竹节参总皂苷通过调节miR-34a/PPARα干预小鼠脂肪肝的作用研究

本文研究了竹节参总皂苷对小鼠脂肪肝的干预作用。应用高糖高脂饲料制备脂肪肝模型,同时采用灌胃的方法给予竹节参低剂量（50 mg/kg）和高剂量（100 mg/kg）处理,检测血清和肝脏中的相关指标,HE和油红O染色来检测小鼠肝脏组织病理学变化,进一步用Real-Time PCR检测肝组织miRNA及相关基因的转录水平,Western Blotting检测PPARα的表达情况。结果显示模型组的小鼠血清ALT的水平,肝脏组织的TG均高于正常组;HE和油红O染色发现模型组肝组织表现为脂肪样变,脂质明显沉积,提示脂肪肝模型成立。Real-Time PCR和Western Blotting检测,模型组的miR-34a、SREBP-1c和FASN的表达较正常组升高,而PPARα表达降低。与模型组相比,经过竹节参药物的干预后肝脏组织病理学变化明显改善,脂质沉积减少;ALT水平降低。因此竹节参总皂苷可能通过miR-34a靶向PPARα的信号通路发挥对小鼠脂肪肝的干预作用,这一发现为脂肪肝的预防与治疗提供有效参考。     

木瓜提取物对小鼠脂肪肝的保护作用

本文研究了木瓜提取物对小鼠脂肪肝的干预作用。将40只雄性昆明小鼠随机分成4组,正常组、高脂组和药物低(100mg/kg)、高(300 mg/kg)剂量组。正常组给予普通饲料,高脂组给予高脂高糖饲料,用药组采用木瓜提取物低、高剂量饲料喂养,1月后处死,检测小鼠血清相关指标,HE染色观察肝脏组织形态,RT-PCR和激光共聚焦显微镜(Confocal)检测脂代谢相关基因表达,q PCR检测mi R-199a-5p水平。与正常组相比,高脂组小鼠血清中TC、ALT的水平增高;组织病理结果显示,肝脏脂肪变性明显;RT-PCR和Confocal结果显示,HGF、VEGFa和c-Met的表达降低,q PCR显示,高脂组中mi R-199a-5p水平增高。与高脂组比较,药物低、高剂量组脂肪肝病理损伤明显改善,血清ALT、TC含量均下降,HGF、VEGFa和c-Met表达水平上调,mi R-199a-5p水平降低。因此木瓜提取物对高脂高糖诱导的小鼠脂肪肝有保护作用,其可能的机制是通过调节mi R-199a-5p-HGF/c-Met信号通路发挥作用。     

木瓜提取物预防非甾体抗炎药诱导的小鼠肠黏膜损伤

为了研究木瓜提取物对非甾体抗炎药(NSAID)引起的小鼠小肠黏膜损伤的预防作用,应用灌胃方式连续6d给与木瓜提取物,在第5 d给与双氯芬酸钠5 mg/mL连续两天灌胃,建立NSAID诱导小肠黏膜损伤模型。检测小肠黏膜通透性及观察小肠黏膜病变情况,检测葡萄糖转运蛋白(GRP-78)、CHOP、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、Toll受体4(TLR4)及NLRP的表达水平。FITC-DT测定结果显示正常组相对荧光值(Relative fluorescence value,RFU)为682.7±105.4、模型组2008.3±496.1、木瓜低剂量组为1097.8±501.1、木瓜高剂量组为737.5±275.5;与正常组相比,模型组小鼠小肠黏膜明显损伤及通透性增加;与模型组相比,不同剂量木瓜提取物处理小鼠后能明显减轻小肠黏膜损伤,其机制与木瓜提取物调节肠道组织的内质网应激(GRP78和CHOP)、降低肠道炎症反应(TLR4和TNF-α)有关。提示木瓜提取物能通过调节TLR4-内质网应激预防NSAID对小鼠小肠黏膜的损伤。     

木瓜对小鼠非酒精性脂肪肝形成的预防作用

目的：复制小鼠非酒精性脂肪肝动物模型,观察木瓜对此模型的影响。方法：高脂饮食同时皮下注射小剂量四氯化碳复制小鼠非酒精性脂肪肝模型,在高脂饮食中添加木瓜对其进行干预,与正常饮食组对照。喂养5 周后检测血清肝脏酶学(ALT、AST)、血脂(TG、CHO)水平;肝组织切片染色,显微镜观察肝组织病理变化;提取肝脏总RNA 检测TLR-2、TLR-4、IL-1 β、TGF- β、PD-L1 等基因的表达情况,并进行统计学分析。结果：与正常组相比,模型组血清的肝功能和脂质水平上升,肝细胞形态明显改变,肝索消失或不清晰,相应基因表达水平上调;与模型组相比,木瓜干预组血清肝功能指标和脂质水平均显著下降,肝细胞气球样变较少,无明显肝细胞坏死,肝索存在,肝组织TLR 和炎性因子表达水平明显下调。 结论：木瓜对高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝有一定预防效果,该效应的挥可能是通过调节TLR 受体及死亡配受体表达,炎性因子的分泌而实现的。     

原花青素B2通过GATA4/p53通路改善肝细胞衰老的研究

本研究探索了原花青素B_2对BNL.CL2肝细胞衰老的拮抗作用。应用棕榈酸(PA)诱导肝细胞衰老细胞模型,通过MTT实验测定PA和PCB_2的细胞增殖效应;利用衰老特异性β-半乳糖苷酶试剂盒检测PCB_2对细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶表达的影响;通过实时定量PCR检测PCB_2对细胞周期相关基因CDK6和p53m RNA表达水平的影响;采用免疫荧光染色法检测PCB_2对P53和GATA4蛋白表达以及细胞核大小的影响。结果表明,PA浓度为100μM时能够有效抑制细胞增殖(control:1.289,PA:0.655,p0.001),而PCB_2浓度为12.5μg/m L时可明显改善细胞增殖作用(0.766;p0.01);与PA组比,PCB_2组中表达β-半乳糖苷酶的阳性细胞明显降低;PA诱导细胞核增大(control:1973.9 vs PA:7995.1, p0.05),而PCB_2可降低细胞核大小(3848.8,p0.05);PA能够诱导衰老相关基因p53表达上调(3.36,p0.05)和CDK6基因表达下调(0.49,p0.05),PCB_2可有效改善PA诱导的肝细胞衰老(p53:1.11;CDK6:1.01,p0.05)。免疫荧光染色显示,PA诱导的肝细胞衰老使p53和GATA4共定位于细胞核;经PCB_2处理后,p53和GATA4蛋白在核表达减少,且共定位于细胞质中。因此PCB_2能够拮抗肝细胞衰老,其可能通过GATA4/p53信号通路发挥作用。     

稻花香活力型白酒对大鼠TLR4在蛋白及基因水平表达的影响

目的:同步检测TLR4在蛋白及基因水平的表达,观察稻花香活力型白酒(DVL)和普通稻花香白酒(DCL)对大鼠肝组织TLR4表达的影响,以比较这两种酒毒性的差异,并探讨白酒毒性及肝损伤的机理.方法:将28只SD大鼠随机分为DVL组、DCL组和正常对照组,采用大剂量白酒灌胃法制备大鼠急性酒精性肝损伤模型,应用免疫组化和RT-PCR法检测肝组织中TLR4的蛋白及基因表达情况.结果:免疫组化和RT-PCR检测结果均显示,DCL组大鼠肝组织中TLR4的表达量显著升高,而DVL组TLR4的表达量显著低于DCL组.结论:与普通稻花香白酒相比,稻花香活力型白酒可显著下调肝组织中TLR4的表达,从而减轻了对肝脏的损害.     

竹节参总皂苷改善高脂高糖饮食小鼠的神经炎症及可能的机制

探索了竹节参总皂苷(saponins of Panax Japonicus,SPJ)对高脂高糖饮食诱导小鼠脑组织炎症反应的改善效果。Balb/c小鼠随机分为四组:正常对照组、模型对照组、SPJ低剂量组(16.7 mg/kg),SPJ高剂量组(50 mg/kg),分别给予普通饲料、高脂高糖饲料及添加不同剂量SPJ的高脂高糖饲料,喂养4个月。与正常对照组比较,模型对照组的皮层形态结构异常,细胞凋亡增多,小胶质细胞激活增加,炎症相关因子表达升高。给予竹节参总皂苷干预,可明显改善脑组织形态结构,减少细胞凋亡和小胶质细胞活化,减轻炎症相关因子iNOS、COX-2和IL-1β的蛋白表达,并抑制NLRP3炎症小体包括NLRP3、ASC、Caspase-1的表达。可见,竹节参总皂苷可具有改善高脂高糖饮食小鼠的脑组织炎症反应的效果,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体的激活从而减少炎症因子表达有关。     

四株益生菌对非酒精性脂肪性肝病的改善作用

探究了四株益生菌对非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD）的改善作用。30只小鼠随机分为正常组（N）、高脂饮食（HFD）模型组（M）及益生菌干预组四组：植物乳杆菌LP45（Lactobacillus plantarum,LP）、嗜酸乳杆菌La28 （Lactobacillus acidophilus,La）、鼠李糖乳杆菌LR519（Lactobacillus rhamnosus,LR）和乳双歧杆菌BAL531（Bifidobacteriumlactis,Bal）。正常组给予常规饲料喂养,其它组给予HFD喂养;同时益生菌组每天给予对应菌液灌胃21 d,对照组给等体量生理盐水;期间监测小鼠体质量和摄食量。检测内脏脂肪、肝脏生化指标、组织病理和炎症因子表达水平。与N组相比,M组摄食量、体质量及内脏脂肪均显著增加,高达8.74 g/d、33.30 g、0.71 g。较于M组,益生菌干预组小鼠的摄食量和内脏脂肪均明显降低,Bal、La、LR和LP组摄食量分别为6.97、6.91、5.94和6.59 g/d;内脏脂肪0.41、0.40、0.27和0.36 g;ALT、CHO、TG和MDA水平也显著下降;肝脂肪变性明显缓解;炎症因子ELF3和TNF-α的mRNA及IL-6的蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。体外,四株益生菌也表现出一定抗氧化和降脂活性,其中Bal抗氧化活性最高,达16.81%;La降脂活性最高,为46.40%。Bal、La、LP、LR可有效改善小鼠的NAFLD,其机制至少部分归因于其降脂、抗炎、抗氧化和保肝等生物学活性。     

竹节参总皂苷对高脂高糖小鼠脑组织凋亡的保护作用

观察竹节参总皂苷（saponins from Panax japonicas,SPJ）对高脂高糖饮食小鼠脑组织凋亡的保护作用。昆明小鼠随机分成正常对照组、高脂高糖模型组和药物低（100 mg/kg）、高（300 mg/kg）剂量组,分别给予普通饲料、高脂高糖饲料、竹节参总皂苷低、高剂量饲料喂养。Western blot法检测抑凋亡相关蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax、细胞色素C（Cytochrome C）、半胱天冬蛋白酶（Caspase-3和Caspase-12）、炎性因子诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、环氧合酶2（cyclooxygenase,COX-2）、IL-1β和NLRP3炎症小体包括NOD样受体家族3（NOD-like receptors,NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、Caspase-1和抗氧化应激蛋白沉默信息调节因子1（Silence information regulator 1,SIRT1）、腺苷酸活化蛋白激酶（Adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK）磷酸化水平。与高脂对照组相比,竹节参总皂苷高剂量组中Bcl-2、SIRT1和p-AMPK分别升高了1.31倍、1.05倍、1.33倍,Bax、Caspase 3、Caspase 12、Cytochrome C、COX-2、iNOS、IL-1β、NLRP3、Caspase 1和ASC分别下降了34%、39%、60%、37%、41%、25%、43%、49%、31%、52%。竹节参总皂苷对高脂高糖小鼠具有抗凋亡作用,其机制与其调节NLRP3炎症小体及炎性因子,增加抗氧化应激相关蛋白有关。     

miRNA调控肿瘤相关基因c-met的研究进展

C-met属于酪氨酸激酶受体（receptor tyrosinekinases,RTKs）超家族成员,当与其配体肝细胞生长因子结合后可以引起细胞不同信号通路的改变。微小RNA (microRNA,miRNA)是一类高度保守、内源性、非编码的单链小分子RNA,其长度约为19～25个核苷酸,通过影响靶mRNA的稳定性或抑制其翻译从而对基因进行转录后表达的调控, 其在生物的多种生物学过程中发挥着重要作用。研究表明,miRNAs可以通过调控c-met的表达,抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭。现就miRNA对肿瘤相关基因c-met调控的研究进展进行综述。