农杆菌介导的棉花茎尖遗传转化及转betA植株的产生

以棉花种子无菌苗裸露的茎尖分生组织为受体,采用农杆菌介导法进行转化。感染小苗经共培养后移栽入花盆,用选择剂除草剂筛选。然后对除草剂抗性植株进行分子检测,获得了转基因植株。通过不同菌液浓度、浸染时间、真空渗透处理和表面活性剂Silwet—L77、Tween80等使用的比较实验,优化了转化条件,提高了转化频率,最高转化率达13．23％。该技术体系避开了棉花组织和细胞培养过程,能高效获得转基因植株。采用该体系我们将胆碱脱氢酶基因betA和突变的乙酰乳酸合成酶基因als导入到3个棉花优良品种中,获得了抗除草剂氯磺隆和耐盐性提高的转基因植株及其子代。