全细胞SELEX法筛选单增李斯特菌的ssDNA适配体

以单增李斯特菌活细胞为靶标,采用指数富集配基的系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,SELEX)从含40个随机碱基序列的单链DNA(single-stranded DNA,ss DNA)文库中筛选与之特异性结合的适配体。酶联配体吸附法(ELASA)测定筛选过程中次级文库与单增李斯特菌结合力的变化。对筛选得到的适配体进行序列测定,RNA structure软件预测二级结构,ELASA测定适配体与靶标的结合能力和特异性。结果显示,每轮筛选后次级文库与靶标的亲和力增强,特异性适配体逐步得到富集。测序获得23条适配体,其序列同源性不高,但预测的二级结构有些相似,根据二级结构将其分为3个群,分析结果表明二级结构与适配体的亲和力有关。挑选亲和力较强的21号(Lma-21)和35号(Lma-35)适配体能特异性地识别单增李斯特菌。本研究为开发食源性病原菌单增李斯特菌的新型检测试剂提供了基础材料。     

一种棕色、富含γ-氨基丁酸蜜柑醋的制作及其品质分析

以高产棕色素的葡糖杆菌（Gluconobacter sp.）FBFS 82菌株发酵柑橘汁,生产棕褐色的色素发酵液,然后与液态发酵的原醋进行调配,制成酸度为5 g/100 mL、色素发酵液含量分别为10%、15%、20%和25%的蜜柑醋（分别以A、B、C和D表示）。对蜜柑醋的理化指标、色泽稳定性、游离氨基酸以及挥发性成分进行分析。结果表明,蜜柑醋色泽鲜亮,自然环境下存放至60 d其色素无明显变化。蜜柑醋A和C均检测到18种氨基酸,包括8种必需氨基酸和具有生理功能的γ-氨基丁酸（（182.27±8.68） mg/100 mL,（383.19±8.27） mg/100 mL）。从蜜柑醋A和C中分别鉴定出51种和60种挥发性成分,包括酯类、酸类、醇类、醛类、酮类、酚类及其他类。     

食醋中苯乳酸的提取、鉴定及含量比较

采用高效液相色谱-串联质谱联用（LC-MS/MS）结合核磁共振（NMR）法从山西老陈醋的乙酸乙酯萃取物中分离提取并鉴定出一种新型抗菌物质苯乳酸（PLA）。进一步分析发现,PLA主要在食醋酿造的醋酸发酵阶段产生。对77种来自不同国家食醋中的PLA含量进行分析,结果表明73种食醋中都检测到PLA,且谷物醋中PLA的含量均明显高于果醋中的PLA含量。     

适配体结合聚酰胺-胺修饰的磁性纳米粒子富集单增李斯特菌

目的制备聚酰胺-胺聚合物修饰的磁性纳米粒子,增加连接适配体的数量,提高富集单增李斯特菌的效率。方法通过迈克尔加成和酰胺化的级联反应,在Fe_3O_4磁性纳米粒子表面接枝3.0代聚酰胺-胺树枝状聚合物(poly(amidoamine)dendrimers,PAMAM),制得聚酰胺-胺磁性纳米粒子(G3-MNPs),并对其进行表征。G3-MNPs偶联生物素标记的单增李斯特菌特异性适配体,获得适配体磁性纳米粒子(AP-G3-MNPs)。然后对AP-G3-MNPs富集单增李斯特菌的工作条件和捕获率进行测定。结果傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)分析、Zeta电位测定以及碳、氮元素分析结果表明,PAMAM已接枝在MNPs表面,G3-MNPs偶联适配体的效率为1.412 nmol/mg。AP-G3-MNPs(200μg)对浓度为2×102～2×108 CFU/mL的单增李斯特菌的捕获率均大于90%。结论接枝PAMAM提高了MNPs的负载能力,增强了其富集单增李斯特菌的能力。