辣木凝乳酶水解酪蛋白位点及其酪蛋白磷酸肽、酪蛋白糖巨肽

基于十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,液相色谱-串联质谱法研究辣木凝乳酶对酪蛋白的酶切位点和水解特性,并分析该凝乳酶水解产生的酪蛋白糖巨肽和酪蛋白磷酸肽。结果表明,辣木凝乳酶酶切κ-酪蛋白的Arg 93-His 94位点导致凝乳,区别于其他已报道的凝乳酶,具有明显特异性。酶作用下κ-酪蛋白的米氏常数Km=0.49 mg/mL,最大反应速率Vm=45.2 U/min,有效促进酪蛋白胶束的聚集和凝乳。该酶对α-、β-、κ-酪蛋白产生不同程度的水解,对α-酪蛋白的水解速度最快,说明其适用于软质奶酪的加工。以酪蛋白为底物,通过钡-乙醇沉淀法得到酪蛋白磷酸肽（casein phosphopeptides,CPPs）,产率为15.87%,得到的CPPs可以使钙沉淀推迟23 min,有利于钙离子被肠道有效吸收。以水牛乳为底物时,乳凝固后析出的乳清中含酪蛋白糖巨肽6.61 mg/mL,糖基化程度477.527 μg/mg。研究为新型植物凝乳酶的研发,及其在奶酪、酪蛋白活性肽等产品的应用提供科学依据。     

植物乳杆菌发酵大麦粉对挂面品质及消化特性的影响

经植物乳杆菌发酵的大麦粉其可溶性蛋白和多酚化合物等含量均显著升高,使其具有新的营养功能。本文旨在研究植物乳杆菌发酵大麦粉(LFB)对挂面品质及消化特性的影响。通过LFB与小麦粉梯度配粉制作挂面,分析其蒸煮品质、质构特性和感官品质,测定总淀粉和可消化淀粉含量;采用体外模拟消化试验,计算淀粉水解指数(HI)和血糖生成指数预测值(EGI)。结果表明,在小麦粉中添加10%～20%LFB的挂面蒸煮与感官品质虽有下降,但总体影响不显著。当LFB添加量超过20%,其蒸煮损失率随着LFB添加量的增加而增大,粘着性、弹性和拉伸力随之减小,感官品质变差;挂面可消化淀粉的含量与LFB添加量成反比,当LFB添加量为40%时,在180 min内淀粉的水解率比对照(白面包)相应降低了35.77%～78.86%,平衡浓度下降23.02%,EGI降至70以下,即通过添加足够量的LFB可改变纯小麦挂面的EGI,使其成为中血糖生成指数的食物。     

双酚S暴露对秀丽隐杆线虫行为学及生长发育的影响

双酚S(BPS)作为双酚A(BPA)的替代物,在各个产品中(奶瓶、食品罐和热敏纸等)已经得到广泛应用,但是目前关于BPS的毒理学研究甚少。本文以BPS为研究对象,秀丽线虫为模式生物,分析其对运动行为能力及生长发育的影响。研究结果表明,急性毒性试验中,暴露浓度达到1μM时,运动行为学指标身体弯曲频率显著下降,暴露浓度达到10μM时,运动行为学指标头部摆动频率显著下降;随着浓度的增加,BPS还会影响秀丽隐杆线虫的寿命和子代数目,导致寿命缩短和子代数目的减少,BPS浓度达到100μM时,与对照组相比,寿命下降了35.42%,子代数目下降了30.47%;BPS暴露会导致秀丽线虫体内活性氧自由基含量显著上升,推测高浓度的BPS可能造成秀丽线虫的氧化损伤,进而影响运动行为能力、寿命及子代数量。     

发酵大麦分离蛋白对3T3-L1细胞棕色化的影响

采用实验室自主分离的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarumm dy-1)发酵大麦,研究其提取物分离蛋白(LFBE-P)对3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为米色脂肪细胞的作用。采用盐析、G25凝胶柱层析和超滤等方法对发酵液中的蛋白质进行分离纯化和浓缩,再用适当浓度的LFBE-P对3T3-L1进行诱导试验,检测细胞葡萄糖消耗量和相关m RNA的相对含量。结果表明,与未发酵大麦分离蛋白(RBE-P)相比,LFBE-P可显著提高3T3-L1细胞葡萄糖消耗量和棕色化脂肪细胞特征基因的表达。对LFBE-P进一步进行纯化的研究结果显示,相对分子质量为3~20 ku的蛋白质是诱导细胞棕色化反应的主要成分,该范围的蛋白质可显著提高3T3-L1细胞中UCP1和PGC-1α等与细胞降脂产热直接关联基因的表达。综上,LFBE-P能够诱导3T3-L1细胞发生棕色化反应,促使白色脂肪向米色脂肪转变。     

乳酸菌发酵大麦提取物对胰岛素抵抗的干预作用

研究乳酸菌发酵大麦提取物(LFBE)对饮食诱导的肥胖大鼠胰岛素抵抗的干预作用及其机制。通过饲喂高脂饲料的方法建立营养型肥胖模型大鼠,在饲喂模型大鼠高脂饲料的同时,分别灌胃LFBE(1 000 mg/kg bw)和水(4 mL/kg bw) 8周后,测定其体重、血脂、炎症因子等指标。结果显示,与模型对照组相比,LFBE能显著降低营养型肥胖大鼠的体重、血脂和胰岛素水平,提高糖耐量,说明LFBE可以减缓肥胖大鼠体重的增加,改善糖代谢紊乱和胰岛素抵抗症状。同时,LFBE可抑制促炎因子的表达,抑制NF-B和c-Jun氨基末端激酶(JNK)/p38介导的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,从而改善胰岛素抵抗症状。研究结果表明,LFBE具有干预胰岛素抵抗的作用,其作用机制主要与抑制MAPK(JNK、p38)的磷酸化以及NF-B活性有关。     

发酵大麦提取物对人结肠癌HT-29荷瘤裸鼠的抑瘤作用

研究乳酸菌发酵大麦提取物(LFBE)对人结肠癌HT-29荷瘤裸鼠的抑瘤作用,并探讨其相关机制。在建立HT-29人结肠癌荷瘤裸鼠模型的基础上,设计不同处理组的LFBE连续灌胃30 d,以肿瘤体积、抑瘤率和肿瘤HE染色切片等评价LFBE的体内抗肿瘤作用;以肝脏HE染色切片初步观察LFBE的毒副作用,并测定血脂、血糖、肝脏抗氧化能力及免疫因子等指标,研究LFBE对机体的免疫调节功能。试验结果表明,5-氟尿嘧啶(5-FU)组、LFBE高剂量组、5-FU-LFBE混合组和LFBE低剂量组的抑瘤率分别为30.08%,49.32%,53.36%和39.42%,其中混合组抑制肿瘤生长的作用最强,说明LFBE和5-FU具有协同效应,且均未见LFBE对肝脏有毒副作用;与正常组相比,LFBE处理组能显著降低血清TG和GLU的含量,增加IFN-γ,IL-4和TNF-α的表达;与阴性对照组相比,LFBE能减少MDA含量,增加SOD,CAT,T-AOC和GSH-PX的活力。研究结果表明,LFBE能显著抑制荷瘤裸鼠肿瘤细胞增长或诱导肿瘤细胞凋亡,并以保护免疫器官,增加免疫因子表达,抑制TG和GLU合成和提高肝脏抗氧化能力等途径发挥其抑瘤作用。     

发酵大麦提取物对3T3-L1前脂肪细胞分化及脂代谢的影响

研究乳酸菌发酵大麦提取物(LFBE)对3T3-L1前脂肪细胞分化及其脂代谢的影响与作用途径。利用植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum dy-1)发酵大麦获得LFBE,采用Folin-Ciocalteu法测定总酚含量;凯氏定氮法测定蛋白质含量与苯酚硫酸法测定多糖含量;采用CCK-8法检测细胞增殖能力和油红O染色法分析前脂肪细胞的分化程度;采用Realtime PCR法检测LFBE对脂代谢关键基因转录水平的调控作用。结果表明,与未发酵大麦提取物相比,LFBE中总酚含量增加了20.88%;LFBE中蛋白质含量从发酵前的13.93%增加至34.94%;多糖含量从未发酵时的64.94%下降至35.43%。与未发酵大麦提取物组相比,LFBE能够有效地抑制3T3-L1前脂肪细胞的生长,其IC_(50)约为560μg/mL;与模型组和未发酵大麦提取物组相比,400μg/mL LFBE能够显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化,抑制率达到58.85%。与模型组相比,LFBE能显著抑制脂代谢关键基因C/EBPα、PPAR-γ、SREBP-1c、PTP1B和aP2的mRNA表达水平,上调GLUT4的mRNA表达水平(p0.05)。LFBE可有效抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖,并通过调节脂代谢相关基因的转录水平抑制其分化,表明其可能具有预防肥胖的作用。     

MIMIC数据库智能挖掘研究概述

开源数据库-重症特别护理信息集MIMIC数据库包含了大量的医学数据,自它发布之日起,便得到了众多研究人员的青睐。但低效的挖掘方法很难发现内部的隐含信息,这使得MIMIC数据库得不到很好的利用,造成了资源的浪费。探索新兴的挖掘方法进行知识发现便显得异常重要。文中对围绕MIMIC数据库的各种挖掘方法进行综述,重点阐述了新出现的机器学习和深度学习方法。同时将传统统计学模型与新出现的人工智能技术包括机器学习和深度学习技术进行比较分析。结果发现相比传统的统计学模型,机器学习和深度学习技术在预测病人的早期死亡率、发现疾病影响因素等方面普遍效果更好,这有助于改善医疗质量、帮助医生进行辅助诊断,在一定程度上也减少了病人的医疗费用。     

小麦胚芽的生物转化研究进展

小麦胚芽是小麦籽粒的生命源泉,含有极其丰富且优质的蛋白质、脂肪、多种维生素及一些微量生理活性成分,被营养学家们誉为"人类天然的营养宝库"。因此,小麦胚芽的开发利用一直是国内外研究热点之一。尤其是近年来,很多研究热点逐渐由原来的麦胚主要成分提取转向生物转化技术研发,即以(脱脂)小麦胚芽为基质,采用酵母菌、乳酸菌等微生物发酵制备具有抗肿瘤、抗氧化、抗真菌以及抗炎症等功能性成分。本文综述了小麦胚芽生物转化技术研究的国内外现状及发展趋势,旨在为小麦胚芽的深度开发利用提供参考。     

双酚A对秀丽隐杆线虫的急性毒性作用研究

双酚A(BPA)是一种普遍存在的内分泌干扰物,可以对人体健康产生不良影响。日常生活中,人们接触的BPA浓度较低,而低浓度下BPA毒性效应却并不明确。为了了解低浓度下BPA的毒性效应,我们以秀丽隐杆线虫为模式生物,以低浓度的BPA为研究对象,开展了急性毒性研究。研究结果表明BPA对秀丽线虫的LC50为440.16 mg/L,而低浓度的BPA对秀丽线虫的运动行为指标(头部摆动频率、身体弯曲频率)均具有显著的抑制作用,对头部摆动频率影响最为敏感,最低作用浓度为1μmol/L。低浓度的BPA还会影响秀丽线虫的生长发育和子代数目,与对照组相比,BPA浓度为100μmol/L时,体长和子代数目分别降低6.05%和15.24%。当BPA达到0.01μmol/L时,能够显著抑制秀丽线虫的寿命并且提高ROS水平,引起氧化应激的伤害,加速秀丽线虫的衰老,缩短其寿命。总之,低浓度的BPA暴露可以影响秀丽线虫的运动、生长发育、生殖及寿命。