直接稀释-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定谷物及其制品中16种真菌毒素

目的建立谷物及其制品中黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、单端孢霉烯族类毒素、伏马菌素等16种真菌毒素的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。方法 5 g样品加入20 ml乙腈-水-甲酸(79∶20∶1,V/V)溶液提取,10 000 r/min离心5 min后稀释,Cortecs C_(18)色谱柱(100 mm×3.0 mm,1.6μm)分离,以乙腈-0.1%甲酸水作为流动相梯度洗脱,采用四极杆串联质谱仪电喷雾模式检测,同位素稀释内标法定量。结果 16种真菌毒素在线性范围内(0.05~200 ng/ml)具有良好的线性关系,相关系数(r~2)0.99,方法定量限为0.1~50μg/kg,加标回收率为72.67%~126.92%之间,相对标准偏差(RSD)为0.15%~16.83%。应用本方法分析英国弗帕斯检测技术研究所(FAPAS)质控样品,测定结果均在标示范围内,方法准确度良好。结论本方法具有良好的灵敏度、回收率和重复性,前处理方法简单,适用于常规实验室对谷物及其制品中真菌毒素的检测,满足日常真菌毒素监测工作的需要。     

低温甲醇洗吸收塔集液箱漏液原因分析及预防措施

15万吨/年煤制氢联合装置酸性气体脱除单元采用德国Lurgi低温甲醇洗工艺,使用中发现吸收塔预洗段后路排液不及时,经过排查及停工后入塔诊断,发现吸收塔预洗段上部集液箱焊缝开裂,导致漏液严重。从工艺操作和集液箱固定形式等方面分析,确定了焊缝开裂的原因,采取了有效的修复和预防措施,为后序操作也提供了宝贵的指导意见。     

响应面试验优化QuEChERS法提取鸡蛋中杂色曲霉毒素工艺及方法学验证

使用乙腈溶液对鸡蛋中杂色曲霉毒素进行提取,后加入无水Na_2SO_4、NaCl和无水CH_3COONa进行盐析,取出上层乙腈后加入C_(18)吸附剂和无水Na2SO4进行净化浓缩后上机检测。采用Plackett-Burman试验、单因素试验和响应面法优化,最大限度地提高杂色曲霉毒素的提取率。使用基质匹配曲线外标法定量,所有阳性样品均使用免疫亲和柱法复测。结果表明,杂色曲霉毒素在0.125~1 000 ng/mL质量浓度范围内线性良好,相关系数达0.999 6,检出限为0.1μg/kg,定量限为0.5μg/kg。在空白鸡蛋基质中进行三水平加标实验,测得提取率在86.8%~90.4%范围内,日间重复性在1.5%~6.2%范围内。最终,将建立的方法用于45份样品检测,其中10份鸡蛋样品检测结果呈阳性,含量为0.5~3 608μg/kg。     

氮吹对黄曲霉毒素回收率的影响

目的提出了一种在黄曲霉毒素氮吹时防止因挥发导致回收率下降的改进措施。方法在溶液中加入一定量的丙三醇作为添加剂后再进行氮吹,并研究了丙三醇加入量对回收率影响的量效关系,以及不同材质的氮吹试管对结果的影响。结果聚丙烯离心管(polypropylene, PP)比玻璃材质更适用于氮吹。在溶液中加入10%丙三醇溶液100μL可以有效防止氮吹时造成的回收率损失,将黄曲霉毒素的回收率从50%～60%提高到90%以上。结论该方法简便有效,特别适合在处理大批量样品时使用。     

超高压液相色谱法同时检测玉米中的伏马毒素B1、B2、B3

目的 综合比较伏马毒素4种柱前衍生[邻苯二甲醛(OPA)、萘-2,3-二甲醛(NDA)、丹磺酰氯、6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯(AQC)]效果的优劣, 并选择一种衍生剂用于玉米样品中伏马毒素B1(FB1)、B2(FB2)、B3(FB3)的检测, 建立柱前衍生-超高压液相色谱法同时测定玉米中伏马毒素B1、B2和B3的方法。方法 采用乙腈-水(50∶50, v/v)溶液提取玉米中的伏马毒素B1、B2和B3, 涡旋震荡及离子交换柱净化对玉米样品中的伏马毒素B1、B2和B3进行提取与净化, 经衍生后进行超高压液相色谱-荧光检测器检测。 结果 最终选择OPA衍生作为本研究的衍生方法。3种伏马毒素的线性范围分别为50~1000 ng/mL、25~500 ng/mL、25~500 ng/mL, 相关系数R2均大于0.999; 最低定量限LOQ分别为25.0、14.0、17.0 μg/kg; 3个浓度的加标回收率分别为(75.6?1.6)%~(83.4?2.3)%, (78.9?5.4)%~(90.0?0.7)%, (83.7?8.2)%~(88.6?1.0)%; FB1、FB2和FB3的日间精密度分别为3.62%、3.41%、4.77%。结论 该方法具有预处理简单、检测速度快、灵敏度高的优点, 可满足对玉米中>800 μg/kg伏马毒素含量的检测要求。流动相的改进及梯度洗脱的使用, 提高了检测的灵敏度, 并可被在具有液相色谱仪的实验室应用。     

液相色谱-串联质谱法快速测定野生菌中9种蘑菇毒素

目的 建立液相色谱-串联质谱技术（LC-MS/MS）测定野生菌中5种急性肝衰竭型（α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽和二羟鬼笔毒肽）和4种神经-精神紊乱型（鹅膏蕈氨酸、毒蝇母、毒蝇碱和裸盖菇素）蘑菇毒素的分析方法。方法 样品经干燥后采用0.5%（V/V）甲酸50%（V/V）甲醇-水溶液提取、乙腈沉淀蛋白质、水稀释后,采用XBridge^TM BEH C₁₈柱（150 mm×3.0 mm, 2.5 μm）分离、0.005%（V/V）甲酸水溶液-甲醇流动相体系梯度洗脱,MS/MS多反应监测（MRM）模式测定。结果 通过优化样品提取、稀释倍数和色谱条件,实现基于纯溶剂标准校正的不同野生菌中9种蘑菇毒素的定性和定量测定。样品基质中9种蘑菇毒素的检出限（LOD）和定量限（LOQ）分别为6~15 mg/kg和20~50 mg/kg,线性范围为0.004~2 mg/L,相关系数r在0.997 3~0.999 5之间。50、500和5 000 mg/kg三水平加标平均回收率为78.6%~109.7%,相对标准偏差（RSD）为2.7%~9.0%。多起中毒事件中采集的不同野生菌毒素组成和含量差异大。结论 本方法操作简便、快速,结果准确,已应用于常见有毒野生菌中蘑菇毒素检测和中毒应急事件处置,可以为中毒病因的鉴定和患者的及时救治提供快速、准确的技术支持。     

LC-MS/MS测定牛奶中六种青霉素类抗生素残留

目的建立一种用LC-MS/MS快速测定牛奶中6种青霉素类抗生素残留的方法。方法选择青霉素G-D7为内标,样品经乙腈沉淀蛋白,SPE柱净化、浓缩,有效地去除杂质。经高效液相色谱C18柱分离,选用含0·1%甲酸的水和乙腈作流动相,在26min内,在线梯度洗脱将6种青霉素类抗生素得以分离。结果方法检出限为青霉素G0·02ng/ml、青霉素V0·06ng/ml、苯唑西林0·04ng/ml、氯唑西林0·11ng/ml、奈夫西林0·02ng/ml、双氯唑西林0·19ng/ml,在0·2~2·0ng/ml线性范围内,相关系数r为0·991,回收率大于90%,方法精密度为4·87%。结论该方法准确可靠,重复性好,灵敏度高。可适用于牛奶中多组分β-内酰胺类抗生素的确认和准确定量检测,能满足各国对上述β-内酰胺类抗生素的最低检出要求。     

超高效液相色谱检测奶及奶制品中的M族黄曲霉毒素

目的建立一种免疫亲和柱净化-超高效液相色谱法同时测定奶及奶制品中M族黄曲霉毒素的方法。方法以乙腈为提取剂和蛋白沉淀剂,采用涡旋混合及超声提取,免疫亲和柱净化。结果经Welch Ultimate XB-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)分离,应用大体积流通池荧光检测,流动相为水和乙腈/甲醇(1:1)。线性范围在0.01~5.00 ng/mL之间,线性系数均大于0.999,黄曲霉毒素M1、M2的检出限为0.003μg/kg。免疫亲和柱对黄曲霉毒素M1、M2的回收率均在80%以上,液态奶中添加0.05、0.2、1.0μg/kg的回收率在85.6%~106.4%之间,奶粉中添加0.5、2.0、10.0μg/kg的回收率在81.5%~93.4%之间。结论该方法可以适用于奶粉、液态奶中M族黄曲霉毒素检测。     

面粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准物质的研制

目的目前国内尚缺乏用于质量控制的镰刀菌毒素类生物标准物质,通过研制面粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇化合物的标准物质,期望填补该方面的空缺。方法选择满足JJG 1006—94《一级标准物质》候选物筛选原则和要求的面粉样品作为研制对象,经均质、分装、灭菌后,以同位素稀释-液相色谱-串联质谱法测定脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量,经均匀性和稳定性试验后,采用8家实验室联合定值的方法对面粉基质中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量进行定值及不确定度分析。结果随机抽取16袋样品作均匀性检验,分析结果经F检验,统计量FF_((α=0.05))的临界值,样品均匀性良好。在室温25℃放置一年、44℃放置14天后分别进行了检测,考察其稳定性,测试结果显示特征值在考察时间范围内无明显变化。采用同位素稀释-液相色谱-串联质谱法,与国内8家权威机构实验室进行协同定值,研制得到脱氧雪腐镰刀菌烯醇特征值为(2 366±187)μg/kg。结论本研究提出了面粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准物质的研制,为镰刀菌毒素类化合物检测提供质控参考和能力评价依据。