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目的:制备格林沙星多克隆抗体并建立间接竞争酶联免疫吸附分析方法(icELISA)。方法:采用碳二亚胺法将格林沙星偶联于牛血清白蛋白(BSA)作为免疫原,免疫新西兰大白兔获多克隆抗体;采用活泼脂法分别将格林沙星、克林沙星、加替沙星、培氟沙星和沙拉沙星偶联于卵清白蛋白(OVA),制备5种包被抗原并做性能比较;建立icELISA方法并对其灵敏度和特异性进行评价。结果:成功制备了免疫原和包被抗原及抗体,抗体效价最高达64 000倍。以克林沙星-OVA作异源包被,建立的icELISA方法灵敏度最高,半抑制药物浓度(IC50)为9.14 ng/mL,检测限(IC10)为0.9 ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为2.3~36.4 ng/mL,与其他喹诺酮类药物无明显交叉反应。结论:首次制备出格林沙星抗体并建立间接竞争酶联免疫吸附检测方法,该法灵敏度高、特异性强,为分析生物样品中格林沙星含量的测定提供了1种新的方法。 相似文献
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利用响应曲面分析法对藕淀粉增抗工艺进行了优化.通过预实验确定最佳淀粉乳浓度为8%.凭借单因素实验确定了普鲁兰酶用量、普鲁兰酶酶解时间、酸解时间三个实验因素的取值范围.利用响应曲面分析法得知.在三个因素中普鲁兰酶用量对抗性淀粉产率的影响最为显著,酶解时间影响最小,确定的最佳生产工艺:普鲁兰酶用量为45.1 ASPU/g藕原料淀粉、酶解时间为58.2min和酸解时间为3.04h.据此工艺参数制得藕抗性淀粉含量达到12.3%. 相似文献
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