嗜热芽孢杆菌HSO8耐热中性蛋白酶的分离纯化及部分特性研究

从高温土壤中分离出1株产耐热中性蛋白酶的嗜热芽孢杆菌,研究了该酶的分离纯化与生化特性.蛋白酶经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析和Sephacryl S-100HR凝胶层析分离纯化后,纯化倍数提高4.25倍,产率5.1%;经SDS-PAGE电泳测得其分子质量为30.9 kDa.酶的最适温度与pH试验表明,其最适温度为65 ℃,最适pH为7.5,并在50 ℃时保持1 h以上的稳定.该蛋白酶活性受到EDTA的抑制,Zn2+能提高酶活性,该酶为金属蛋白酶.改性酪蛋白(Azocasein)、酪蛋白、牛血清白蛋白(BSA)等3种底物专一性试验表明,改性酪蛋白是其最适底物.     

着-聚赖氨酸/淀粉抑菌膜的制备及性能检测

对以淀粉为成膜基质,海藻酸钠和甘油为增塑剂,ε-聚赖氨酸为抑菌剂的淀粉基抑菌膜进行研究,并对其抑菌性和膜性能进行检测。结果表明,ε-聚赖氨酸对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌的最低抑菌浓度分别为1、2、2μg/mL,而将ε-聚赖氨酸添加到淀粉膜后,最低抑菌浓度都提高到64 mg/g,对淀粉膜和抑菌膜的力学性能、红外光谱检测、透气性和透油性及膜液的流变性、接触角等比较,差异较小。     

气相色谱检测冷冻虾仁中邻苯二甲酸酯类增塑剂

通过对样品前处理和色谱分离条件的研究和优化,建立并验证了冷冻虾仁中17种邻苯二甲酸酯(PAEs)的气相色谱检测方法。采用WelchromRP-SCX(60mg/3mL)小柱为样品前处理净化柱。检测条件:石英毛细管柱HP-5(30 m×0.25 mm,0.25μm);进样量5μL,不分流;进样口温度250℃;初始温度75℃,以5℃/min升温至300℃,保持10min;检测温度300℃;载气流速1.0 mL/min,载气为氮气。PAEs在1~100μg/mL范围,线性关系良好,检出限为0.14~0.81μg/mL。几种增塑剂的回收率是:DCHP 93.20%,DPP 81.20%,DMEP 78.70%,BMP76.50%,DHXP 75.80%,DBP 74.70%。冷冻虾仁中含DBP 7.77μg/mL,DPP 2.36μg/mL,DHXP 5.84μg/mL,DINP 6.83μg/mL,其他增塑剂组分未检出。该方法稳定,结果可靠,重复性好,可用于冷冻虾仁中邻苯二甲酸酯类增塑剂含量的检测。     

豌豆淀粉/ε-聚赖氨酸复合膜的制备及其性能

本文以豌豆淀粉/ε-聚赖氨酸为主要基材,以甘油、海藻酸钠等为增塑剂制备复合膜包装材料。采用单因素、正交实验等方法,在设定的工艺条件下流延成膜,进行复合膜的配方研究和最佳条件下膜性能研究。结果表明:最佳配方为100 mL水中加入10.5 g豌豆淀粉、1.5 g聚赖氨酸(调pH9)、1.80%甘油、0.50%海藻酸钠;产品性能检测表明,抗拉强度约为18.35 MPa,断裂延伸率约为34.79%,水蒸气透过率为12.10 g/(m2·h),透油率为0.682 g·m/(m2·h),对大肠杆菌具有较好的抑制性。本研究表明豌豆淀粉/ε-聚赖氨酸复合膜具有功能性包装应用的基础。     

利用酒精废液发酵生产香菇多糖

探讨了以酒精厂废液为主要原料进行香菇菌深层培养生产多糖的工艺条件。实验结果表明：选用葡萄糖１ｇ／ｄＬ,豆饼粉１ｇ／ｄＬ,稻草粉０．７５ｇ／ｄＬ,酒精废液１０ｇ／ｄＬ的发酵培养基,在起始ｐＨ４．０,２８℃的条件下培养７ｄ,发酵液粗多糖（含胞内和胞外）产率最高达０．８４４ｇ／ｄＬ．     

香菇多糖提取工艺的研究

本文对香菇液体深层发酵液中香菇胞内、胞外多糖的提取工艺进行了研究。结果发现，在4℃以下，发酵液pH7．0时，采用乙醇分步沉淀法从香菇发酵液中提取胞外多糖可使粗多糖得率从一次性沉淀的3．0g／L提高到3．8g／L。利用响应面分析(RSA)结果得到胞内多糖的提取工艺参数为：92．5℃，3h，湿苗体：水为1：2．5。在此条件下，采用机械法处理香菇苗丝体，多糖得率从未处理时的6g／kg干菌体提高到12．62g／kg干菌体。     

促进乳酸菌发酵特性的植物激活剂筛选

研究了激活剂对乳酸菌发酵性能的影响.通过实验发现,不同乳酸菌所需的激活剂不同,马铃薯汁作为激活剂可有效缩短2号菌的发酵时间,提高其产酸能力,但对1号菌却没有明显的激活作用.     

反胶团萃取嗜热芽孢杆菌HS08发酵液中胞外蛋白酶研究

讨论了影响AOT/异辛烷反胶团体系萃取嗜热芽孢杆菌HS08发酵液中耐高温中性蛋白酶的因素.实验结果表明,AOT/异辛烷反胶团在很短的时间内能达到萃取平衡,100 mmol.L-1NaCl的离子强度有助于蛋白酶的反胶团萃取.在50 mmol.L-1AOT、pH4.5、100 mmol.L-1NaCl、油水相体积比为1的条件下萃取5 min能达到80%以上的酶活力回收率.     

玉米复合变性淀粉膜的制备工艺研究

研究了以玉米复合变性淀粉为主要原料,制备可降解可食用薄膜的工艺.通过对膜组分和成膜工艺参数对膜性能抗拉强度、延伸率、透水率和透油率等影响的研究,确定了膜的组成和制备工艺条件.正交实验结果表明,当玉米复合变性淀粉的质量体积分数为11%,甘油的添加量为0.15 mL,海藻酸钠添加量为0.5%,明胶的添加量为0.4%,干燥温度为38℃时制备的膜,其抗拉强度、延伸率、透水率和透油率等各项性能指标较优.     

嗜热芽孢杆菌蛋白酶HS08的分离纯化研究

从高温土壤中分离得到的一株产耐热中性蛋白酶的嗜热芽孢杆菌,该菌分泌的胞外蛋白酶粗酶液经80%饱和度硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Superdax75凝胶层析分离纯化后,纯化倍数提高4．36倍,得率为5．3%,经SDS-PAGE电泳测得其分子量为30．6kDa。酶的最适温度与pH实验表明,该酶最适温度为65℃、最适pH为7．5,并且该酶在50℃时表现出1h以上的稳定性。该蛋白酶的活性受到丝氨酸族蛋白酶专一性抑制PMSF和金属离子螯合剂EDTA强烈抑制,Zn2+能提高酶活性,因此该蛋白酶为Zn2+激活的丝氨酸族蛋白酶。