乳腺癌中着丝粒蛋白CenpG的差异表达

用间接免疫荧光（IIF）验证了着丝粒蛋白CenpG的一种抗血清；通过对31例乳腺癌组织块及每一例病人的癌旁正常（非癌性）组织块蛋白提取物进行免疫印迹（Western blot）分析，发现多数情况下（71%）癌组织中着丝粒蛋白CenpG(95kD)过表达；在两例乳腺癌组织中还发现了一种能被CenpG抗血清识别的43kD蛋白质成分。结果表明，新近发现和命名的CenpG（或者还有其他相关成分）的差异表达可能与细胞恶性增殖有关。     

LCM激光捕获显微切割技术及其应用

本文介绍LCM(Laser Capture Microdissection)的发展历史、原理、优点以及在生物学研究中的应用及举例。     

印度黄麂细胞骨架系统的电镜研究

细胞骨架决定细胞的形态与运动,并参与多种细胞生理活动。在已研究的多种体外培养的细胞系(株)中,细胞骨架具有很大共性。印度黄麂(Indian Muntjac)转化细胞系是一种在生物学研究上很有应用价值的成纤维细胞,而我们的初步研究表明其骨架纤维在组织及排布上都与已知模式有很大区别。为了更好地在电镜观察中显示细胞骨架系统的空间排布及其纤维的成分和走向,我们主要采取了下述样品制备技术:①对生长于载网及盖片上的细胞用非离子型去垢剂Triton×-100整体提取,在扫描、透射电镜下进行观察,并变换拍摄角度,拍成立体象对。②对生长于塑料培养碟中的细胞经原位包埋后,连同塑料基质一起进行水平的和垂直的定向切片。观察表     

QSTAR Pulsar028Ⅰ型串连四极杆飞行时间液质联用质谱仪简介及其应用

简要介绍QSTAR质谱仪的工作原理、性能特点,并从使用者的角度介绍该质谱所配备的各种离子源的特点及应用举例。     

显微录像系统及光钳显微操作技术在马达蛋白体外运动研究中的应用

本文介绍显微录像技术应用于马达体外运动研究 ,特别是光钳技术与显微录像技术结合所发展起来的单分子马达运动研究的进展     

一种观察体内细胞骨架的电镜方法

迄今为止对细胞骨架的形态与分布的研究,几乎全部是在组织培养细胞中进行的。这主要是由于研究活体组织中细胞时要进行切片,而引入的包埋介质限制了去垢剂进行提取等重要而有效的技术手段的应用。然而,有关的研究结果已充分显示出体外人工培养条件,特别是对固体基质表面的附着,造成了骨架系统的一系列显著改变。本文试用新鲜活体组织为材料,在Bright5030型低温切片机上快速冷冻并切成2—8μ厚切片,用盖玻片条或电镜载网取下切片,立即放入37℃的含有非离子型去垢剂TritonX—100(浓度为0.5％)和戊二醛(浓度为2％)的微管稳定性缓冲液中进行处理,或先行提取随之进行固定。用系列提高浓度的乙醇脱水后,临界点干燥,喷镀金膜,用扫描电镜观察,或在固定后用醋酸双氧铀染色。再经脱水和临界点干燥,以透射电镜观察。从而提供了一     

细胞骨架系统的立体电镜观察

从两个角度拍摄同一物体,可得到具有“强烈”立体感的一对“体视”照片。细胞骨架具有复杂的空间排布。本文应用体视技术,用透射电镜、扫描电镜和扫描透射电镜对体外培养细胞的骨架系统进行了观察,描述了生长在载网上,并经triton x—100消化的小儿包皮成纤维细胞的骨架纤维,特别是张力纤维的空间分布及其与核的关系,并观察了细胞松驰素 B(Cytochalasin B.简称CB)所引起的骨架系统的改变。CB破坏含actin的非张力纤维的微丝结构,所造成的较大的不定形团块可连在张力纤维上。而多数团块是被微管和中等纤维互相牵拉而悬浮在细胞质各处。同时,这些纤维也因为团块的形成而变得互相靠拢,往往局部平行成束。与此同时,细胞骨架网状结构中出现空洞。在不同高度上,这些空洞的位置常常是一致的。本文还对样品制备和显微照相时的有关问题进行了讨论。     

体外培养的不同亚型肺癌细胞株差异蛋白的初步分析

分析体外培养的不同亚型肺癌细胞株蛋白质表达差异,筛选肺癌细胞的标志蛋白并与肺癌病人血清中的标志蛋白进行对比分析。采用SELDI(Surface Enhanced LaserDesorption/Ionization)蛋白质芯片技术检测了三种肺癌细胞株A549(肺癌)、Calu-6(腺癌)和PG(大细胞癌)以及人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)的蛋白质谱。结果显示与2BS细胞比较,肺癌细胞有24个蛋白质表达发生明显改变。     

采用蛋白质组学技术筛选与肺腺癌转移相关的标志蛋白

本文应用表面增强基质辅助激光解析离子化-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)对一系列转移能力递增的肺腺癌细胞CL1-0,CL1-2,CL1-3 CL1--5和CL1-5F4进行蛋白质谱检测。采用H4和WCX2两种具有表面修饰的蛋白芯片筛选差异蛋白,Biomarker Wizard软件分析结果显示H4和WCX2芯片共捕获到32个差异蛋白,其中15个蛋白在细胞随着转移能力增强而逐渐表达降低,相反17个蛋白则随着细胞转移能力的增强表达逐渐升高。在上述筛选到的32个差异蛋白中有2个蛋白可被两种芯片共同捕获。上述研究结果将为揭示肺癌发生和转移的分子机理提供有价值的实验数据。     

SELDI蛋白质芯片技术在蛋白质组学中的应用

本文介绍了SELDI(Suface-enhanced Laser Desorption/Ionization)蛋白质芯片技术的工作原理,讨论了不同类型的蛋白质芯片在蛋白质组学中的应用。