猪流感复合多表位核酸疫苗的构建及其表达研究

目的构建猪流感病毒复合多表位核酸疫苗,并研究其表达产物的抗原性。方法以H3、H9亚型流感的HA抗原表位及流感病毒的其它主要抗原(NP、NA、M)表位基因为基础,再附以Kozak序列和适当的酶切位点,设计并合成一段长765bp的复合多表位基因(Epi),其中各表位基本独立,将其克隆入真核表达载体pIRES1neo,构建重组质粒pIRE-Epi。将多表位抗原基因Epi插入到融合表达基因H57中,构建重组质粒pIRE-H57-Epi。将构建的重组质粒在Hela细胞中表达,并用免疫荧光方法初步检测所表达蛋白的抗原性。结果所构建的融合表达载体pIRE-Epi和pIRE-H57-Epi,在Hela细胞中表达出流感病毒多表位抗原蛋白,并具有抗原性。结论已成功构建猪流感病毒多表位基因,有可能成为较理想的猪流感候选疫苗。     

自耦调压器铁芯的选择

介绍了通过公式计算选择铁芯的简便方法。     

泡蛋

泡蛋作法独特,每逢设家宴,我都要做一个又鼓又大的泡蛋请宾客品尝.菜一上桌,常会令人惊奇而又不知如何下箸.待我将泡蛋分开、露出馅心,只见色彩明丽,香味四     

利用语音的上升过零间隔的语音识别研究

本文对语音的上升过零间从发音机理及统计角度进行了分析，认为语音信号及其并分值信号的上升过零间隔较好地体现了不同语音之间的差异性，是一种进行语音识别的理想参数，并利用该参数建立模板，以非线性分块法进行时间对准，以相邻三帧最佳间匹配法进行模板匹配，用软件模拟了特定人，小词汇量，孤立词的语音识别，得到了较好的实验结果。     

多克隆抗体对猪繁殖与呼吸综合征的防治效果

目的观察猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)多克隆抗体用于防治PRRS的效果。方法用PRRSV灭活疫苗2次基础免疫,PRRSV(NVDC-JXA1株)强毒C05代加强免疫长白仔猪,制备PRRSV多克隆抗体。以不同剂量的多抗免疫仔猪后,通过仔猪存活率、血清ELISA抗体效价及血清、肺、脑组织PRRSV基因评价多克隆抗体对PRRSV感染的预防和治疗作用。结果仔猪按0.5ml/kg体重接种多抗进行预防,再经PRRSV(NVDC-JXA1)株强毒(3×105.5TCID50)攻击,具有一定的预防作用,存活率为5/7;经NVDC-JXA1株强毒(3×105.5TCID50)感染后,分别按0.8ml/kg和1.0ml/kg剂量,连续注射3次进行治疗,存活率分别为5/7和7/7,但在注射1.0ml/kg的猪中,仍有部分猪血清(4/7)和肺(2/7)PRRSV基因阳性。结论高剂量的多克隆抗体(ELISAS/P>3,0.5ml/kg以上)对仔猪抵抗PRRSV感染具有一定的预防和治疗作用,经多克隆抗体预防或治疗后无临床症状的猪仍可能带毒。     

基于非负矩阵分解的语音深层低维特征提取方法

作为一种基于深层神经网络提取的低维特征,瓶颈特征在连续语音识别中取得了很大的成功。然而训练瓶颈结构的深层神经网络时,瓶颈层的存在会降低网络输出层的帧准确率,进而反过来影响该特征的性能。针对这一问题,本文基于非负矩阵分解算法,提出一种利用不包含瓶颈层的深层神经网络提取低维特征的方法。该方法利用半非负矩阵分解和凸非负矩阵分解算法对隐含层权值矩阵分解得到基矩阵,将其作为新的特征层权值矩阵,然后在该层不设置偏移向量的情况下,通过数据前向传播提取新型特征。实验表明,该特征具有较为稳定的规律,且适用于不同的识别任务和网络结构。当使用训练数据充足的语料进行实验时,该特征表现出同瓶颈特征几乎相同的识别性能;而在低资源环境下,基于该特征识别系统的识别率明显优于深层神经网络混合识别系统和瓶颈特征识别系统。     

实时荧光定量PCR方法检测人、鼠正常组织及脑癌组织中CD109蛋白的表达

目的分析CD109基因在正常组织及脑癌组织中的分布。方法采用实时荧光定量PCR方法,分析CD109在人、鼠正常组织及脑癌中的表达,以18SrRNA作为内标。结果CD109蛋白的mRNA丰度在睾丸组织中最高,在其它组织中较低,在12份脑癌标本中,检测到9份CD109表达上调。结论CD109基因在多数正常组织中表达很少,有可能是治疗恶性肿瘤的一个潜在的分子靶点。     

犬攻毒用狂犬病街毒株BD06的特性

目的对狂犬病街毒株BD06进行了毒株特异性分析,并评价其对犬的攻毒效果。方法将BD06株病毒于比格犬脑内传至第10代,参照《中国兽药典》三部(2010版)进行外源病毒(犬瘟热病毒、细小病毒、冠状病毒、Ⅰ型和Ⅱ型腺病毒)、支原体检测和无菌检验;提取传至第10代的犬脑组织总RNA,进行RT-PCR扩增反应,并进行全基因序列测序;经小鼠脑内传代后,测定小鼠的半数致死量(MICLD50);用2×104、5×104和10×104MICLD50/ml的鼠脑悬液,分别采用后肢肌注法和咬肌注射法进行犬攻毒试验。结果 BD06株病毒在犬脑中传至第10代,无外源病毒、支原体和细菌污染,基因序列未发生变化;经鼠脑传代1次后,MICLD50达105.32/ml;经咬肌注射5×104MICLD50/ml的BD06株病毒悬液可获得最佳犬攻毒效果。结论 BD06株病毒传代简单,对犬致病性强,可作为我国犬攻毒用狂犬病病毒的候选株。