植物乳杆菌CGMCC8198冻干菌粉的制备工艺优化

为提高植物乳杆菌CGMCC8198冻干存活率,以浓缩乳清蛋白粉、木糖醇和壳寡糖为保护剂材料,先后通过单因素和正交试验得出最优复合配方,并进一步对冻干菌粉的活性及储存性能进行探究。研究表明：各保护剂成分对冻干存活率的影响顺序为浓缩乳清蛋白粉＞壳寡糖＞木糖醇,且最优配方质量分数分别为15%、6%及1.5%,添加复合保护剂的冻干菌粉表面光滑且精致,流式细胞术分析表明冻干后其活性保持较好,约为80.47%。同时,耐受试验表明冻干菌粉具有较好的耐酸性和肠溶性。     

重组大肠杆菌生产多形拟杆菌肝素酶I的发酵优化

以实验室前期构建的N端融合SUMO标签的多形拟杆菌肝素酶I(SUMO-Bt-Hep I)生产菌株重组大肠杆菌Rosetta(DE3)/pE-SUMO-Bt-HepI为研究对象,通过单因素确定其最佳表达条件:诱导温度25℃、诱导剂浓度0.4 mmol/L、诱导时间12 h;首先通过Plackett-Burman试验,筛选出培养基中3个主要影响酶活的因素:葡萄糖、酵母提取物和蛋白胨。并通过响应面试验确定最佳培养基为:葡萄糖9.52 g/L,酵母提取物9.61 g/L,蛋白胨19.92 g/L,硫酸铵4 g/L,磷酸氢二钠18 g/L,磷酸二氢钾3 g/L,硫酸镁5 g/L。在此最佳培养基下发酵酶活预测可达55133IU/L,3次验证试验获得的SUMO-Bt-HepI酶活力平均为56961 IU/L,与理论预测值接近,比优化前(24215.9 IU/L)提高了2.3倍。通过5 L发酵罐的分批补料扩大培养得到的最高发酵酶活为3.937×10~5IU/L,比摇瓶提高了6.91倍,这是目前报道发酵生产肝素酶I的最高水平,对工业化应用具有一定的指导意义。     

酸粥类食品中乳杆菌的药敏性分析及优势菌株的筛选

对从山西酸粥、广西酸粥、贵州白酸汤与河南绿豆酸浆中筛选出的27株乳杆菌(干酪乳杆菌、弯曲乳杆菌、发酵乳杆菌、类布氏乳杆菌、哈尔滨乳杆菌、短乳杆菌、植物乳杆菌、vini乳杆菌、副干酪乳杆菌)进行体内存活能力的测定及药物敏感性评价。筛选所得乳杆菌对青霉素、链霉素、卡那霉素、庆大霉素、环丙沙星、复方新诺明、头孢他啶与万古霉素耐药性较强,对亚胺培南、四环素、氯霉素、利福平、头孢噻吩、头孢噻肟与红霉素较为敏感。通过调节p H与胆盐浓度模拟胃酸与肠胆盐环境,筛选出4株(HN2、HN9、HN13、HN15)具有较强耐酸能力与耐胆盐能力的乳杆菌,均为发酵乳杆菌。并利用鼠尾胶原蛋白I型模拟肠道黏附环境,结果表明4株菌对胶原蛋白均具有较高的黏附力。研究结果为传统发酵食品中的益生菌在食品和药品开发与应用中的安全性提供参考数据,并为工业化生产提供了优良、安全的菌株。