抗肿瘤坏死因子-α单链抗体在大肠杆菌中的表达及表达条件的优化

目的构建抗肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)单链抗体(Single chain fragment variable,scFv)的原核高效表达体系,并优化表达条件。方法在引物中添加编码6×His的核苷酸片段,使目的蛋白C-末端带有6×His标签。从质粒pCANTAB 5E-scFv中PCR扩增scFv基因,连接至pBV220载体,连接产物分别转化至E.coli BL21(DE3)和DH5α中,42℃诱导表达,并对诱导时间、培养基pH值和类型进行优化,Western blot分析表达产物的反应原性。结果 PCR扩增出的scFv基因片段长度约770 bp,且序列正确;重组表达质粒pBV220-scFv经酶切鉴定证明构建正确;在E.coli BL21(DE3)中可获得表达,在E.coli DH5α中不表达;表达的重组scFv相对分子质量约为28 000,以包涵体形式存在于胞浆中,表达量约占菌体总蛋白的15%,且可与抗His-Tag抗体发生特异性反应;工程菌的最佳诱导表达条件为:以E.coli BL21(DE3)为宿主菌,在pH 7.4的LB培养基中,42℃诱导5 h。结论将scFv的表达载体更换为pBV220,可提高scFv的表达量,在优化表达条件下,scFv的表达水平进一步提高。     

网络计划技术在钻探生产上的应用

网络计划技术也称统筹法，它是以网络的形式，反应和表达生产计划，工程进度和费用，使其达到预定目的的一种科学管理方法。钻探生产在目前管理比较落后，人力、物力和时间的浪费亦较严重。在科学技术高度发展的今天，提出新的管理方法，即用网络计划技术进行管理是必要的。     

不同结构直接染料蚕丝染色性能的研究

本文对直接染料蚕丝织物以及蚕丝／人丝交织物的染色性能进行了系统的试验，分析了染液ｐＨ值和温度、染料浓度以及电解质对不同结构直接染料蚕丝染色的影响，探讨了直接染料的结构与蚕丝染色性能的关系，提出直接染料的ＩＯＢ值可用作衡量和评估直接染料蚕丝染色性能的参数，具有理论和实用价值。     

纤溶酶原饼环区5蛋白重组大肠杆菌高效表达体系的建立

目的　建立纤溶酶原饼环区 5 (Humanplasminogenkringle 5 ,hPK 5 )蛋白重组大肠杆菌高效表达体系 ,为高密度发酵创造条件。方法　观察一级、二级种子的生长状态 ,比较表达hPK 5蛋白的 4种重组工程菌株在相同条件下的表达情况 ,选出首选发酵种子 ;对其培养时间、诱导时间、培养基种类、pH等条件进行优化 ;并用凝胶成像分析系统对SDS PAGE结果进行分析。结果　经过筛选 ,JM10 9 pBV2 2 0 hPK 5 (简称JP5 )是获取hPK 5蛋白的首选工程菌株 ,其最佳表达条件是LB培养基 (pH 7.4、溶解氧充足 )、30℃培养 3h、4 2℃诱导 6h。在此条件下 ,JP5表达目的蛋白占菌体总蛋白的 38%左右。结论　为高密度发酵获取hPK 5蛋白奠定了实验基础     

氮纶纤维分散染料染色性能探讨

通过对几种结构类型分散染料氨纶纤维上染率的测定，结合分散染料的IOB（无机/有机）值，探讨了分散染料结构与氨纶染色性的关系，系统测试了影响分散染料染氨纶的主要工艺参数，提出氨纶染色优化工艺条件。     

耐汗渍色牢度测试方法的探讨

本文应用全自动色牢度评级系统,客观分析了纺织品耐汗渍色牢度试验中浸泡温度、带液率等因素对测试结果的影响。试验结果表明,不同的浸泡温度、带液率,足以改变耐汗渍色牢度的试验结果。     

涤纶细旦丝织物的增深染色和整理

研究了不同分散染料对涤纶细旦丝织物的染深性，并通过染色助剂增深和后整理助剂增深二条途径对涤纶细旦丝织物进行增深加工，对整理剂赋予织物的特殊功能也作了探讨。     

木薯原料的酒精浓醪发酵

<正> 众所周知,浓醪发酵是发展发酵工业的有效途径之一,酒精生产也不例外。成热发酵醪含酒量的高低,不仅是一个重要的技术经济指标,而且也是体现发酵水平的标志。 目前我国酒精生产有相当大部分采用间歇式稀醪发酵,尤其是淀粉质原料的发酵醪浓度更低,因为配料浓度过高,淀粉在糊化时产生的粘度会给糊化醪的输送带来困难,所以,成熟发酵醪含酒量一般在7～10％(容量)。若能提高含酒量,在原有的设备基础上就能增加产量,相应地降低成本,节约能源,酒精生产即可获得良好的经济效益, 提高含酒量的方法是加大配料比,进行浓醪发酵,其中的一个关键问题是选育出耐洒精浓度高,产酒精能力强的菌种,当然,还必须找到它相应的发酵工艺条件,否则,菌种高产酒精的独特性能也无法得到发挥。因此,我们在开展木薯原料酒精浓醪发酵的研究时,首先进行酒精高产菌株的选育,探索其生理特性,同时对蒸煮糖化发酵等基本因子进行优选。通     

自吸式充气罐应用于糖化酶发酵

<正> 黑曲霉是一种好气性微生物,因此用黑曲霉生产糖化酶,是一种耗氧量大的发酵。好气性的液体发酵,一般在通风发酵罐内进行,供氧量的大小,又与发酵罐的结构型式和通风量的大小有关。目前国内一般采用机械搅拌通气发酵罐,又称标准罐。这种罐,既需要机械搅拌又需要通入压缩空气,不仅设备复杂、制造价格高,而且电压消耗大,由于溶解氧吸收速率高,为大部份好气性液体发酵生产所采用。     

真丝／氨纶弹力织物同色染色探讨

对分散、中性和弱酸性三类商品染料用于氨纶和真丝的染色性进行了比较，初步探讨了染料结构与真丝／氨纶弹力织物同色染色的关系，对影响真丝／氨纶弹力织物同色染色的主要工艺参数进行了试验和分析。