实验研究结果。用示踪量~(233)Pa考察了溶液组成对吸附的影响。测定了11°,25°和40℃下,8M HNO_3中~(231)Pa的吸附等温线。用静态和动态法测定了工艺条件下~(231)Pa在玻璃上的吸附容量。测定了辐射剂量达1×10~(11)拉德时玻璃性能的变化。