鼠妇粉酶解最佳用酶的初步筛选

用胰蛋白酶、胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶四种酶对鼠妇粉进行酶解并选出最佳用酶。利用四种酶分别酶解鼠妇粉,通过观察乳腺癌MCF-7细胞的抑制率以及蛋白质的水解度,作为实验评价指标,综合评价四种酶对于鼠妇粉的酶解效果,最终甄选出最佳酶解用酶。实验测得胃蛋白酶酶解液水解度为19.36%,胰凝乳蛋白酶酶解液水解度19.97%,胰蛋白酶酶解液水解度为34.70%,弹性蛋白酶水解度分别为34.90%。体外抗肿瘤试验表明,在浓度为0~2 mg·mL~(-1)范围内,胰蛋白酶酶解液对乳腺癌MCF-7细胞抑制效果最佳,胃蛋白酶酶解液抑制效果更低,未酶解的抑制率最低,几乎无效。当浓度低于0.7 mg·mL~(-1)时,弹性蛋白酶水解提取液抑制率高于胰凝乳蛋白酶水解提取液的抑制率,当浓度在0.7~2 mg·mL~(-1)时,两种酶的抑制作用恰好相反。鼠妇粉酶解工艺最佳用酶为胰蛋白酶,胃蛋白酶效果最差,弹性蛋白酶和胰凝乳蛋白酶效果介于二者之间。     

超声法提取虻虫水溶性蛋白质的工艺研究

研究中药虻虫中蛋白质的最佳超声提取工艺。以虻虫粉为原料,紫外可见分光光度法测定吸光度,以提取液中蛋白质含量为考察指标,通过正交试验法探究超声提取过程中提取时间、料液比、pH及温度对提取效果的影响,并优选蛋白超声提取工艺。提取时间、温度、pH均对中药虻虫蛋白的提取具有极显著的作用。虻虫蛋白的最佳超声提取工艺为料液比1:40(g:m L),提取时间60 min,pH=10,温度40℃,在此工艺下,虻虫水溶性蛋白提取含量为208.1 mg·g~(-1)。采用超声波法优选得到的提取工艺稳定可行,且虻虫中水溶性蛋白质含量高,为虻虫蛋白的药效学研究提供理论基础。