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采用观察透明圈与液态发酵测酶活相结合的方法,从腐烂的水果中筛选获得1株果胶酶产生菌G1。通过形态观察与18S rDNA序列分析,鉴定菌株G1为黑曲霉。对G1菌株的发酵工艺进行优化,确定最佳培养基配方(g/L):桔皮粉32,麸皮10,(NH4)2SO422,Na2HPO4·12H2O 8.4,KH2PO41.4,MgSO4·7H2O 1.0,CaCl20.1,FeSO4·7H2O 0.1,ZnSO4·7H2O 0.1,培养基初始pH 6.5;最佳发酵条件是:装液量50 mL/250 mL,转速180 r/min,接种量9%(体积分数),32℃培养7 d。在此条件下,果胶酶活力达到270.4 U/mL,比优化前提高了8.7倍。 相似文献
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碱性蛋白酶是一类重要的工业酶制剂。为进一步提高碱性蛋白酶在高温碱性条件下的活力,增强其工业应用价值,本文从地衣芽胞杆菌CCTCC M2018539中首先通过PCR扩增获得碱性蛋白酶编码基因aprE539并克隆入表达载体pND-113中,在枯草芽胞杆菌WB600中实现碱性蛋白酶AprE539的表达;重组酶AprE539经硫酸铵沉降(30%~70%)、透析、DEAE阴离子交换和超滤获得纯酶,并以SDS-PAGE电泳测定AprE539的分子量大小。结果表明,AprE539的分子量大小为30 kDa。进一步对其酶学性质研究表明:AprE539的最适作用pH为11.0,最适作用温度为65~70℃;在pH6.0~12.0范围内具有较好的稳定性;在60℃保温1 h后酶活剩余70%;Cu2+、Mn2+、Ca2+和Mg2+对酶活有明显促进作用。AprE539在氨基酸序列上仅有2个氨基酸残基与碱性蛋白酶2709存在差异,但其酶学特征差异明显,为后续进一步探究其酶学性质差异性奠定基础。 相似文献
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超氧化物歧化酶(SOD)能特异性清除氧自由基,对保护细胞免受氧化损伤具有重要作用。本文构建了表达重组梅花鹿来源Cu/Zn-SOD的毕赤酵母工程菌GS115-p PIC9K-SOD,并对重组SOD进行分离纯化和酶学性质研究。通过10 ku中空纤维柱超滤、DEAE弱阴离子交换层析、高效凝胶色谱分离纯化,重组Cu/Zn-SOD的比活力为1 7647.1 U/mg,回收率为36.84%。对重组Cu/Zn-SOD的酶学性质研究表明,其最适反应pH 8.0,最适反应温度30℃;在pH 5~9之间较为稳定,保温1h后仍能保留80%以上的酶活力;60℃保温1 h酶活保持在90%以上,70℃保温20 min残余酶活力仍有70%以上。重组Cu/Zn-SOD在中性条件下对蛋白酶耐受性较好,然而易受胃酸的酸解导致酶活力丧失。 相似文献
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通过酶解条件的优化来提高琼胶寡糖水解度,以得到低聚合度的新琼寡糖。试验研究了底物浓度、酶解温度、反应p H、加酶量、酶解时间和龙须菜颗粒大小对酶解过程中水解度的影响。酶解产物采用琼胶酶直接酶解龙须菜制备琼胶寡糖,简化琼胶寡糖制备工艺。结果表明,最佳酶解工艺为:底物浓度0.5%,酶解温度45℃, pH 6.5,琼胶酶加酶量10 U/mL,纤维素酶加酶量6.5 U/mL,龙须菜颗粒大小为过40~60目筛,酶解时间5 h,对应的水解度为56.6%,还原糖含量为4.652 mg/mL。通过液相色谱分析酶解产物主要为新琼四糖,存在少量新琼二糖,为功能性琼胶寡糖应用打下基础。 相似文献
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利用低场核磁共振研究β-谷甾醇和γ-谷维素的键合物作为油脂质构剂时,对高水分软质奶油产品水分状态和分布的影响。采用CPMG脉冲序列获得样品的横向弛豫时间T2。结果表明,核磁共振谱中弛豫时间为40~150 ms的T2部分可反映油脂中氢质子的信息;β-谷甾醇和γ-谷维素的键合物使软质奶油中结合水和自由水的氢质子向低弛豫时间迁移,水分子的流动性降低,自由水含量减少,表明键合物与水分子有较强的结合效应。当β-谷甾醇和γ-谷维素的键合物添加量为4%时,自由水含量比空白样减少17.8%,偏振光显微图片及感官分析显示β-谷甾醇和γ-谷维素键合物使软质奶油样品的微观结构和感官品质得到改善。 相似文献
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宜兴紫砂陶是我国具有优秀民族传统的实用工艺美术陶瓷,有着悠久的历史和很高的艺术成就,为人类文明作出了贡献,在国内外享有崇高的声誉。紫砂壶艺的审美,可以总结为形、神、气、态这四个要素。 相似文献
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关于茶叶蛋白的研究及其开发利用,目前研究得较多的主要为茶叶蛋白的工业化提取.本文在现有茶渣中茶叶蛋白提取工艺的基础上,采用新的复合酶酶法提取工艺(固液比1:35,复合酶B加量0.5%,碱浓度0.1N,温度50℃(2h)→90℃(2h)),使蛋白提取率和蛋白纯度都有了较大的提高,分别可达到85.3%和82.4%.并对所提取的茶叶蛋白的酶法水解工艺进行了研究,通过试验,确定了酶法水解茶叶蛋白的最佳酶解工艺条件为:温度50℃、pH9.0、底物浓度10%、酶添加量2%、水解时间4hr;在此条件下,茶叶蛋白的水解度可达74.0%.水解产物中含有大量的小分子蛋白质和多肽,多肽含量可达到40.85%.本研究从根本上解决了茶渣资源开发与利用的主要限制性因素——茶叶蛋白高抗性,从而在一定程度上加大了茶渣资源应用的广泛性和可行性. 相似文献