紫外可见分光光度法和高效液相色谱法法测定酒神菊属蜂胶和国产蜂胶中黄酮含量对比研究

目的对比采用紫外可见分光光度法(ultraviolet-visible spectrophotometry,UV-VIS)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定国产和酒神菊属蜂胶样品中的黄酮类化合物含量差异。方法以芦丁作为对照品,参考《2003版保健食品中总黄酮的含量测定》和GB/T 20574-2006《蜂胶中总黄酮含量的测定方法分光光度比色法》,采用UV-VIS和HPLC分析技术检测酒神菊属蜂胶和国产蜂胶中的黄酮类化合物含量。结果采用UV-VIS法测得酒神菊属蜂胶总黄酮含量为3.11%～8.03%(均值为6.04%),低于国产蜂胶总黄酮含量为3.00%～16.30%(均值为9.97%);采用HPLC法测定杨梅素、槲皮素、山奈酚、芹菜素、乔松素和高良姜素等黄酮类成份,酒神菊属蜂胶中黄酮类化合物总含量范围为1.562%～6.432%,国产蜂胶黄酮类化合物总含量范围为2.238%～13.621%。结论 UV-VIS和HPLC法下测得的总黄酮含量相近,但蜂胶中的黄酮类化合物含量上百种,所以以芦丁计检测蜂胶中总黄酮含量值得深究,同时有必要建立更合理的方法评价蜂胶的质量。     

酪蛋白磷酸肽活性单体分离纯化、固相合成及结构差异研究

本文利用反相高效制备液相色谱对酪蛋白磷酸肽(CPPs)进行初步分离,根据色谱图峰形收集得到4个组分,用分析型反相高效液相色谱进一步分离纯化组分F2,得到亚组分P3,低温减压浓缩回收溶剂,冷冻干燥得到CPPs单体P3粉末。通过已知CPPs单体P3的氨基酸序列人工固相化学合成CPPs单体P3,经质谱和高效液相色谱鉴定,合成CPPs单体P3的分子量与天然单体分子量一致且纯度为98.13%。天然与合成CPPs单体P3的液相保留时间一致,相同浓度条件下合成单体的紫外吸收显著高于天然单体,可能与空间结构差异有关。经红外光谱和圆二色光谱分析,天然与合成CPPs单体P3均含有α-螺旋、β-转角、β-折叠和无规卷曲特征结构,主要以β-折叠-反平行式和无规卷曲形式存在,但不同二级结构形式比例存在差异。天然与合成CPPs单体P3的α-螺旋、β-转角和无规则卷曲比例存在显著差异。天然与合成CPPs单体P3浓度从2 mg/m L上升到4 mg/m L时,天然单体P3不同形式二级结构变化较小,主要由α-螺旋和无规则卷曲向β-折叠-反平行式转变,合成单体P3不同形式二级结构变化显著,主要由α-螺旋和β-转角向β-折叠-反平行式和无规则卷曲转变。     

对比福林酚法和高效液相色谱法测定酒神菊属蜂胶和国产蜂胶中酚酸类化合物含量

目的 比较福林酚法和高效液相色谱法测定酒神菊属蜂胶和国产蜂胶中的酚酸含量的差异。 方法 采用福林酚法(Folin-酚法)测总酚酸, 以没食子酸为对照品, 765 nm下检测样品的吸光值; 采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测总酚酸, 以绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸C、咖啡酸苯乙酯、阿替匹林C为对照品, 优化HPLC洗脱条件, 利用标准品的进样量和色谱峰面积进行线性拟合, 线性回归方程以计算各个单体的含量。结果 Folin-酚法下, 酒神菊属蜂胶总酚酸含量为5.71%~14.68%, 平均为11.34% (n=14), 国产蜂胶总酚酸含量为5.87%~28.99%, 平均值为16.98% (n=12); HPLC法下, 酒神菊属蜂胶总酚酸含量为2.13%~9.20%, 均值为5.71% (n=14), 国产蜂胶总酚酸含量为1.69%~9.13%, 均值为5.05% (n=12)。结论 2种蜂胶都含有比较高含量的酚酸类成分, 不同测定方法下酚酸类成分含量存在明显差异, 选择合适的方法用于检测蜂胶中的酚酸类成分含量显得尤为重要。     

原型胶原蛋白的提取分离及其结构鉴定

目的 比较不同产品中的原型胶原蛋白构型和理化性质差异。方法 经酶法、盐析等步骤对市售胶原蛋白产品进行提取分离纯化, 利用氨基酸测序技术、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis , SDS-PAGE)和圆二色谱技术对其结构进行鉴定。结果 1号胶原蛋白为变性胶原蛋白, SDS-PAGE方法未检测到蛋白的电泳条带, 表明其无明显的空间结构; 2号胶原蛋白存在混杂现象, 为非纯的原型胶原蛋白; 3号胶原蛋白为典型的Ⅱ型胶原蛋白结构特征, SDS-PAGE结果中存在单一的α链和β链, 与文献资料相符合。结论 3种胶原蛋白均具有典型的胶原蛋白蛋白氨基酸组成, 但由于生产工艺的不同、物种来源、部位的差异, 导致表现出了3种不同的空间构型。     

固相微萃取优化/GC-MS法分析不同年份陈皮的挥发性成分

为了最大化获取陈皮挥发性成分,本文采用顶空固相微萃取（HS-SPME）结合气相色谱质谱联用仪（GC-MS）对不同年份陈皮进行分析。结果表明,陈皮取样量为2 g,在90 ℃中萃取30 min所得挥发性成分最多,方法学考察中陈皮在6次平行试验中共有的色谱峰相对保留时间及相对峰面积的相对标准偏差（RSD）均低于0.05%。三个不同年份陈皮中共检出44种挥发性成分,相对含量较高的挥发性组分有β-月桂烯、邻异丙基甲苯、D-柠檬烯、萜品烯、α-法尼烯、右旋香芹酮、香芹酚和2-(甲氨基)苯甲酸甲酯,其中含量最高的是陈皮的特征香气代表D-柠檬烯。随着陈皮贮藏年限延长,挥发性物质种类明显增多,烃类、醛酮类和酚类等物质相对总量变化程度较大,说明物质之间发生了相互转化,SPME的优化方法适用于陈皮挥发性物质的提取。     

不同钙片产品体外快速持钙活性与原子吸收法测定含钙量的比较研究

酪蛋白磷酸肽(CPP)是从牛乳酪蛋白中水解分离所得到的一种生物活性肽,具有很强的促钙吸收活性。本实验考察CPP抑制磷酸钙/碳酸钙沉淀的产生,来表征CPP的持钙效果。对市售三种钙片体外持钙活性进行了体外快速演示实验和利用原子吸收法测定含钙量的比较和研究,结果表明含CPP的钙片具有较明显的持钙优势,阻止磷酸钙/碳酸钙聚沉时间可达30 min以上。在相同钙片重量和相同钙含量的情况下,加有CPP的钙片在水中溶解后的沉淀明显少于另外两种钙片产品,上清液加入碳酸钠溶液中,沉淀明显较多于另外两种钙片,表明了CPP具有明显延长持钙时间、有效抑制碳酸钙沉淀生成的作用。这一研究发现为市场上钙片产品补钙效果提供了有理有据的科学支撑,对保健品行业健康稳健的发展具有重大指导意义。