苯酚高效降解复合菌的构建及应用研究

苯酚是一种常见的高毒性、难降解有机污染物,微生物法降酚的研究已比较成熟.然而,单一菌株的环境抗逆性普遍较低,在酚类污染处理中的应用常受限,而通过复合微生物间的协同作用,可显著提高微生物对酚类物质的可利用性.从石化污水厂好氧活性污泥中,以苯酚为唯一碳源,通过梯度驯化分离出4株苯酚降解菌,经16S rDNA鉴定分别为不动杆菌F1(Acinetobacter sp.)、粪产碱杆菌F2(Alcaligenesfaecalis)、蜡样芽孢杆菌F6(Bacillus cereu)、食酸菌F30(Acidovorax sp.).对4株菌通过正交试验,得到高效降酚复合菌的配比为F1:F2:F6:F30=2:4:1:4,其降解苯酚最适宜条件为,温度25～35℃,pH 7～8,振荡速度125 r·min-1以上,在适宜条件下24 h内可完全降解初始质量浓度1200 mg·L-1以下的苯酚,并且可耐受初始质量浓度1800 mg·L-1以上的苯酚.以石化污水处理厂污水为基础,进行复合菌的应用实验,结果显示复合菌剂的加入不仅加强了系统降解挥发酚的能力,同时对其他降解指标也有一定的优势.     

响应面法优化纳豆激酶发酵培养基

纳豆激酶具有良好的溶解血栓的功效,由于纳豆激酶目前的发酵水平不高,限制了其应用。该研究以纳豆激酶活力为响应值,在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman 试验、最陡爬坡试验和响应面法对纳豆激酶培养基配方进行了优化。结果表明,通过Plackett-Burman试验筛选出豆粕粉、无水氯化钙、甘油为影响纳豆激酶活力的主要因素。最后运用响应面分析确定纳豆激酶最优发酵培养基为：甘油43 g/L、豆粕粉24 g/L、无水氯化钙0.14 g/L、七水硫酸镁0.80 g/L、十二水磷酸氢二钠3.00 g/L、无水磷酸二氢钾1.00 g/L、L-甲硫氨酸0.20 g/L,此条件下纳豆激酶活力最高为（4 281±103）FU/mL,是优化前的1.97倍。     

响应面法优化纳豆芽孢杆菌产纳豆激酶培养条件

采用单因素试验及响应面试验对纳豆芽孢杆菌（Bacillus natto）培养条件进行优化。在单因素试验的基础上,取影响纳豆激酶活力的5个重要条件因子（培养温度、培养时间、初始pH、接种量、菌龄）设计5因素3水平的响应面试验,建立以纳豆激酶活力为响应值的多元二次回归方程。结果表明,纳豆芽孢杆菌最佳培养条件为：培养温度34℃、培养基初始pH值为7.5、接种量3%、培养时间95 h、菌龄17.5 h。在此最佳条件下,纳豆激酶活力达到5 087 FU/mL,较优化前提高了18.83%。