卷烟烟气小动物口鼻暴露方法的建立及评价

  背景和目的  国际经济合作与发展组织（OECD）测试导则（TG）对化学物质暴露环境参数和浓度稳定性有明确要求,本文的目的是建立符合其要求的卷烟烟气小动物口鼻暴露方法。  方法  在小动物口鼻暴露系统中测定4种卷烟烟气在不同稀释倍数下颗粒物数量浓度和挥发性有机物浓度,以确定符合OECD要求的卷烟烟气稀释倍数等参数。在该参数条件下,对40小鼠口鼻暴露连续2周,用酶联免疫吸附方法（ELISA）检测小鼠肺灌洗液白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平变化,以进一步评估方法的稳定性。  结果  （1）4种卷烟主流烟气颗粒物浓度和总挥发性有机物（TVOC）在大于100倍稀释时,时间和空间变异系数均小于10%,符合OECD的要求,低于100倍则变异较大。（2）IL-10变异系数在6.9%~8.6%之间,TNF-α变异系数在13.4%~17.6%;IL-6变异系数在16.8%~23.2%之间。  结论  所建立的卷烟烟气口鼻暴露方法符合OECD导则要求,生物学效应指标检测结果可靠稳定。      

尼古丁诱导人肠道上皮细胞自噬水平的研究

  目的  探讨尼古丁对人肠道上皮细胞自噬水平的影响和可能的分子机制。  方法  正常培养人肠道上皮细胞, 采用不同浓度(0、2.5、5、10μM)尼古丁处理细胞24h。倒置显微镜观察细胞形态变化; 通过CCK8法检测肠道上皮细胞的增殖情况; 通过Western blot检测自噬标志物LC3、beclin1和p62变化; 通过透射电子显微镜(TEM)检测自噬小体形成情况; 通过GFPLC3转染后激光共聚焦显微镜检测自噬斑点形成情况。同时, 也检测了内质网应和mTOR/AMPK/Akt信号通路变化。  结果  细胞增殖随着尼古丁浓度的增加受到明显抑制, 2.5μM尼古丁对细胞形态和增殖无显著影响。尼古丁能够上调LC3B-II和beclin1蛋白表达水平, 同时下调P62的表达, 且成浓度依赖性。TEM和激光共聚焦显示尼古丁作用后, 肠道上皮细胞自噬体数量显著增加。  结论  低浓度的尼古丁能够诱导肠道上皮细胞的自噬, 且对细胞增殖无影响, 机制与内质网应激和mTOR/Akt信号通路激活相关。      

毒理学关注阈值(TTC)方法的历史演化与发展

毒理学关注阈值(TTC)的概念是指,对化学品建立一个人体暴露阈值,当低于该阈值时化学品对人体健康无明显的风险。TTC方法从提出至今已将近半个世纪,并经历了一个不断完善和发展的过程。本文主要从TTC方法的建立、发展、改进等方面进行了探讨。TTC方法最初被用于食品接触材料中安全阈值的确定。之后,人们对经口的非致癌毒性终点的无明显作用剂量(NOEL)进行了分析,发展出了以结构类为基础的多层次TTC方法。这种以结构类为基础的多层次TTC方法后来被联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)食品添加剂联合专家委员会(JECFA)和欧洲食品安全局(EFSA)等组织所采用,并在此基础上进行了发展和改进。TTC方法现已经在低人体暴露水平的化学物质风险评估中得到了广泛的应用,避免了大量不必要的,过于详细的研究,以及广泛的毒理学实验。TTC方法也为那些用量极低并且缺乏完整毒性数据的化学物质的风险评估提供了一条可行的途径。     

两种前处理方法对一次性纸杯水提取物细胞毒性测定结果影响的比较研究

探讨两种前处理方法在测定一次性纸杯水提取物的细胞毒性中的应用。一种前处理方法采用欧盟关于纸和纸板水提取物细胞毒性测定标准中的前处理方法,另一种前处理方法则模拟了纸杯日常使用条件。选用4种市售的一次性纸杯,对两种方法得到的纸杯浸提液使用MTT法测定了对CHO细胞的毒性作用。结果表明,4种受试纸杯使用本研究所采用两种方法的水提取物均未显示出明显细胞毒性,细胞相对增殖率无显著差异,两种前处理方法均可用于一次性纸杯的细胞毒性测定。     

体外连续传代培养对生物工程细胞CHO凋亡的影响

采用Annexin V-FITC/PI双染法检测磷脂酰丝氨酸外翻、JC-1染色法检测线粒体膜电位、底物切割法检测Caspase-3及Caspase-8酶活性等4个指标来评估连续传代培养的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的凋亡情况。结果表明,随着连续传代培养代次的增加,CHO细胞发生内部凋亡途径介导的凋亡,同时对凋亡诱导剂的反应更为敏感。因此,可以采用凋亡指标来监测细胞状态,从而提高基因工程蛋白的生产效率及化学品毒理学评价的准确性。     

FEMA对食用香料物质进行安全性评估概述

文章综述介绍了FEMA GRAS名单的产生和由来、FEMA专家小组评估的对象、FEMA GRAS评估的四大要素、申请FEMA GRAS评估所需的数据以及FEMA GRAS基于化学组的评估方法。着重阐述了FEMA对食用香料物质进行GRAS评估时需要考虑的四大要素。包括:进行安全评估的专家必须是具有资格的权威科学家;评估应按照科学程序或1958年1月1日之前在食品中普遍使用原则进行;评估在预期的使用条件下进行;评估结果须得到普遍认同。     

G蛋白偶联受体家族味觉受体的信号转导及应用研究进展

味觉是口中的物质与味觉受体细胞发生反应而产生的一种感觉。当呈味物质刺激味觉受体时,信号通过神经感觉系统传导到大脑,经过综合神经中枢系统的分析,从而产生味觉。近年来味觉受体、信号转导及应用研究引起了极大的关注,对细胞的大量研究结果表明不同的味觉通过不同的味觉受体产生。本文就G蛋白偶联受体（guanosine-binding protein coupled receptor,GPCR）家族味觉受体的信号转导过程及应用研究的进展进行综述。     

烟草单倍体基因编辑系统的建立

  背景和目的  单倍体材料作为转化受体具有不受同源染色体联会配对影响、转化效率较高、外源基因在后代基因组中稳定性较好、加倍后即可获得纯合转化植株等优点,结合基因编辑CRISPR/Cas9系统,可大大加快烟草品种选育进程。  方法  通过花粉离体培育获得单倍体,利用CRISPR/Cas9系统编辑八氢番茄红素脱氢酶基因位点,产生白化单倍体植株。  结果  （1）经过4℃处理4~6天的实验组,花药愈伤组织形成率最高可达11%;（2）获得转化后单倍体植株120株,其中白化86株（白化率71.67%）,红花大金元51株,其中白化24株（白化率47.06%）。  结论  （1）适当低温处理可提高花药培育单倍体效率;（2）以单倍体为受体的基因编辑效率有所提高。      

普通烟草SWEET基因家族的鉴定与表达分析

  目的  为挖掘参与烟草糖代谢的SWEET（sugar will eventually be exported transported）基因家族成员。  方法  以拟南芥SWEET蛋白为参考,利用生物信息学方法,对栽培烟草的SWEET蛋白家族进行鉴定,分析蛋白理化性质、系统进化、染色体定位、基因结构和顺式作用元件,对其在不同组织和不同胁迫处理的表达模式进行检测。  结果  从普通烟草中鉴定到70个可能的SWEET基因,系统发育树将其划分为4个亚家族,大多数烟草SWEET基因在进化过程中经历纯化选择。不同烟草组织的表达模式分析显示,一些烟草SWEET基因具有组织表达特异性。不同胁迫处理的表达模式分析显示,部分烟草SWEET基因在葡萄糖、蔗糖、低温、干旱或者是盐胁迫处理下表达量变化明显。  结论  Ntab0097340和Ntab0727890是烟草植株重要的响应干旱与低温胁迫的基因,本研究为深入研究烟草SWEET基因功能提供有价值的参考信息。