反相高效液相色谱法测定烟草中的类胡萝卜素及其异构体

采用反相高效液相色谱−二极管阵列检测器（RP−HPLC−DAD）分离和测定烟草中类胡萝卜素及其异构体的组成和含量。烟草样品经过含有0.1%丁基羟基甲苯（BHT）的冰丙酮溶液萃取,浓缩后,经Zorbax SB C18色谱柱分离。流动相组成:A,乙腈−水（体积比为88:12）;B,乙酸乙酯。梯度洗脱程序:0 − 25min,100%A;25 − 50 min,B由0%线性增加为60%;50 − 55 min, 40%A+ 60% B;55 − 60 min,A由40%线性增加为100%。 检测波长:450 nm。进样量:10 µL。流速:1.0 mL/min。该方法简化了样品的前处理,共分离出烟草中11种类胡萝卜素及其异构体。类胡萝卜素物质的加标回收率为87.7−94.6%,;相对标准偏差为3.01−4.29%。同时研究了新鲜烟叶和烘烤后烟叶中类胡萝卜素的分布和含量,结果显示:烟叶中类胡萝卜素的组成及含量与烟叶品种、部位以及调制有关。