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一步柱层析纯化B-藻红蛋白及其毛细管电泳结合激光诱导检测 总被引:4,自引:0,他引:4
本研究采用硫酸铵沉淀结合DEAE-SepharoseFF离子交换柱层析技术分离纯化紫球藻中的B-藻红蛋白。试验结果表明,藻红蛋白粗提物经65%硫酸铵沉淀2d后过柱层析,B-藻红蛋白的纯度为A545nm/A280nm=3.0;而用65%硫酸铵沉淀2个月后,只需采用一步柱层析,B-藻红蛋白的纯度可提高到5.37,即达到纯品要求(纯度大于4.5)。说明65%硫酸铵对B-藻红蛋白具有高度选择性,其工艺效果对分离纯化有很大影响。特征吸收光谱和荧光光谱证实纯化后的产物符合B-藻红蛋白的性质,Native-PAGE电泳只出现单一染色带,表明获得的B-藻红蛋白是均一的;SDS-PAGE电泳出现2条染色带,一条着色较深带为α和β亚基,分子量为16~18kD左右,另一条较浅为γ亚基,分子量大约为31kD。同时建立了涂层毛细管柱结合激光诱导荧光电泳技术快速检测B-藻红蛋白纯度的分析方法,结果出现单一峰,表明毛细管电泳用于B-藻红蛋白的纯度检测高效可靠。 相似文献
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B-藻红蛋白是一种理想的生物光电材料.利用静电组装技术制备了聚二甲基二烯丙基氯化铵(PDDA)与B-藻红蛋白组装的多层复合薄膜.对薄膜的可见吸收光谱和荧光光谱进行了分析,结果表明:与B-藻红蛋白在溶液中的光谱特征相比,B-藻红蛋白在薄膜上的最大吸收峰由545 nm红移至553 nm,并在573 nm处产生了延迟荧光现象,且薄膜的最大吸光度和光致发射强度均与组装层数呈线性递增关系.随着薄膜组装层数的增加,倒置荧光显微镜能很好地观察到B-藻红蛋白在薄膜上出现明显的聚集体. 相似文献
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利用双水相系统同时分离火龙果皮中的天然红色素和果胶,提高火龙果皮资源的利用。以火龙果皮为原料,采用PEG/硫酸铵双水相体系分离火龙果皮中的色素和果胶。分析PEG相对分子质量、PEG质量分数、体系pH、硫酸盐质量分数4个因素对色素与果胶分离的影响。结果表明,随着双水相PEG和盐的质量分数增加,火龙果皮中的色素和果胶得率随之增加;当相比接近0.5时,上相中色素和下相中果胶获得较佳的分离。最佳的双水相分离条件为:利用质量分数16%的PEG6000,质量分数19%硫酸铵双水相体系,pH4.0,在此条件下,富集在上相的红色素和下相的果胶得率分别为1.82%±0.04%、3.68%±0.13%。因而,采用双水相萃取技术不仅可以同时分离火龙果皮中色素和果胶,还具有萃取条件温和、工艺简单、得率高的优点,本研究为火龙果皮的综合利用和开发提供了实验依据。 相似文献
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目的 建立免疫学快速检测减肥类保健食品中非法添加的酚酞, 制备酚酞单克隆抗体并进行评价。方法 利用碳二亚胺(carbodiimide, EDC)法合成免疫原和包被原, 用免疫原免疫Balb/C小鼠, 取小鼠脾脏与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合。采用竞争结合双阳性两步筛选法, 筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞, 利用有限稀释亚克隆方法得到单株细胞; 采用体内诱生法制备腹水型单克隆抗体。利用辛酸-饱和硫酸铵法对腹水型抗体进行纯化, 利用酶联免疫吸附法鉴定纯化后的抗体。结果 成功合成了酚酞-BSA免疫原和酚酞-OVA包被原, 筛选获得酚酞杂交瘤细胞株FT/BSA/2019, 单克隆抗体的效价1×105。结论 本研究初步建立了特异性高的酚酞单克隆抗体的制备方法。 相似文献
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目的 采用乙醇/磷酸氢二钾双水相体系同步分离脐橙皮中的黄酮和果胶。方法 以脐橙果皮为原料, 通过单因素实验和响应面实验对双水相萃取条件进行优化, 分析了双水相体系乙醇体积分数、磷酸氢二钾质量浓度、萃取温度对黄酮和果胶提取率的影响。结果 乙醇/磷酸氢二钾双水相体系能同时分离脐橙果皮中的黄酮和果胶, 其中上相为黄酮类化合物, 下相经脱盐、热水浸提和乙醇沉淀后获得果胶。最佳提取条件为: 乙醇体积分数35%, 磷酸氢二钾质量分数为18%, 萃取温度为78 ℃, 此条件下的果胶得率为(8.35±0.09)%, 黄酮得率为(3.32±0.08)%。结论 本研究建立了乙醇/磷酸氢二钾双水相体系同步分离脐橙果皮中黄酮和果胶的方法, 具有工艺简单、提取率高的优点, 为脐橙果皮的综合利用和开发提供了技术手段。 相似文献
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工程的成本是建筑企业的基础所在,有效地控制工程成本可以使企业得到快速的发展。因此,本文就房屋建设工程成本控制进行探讨,以期得到好的控制方法。 相似文献
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常规PID控制在对象变化时,控制器的参数不能自动修改适应,无法很好地满足轧机厚度控制精度的要求。针对这一问题,设计了一种模糊自适应PID控制器,利用模糊推理方法实现对PID参数在线自适应,来实现AGC系统的稳定,提高厚度控制系统的精度。通过simulink仿真,结果表明模糊自适应PID控制器自适应能力更强、响应快、稳定性好,同时也有更强的鲁棒性,能够使厚度控制得到满意的结果。 相似文献
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对标题化合物在3种不同类型的表面活性剂中的可见吸收光谱进行了研究.实验条件下,阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)使B-藻红蛋白的最大吸收峰由545 nm蓝移至506 nm,随CTAB浓度增加,最大吸收值显著下降.阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)在低浓度时对B-藻红蛋白的特征吸收峰形影响不大,当SDS的浓度2.0×10-3mol/L时,B-PE在564 nm的吸收峰消失.非离子表面活性剂Triton X-100对B-藻红蛋白的吸收峰形没有产生明显影响,并使吸收峰强度均有所增加.还初步探讨了B-藻红蛋白在3种表面活性剂中光谱变化的机理. 相似文献