姬松茸多糖的提取及其对D-半乳糖诱导衰老小鼠的免疫调节作用

建立姬松茸多糖(Agaricus blazei polysaccharides,ABP)的提取方法,并研究姬松茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老小鼠免疫调节作用。采用水提醇沉法提取姬松茸多糖,通过单因素实验和正交试验筛选并优化姬松茸多糖的最佳提取工艺;采用D-半乳糖(400 mg/kg)构建衰老小鼠模型,将小鼠随机分为5组,空白对照组(CON)、模型组(MOD)、姬松茸多糖低剂量组(ABP-L,200 mg/kg/d)、姬松茸多糖中剂量组(ABP-M,400 mg/kg/d)、姬松茸多糖高剂量组(ABP-H,800 mg/kg/d);分别测定各组小鼠胸腺和脾脏指数;CCK-8法测定ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化;ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6含量。结果表明,姬松茸多糖最佳提取工艺为:提取温度100℃,提取时间3 h,料液比1∶20 g/mL,提取次数3次,此时姬松茸多糖的平均得率为8.814%±0.109%;与模型组相比,姬松茸多糖高剂量组显著提高小鼠脾脏(p0.01)和胸腺指数(p0.05),姬松茸多糖高剂量组极显著促进衰老小鼠脾细胞增殖(p0.01),增加衰老小鼠血清中TNF-α(p0.01)、IL-6(p0.01)含量。姬松茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老小鼠模型具有免疫增强作用。     

蛹、米虫草多糖含量及抗氧化活性比较研究

旨在研究不同来源北虫草子实体多糖的含量差异以及分级醇沉各组分的抗氧化活性差异。通过热水浸提、分级醇沉法分别获得蛹虫草多糖(Cordyceps militaris polysaccharide,CMP)、米虫草多糖(Cordyceps oryzae polysaccharide,COP);以DPPH自由基清除率、羟基自由基(·OH)清除率和铁离子还原能力法(ferric reducing antioxidant power,FRAP)评价两种多糖的体外抗氧化活性;构建H_2O_2致PC12细胞氧化损伤模型,比较两种虫草多糖对氧化损伤的PC12细胞的保护作用。不同乙醇浓度沉淀获得的虫草多糖中,米虫草多糖提取率及含量高于蛹虫草多糖;米虫草多糖对DPPH自由基、·OH清除率分别可达66.43%、69.22%,蛹虫草多糖可达73.69%、73.50%;FRAP法测得蛹虫草多糖抗氧化能力较强。细胞试验结果表明,氧化损伤的PC12细胞经两种多糖处理后细胞存活率皆有不同程度的提升,呈浓度依赖性,蛹虫草多糖组细胞存活率最高可达90.45%,米虫草多糖组细胞存活率最高可达82.62%。以蚕蛹为培养基的蛹虫草在多糖提取率及含量方面低于以大米为培养基的米虫草,但其多糖对自由基清除能力及PC12细胞保护作用优于米虫草多糖,具有较好的抗氧化能力。     

功能微生物菌剂对断奶仔猪生产性能的影响

本试验旨在探讨功能微生物菌剂对断奶仔猪生产性能的影响,为功能微生物菌剂的推广应用提供科学依据。选取某规模养殖场35日龄断奶仔猪100头,随机分成5组,即不同含量微生物菌剂含量的实验组2组、相应不同含量不含微生物菌剂的对照组2组和空白对照组。结果表明:微生物菌剂添加的实验组其日均采食量、日均增重、料肉比优于对照组和空白组,且5%微生物菌剂实验组添加效果更为明显。说明该功能微生物菌剂能显著提高断奶仔猪生产性能。     

桦褐孔菌黄酮类化合物的提取工艺优化及抗氧化活性

以桦褐孔菌为试材,采用乙醇热回流进行黄酮类化合物的提取,研究了单因素(料液比、提取温度、乙醇浓度以及提取时间)对桦褐孔菌中黄酮类化合物提取率的影响,通过正交实验对其提取工艺进行优化,利用FRAP、DPPH·、ABTS+·三种方法测定其抗氧化活性。结果表明:桦褐孔菌黄酮类化合物提取率影响因素为提取温度>乙醇浓度>提取时间>料液比,最佳工艺为提取温度75℃,乙醇浓度60%,提取时间2.0 h,料液比1:25 g/mL,在此工艺下提取桦褐孔菌黄酮类化合物含量为53.25 mg/mL,提取率为10.66%。桦褐孔菌黄酮类化合物浓度为200 μg/mL时,其总抗氧化能力相当于464.53 μmol/L FeSO₄。对DPPH自由基清除率的EC₅₀为36.44 μg/mL;对ABTS+自由基清除率的EC₅₀为299.89 μg/mL。研究表明桦褐孔菌中黄酮类化合物对DPPH·和ABTS+·的清除率接近V_C,具有较强的抗氧化活性,有潜力作为天然抗氧化剂推广应用。     

北虫草刺五加组合物抗疲劳活性及机理研究

为探讨北虫草刺五加组合物(Cordyceps militaris Acanthopanax senticosus composition,CAC)抗疲劳作用及机制,采用转棒和力竭动物模型,将小鼠分为空白对照组和低、中、高剂量给药组,各组连续灌胃蒸馏水或不同剂量CAC,灌胃第29天,进行连续3 d的转棒适应实验,灌胃第32天进行正式转棒实验,测定小鼠转棒停留时间;灌胃第35天,进行负重力竭游泳实验,测定力竭时间以及小鼠血乳酸(lactic acid,LA)、血乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肝糖原(liver cogen,LG)、肌糖原(muscle glycogen,MG)、肝组织中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)以及磷酸化-蛋白激酶B(phosphorylated-protein kinase B,p-AKT)、磷酸化-糖原合成酶激酶(phosphorylated-glycogen sythesis kinase-3,p-GSK3β)和葡萄糖转运子4(glucose transporter 4,GLUT4)等疲劳相关生化指标和糖原代谢相关机制指标。研究发现:与空白对照组相比,给药各组均可显著延长小鼠转棒的停留时间和力竭游泳时间(P0.01),中、高剂量CAC可显著提高力竭小鼠体内T-SOD活性,降低MDA和ROS水平(P0.01);与空白对照组相比,中、高剂量CAC可极显著提高力竭小鼠LG、MG、LDH的含量和活性(P0.001)、极显著降低LA、BUN的含量(P0.001);与空白对照组相比,中、高剂量CAC可增加肝组织中p-AKT(Ser473)、p-GSK3β(Ser9)和GLUT4蛋白的表达,其中高剂量组作用显著(P0.01)。结果表明:CAC能够通过提高小鼠机体抗氧化活力和糖原储备,减少机体无氧酵解及蛋白质分解供能而发挥抗疲劳作用,该作用可能与激活AKT/GSK3β/GLUT4信号通路有关。     

无锡地区应用γ-干扰素试验法检测牛结核病的临床应用

通过对无锡地区2011~2013年所有规模场奶牛应用γ-干扰素试验进行结核病监测,从而淘汰监测结核阳性牛最终达到牛场结核净化。2011年检出淘汰阳性牛45头,2012年检出淘汰21头,2013检出淘汰6头。结果显示阳性牛检出率逐年下降明显,γ-干扰素试验法有更好的特异性和敏感性,对净化牛群效果显著。     

复方北冬虫夏草提取工艺及其对链尿佐菌素诱导1型糖尿病大鼠的降血糖作用研究

目的:优化复方北冬虫夏草的提取工艺,并对其降血糖作用进行研究。方法:采用水煎煮法提取复方北冬虫夏草,通过单因素实验和正交试验优化提取工艺;以链尿佐菌素诱导Wistar雄性大鼠为1型糖尿病模型,成模后随机分为模型组,复方北冬虫夏草低、中、高剂量组,另取10只正常大鼠作为空白对照组,给药12周后分别称定各组大鼠体重,检测血清胰岛素、血糖,肝脏丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶及肾脏甘油三酯、总胆固醇水平,通过HE染色观察肾脏组织形态变化。结果:复方北冬虫夏草最佳提取工艺为:料液比1:10 g/mL,提取3次、每次提取1.5 h、提取温度为70℃,经三次平行试验验证平均提取率为53.1%,平均多糖得率为5.1%,平均总皂苷得率为1.3%;与模型组比较,复方北冬虫夏草各给药组均可改善糖尿病大鼠的相关指标,其中高剂量组大鼠体重、胰岛素水平和GSH-Px活力显著增加(P<0.05),SOD活力极显著提高(P<0.01),而血糖值、肝脏MDA及肾脏TG、TC水平则极显著降低(P<0.01);各给药组大鼠的肾损伤程度均得到明显改善。结论:优化了复方北冬虫夏草的提取工艺,最佳提取工艺条件下所得提取物对链尿佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠具有显著的降糖功效。