莴苣1-FFT基因的克隆及其功能分析

利用反转录PCR技术和cDNA末端快速扩增(RACE)技术从莴苣中分离出1-FFT(果聚糖:果聚糖1-果糖基转移酶)候选全长cDNA,序列分析表明该基因的开放阅读框中具有β-果糖苷酶单元(蔗糖结合框)、RDP域和EC域三个活性中心域.Southern杂交分析表明该基因在莴苣基因组中以单拷贝形式存在.利用农杆菌介导的叶盘转化法将该基因转入无1-FFT基因的烟草细胞,获得了转基因植株.体外酶反应证实转基因叶片提取物中具有1-FFT活性,该基因编码1-FFT.     

甜菜丛生芽诱导及植株再生

以6个不同基因型的甜菜品种为试材,取其幼嫩叶柄、幼苗顶端生长点和幼嫩花序顶端切段做外植体,进行丛生芽诱导比较试验,试验结果表明,用花序切段作外植体产生丛生芽数量最多、速度最快,所有来自幼苗或生殖生长期植株的外植体产生的小苗均处于营养生长期,把这些快速生长的丛生芽分割成单芽继代培养能获得更多的丛生芽。     

农杆菌介导的棉花茎尖遗传转化及转betA植株的产生

以棉花种子无菌苗裸露的茎尖分生组织为受体,采用农杆菌介导法进行转化。感染小苗经共培养后移栽入花盆,用选择剂除草剂筛选。然后对除草剂抗性植株进行分子检测,获得了转基因植株。通过不同菌液浓度、浸染时间、真空渗透处理和表面活性剂Silwet—L77、Tween80等使用的比较实验,优化了转化条件,提高了转化频率,最高转化率达13．23％。该技术体系避开了棉花组织和细胞培养过程,能高效获得转基因植株。采用该体系我们将胆碱脱氢酶基因betA和突变的乙酰乳酸合成酶基因als导入到3个棉花优良品种中,获得了抗除草剂氯磺隆和耐盐性提高的转基因植株及其子代。     

利用生物信息数据库克隆玉米基因PIS2与MFSP全长

利用玉米表达序列标签数据库(dbEST)电子克隆了玉米基因PIS2的cDNA全长,并采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术得到了包含该基因完整开放阅读框(ORF)的cDNA序列;借助水稻非冗余核酸数据库联合应用电子克隆技术和RT-PCR技术克隆得到玉米主易化子超家族蛋白基因MFSP的cDNA全长,并进一步利用植物基因组数据库(PlantGDB)快速地获得了该基因的基因组全长序列.研究证实,充分利用分子生物信息数据库,可以简便地克隆得到玉米目的基因的cDNA乃至基因组全长序列.     

低温逆境中水稻幼苗质膜ATP酶和5′─核苷酸酶活性的变化

本文以氯化钾（ＣｅＣｌ＿３）沉淀的细胞化学方法，观察了水稻幼苗细胞在低温胁迫中质膜ＡＴＰ酶和５′－核苷酸酶活性的变化，得到的主要结果如下：（１）在适宜的生长温度（２８℃）下，水稻幼叶细胞内的ＡＴＰ酶主要定位于质膜，细胞间隙和胞间连丝等处，其中以质膜和细胞间隙处的酶活性最强；当幼苗经过１℃的低温处理后，质膜上的ＡＴＰ酶活性比适温生长时明显降低。（２）生长在适宜温度（２８℃）下的水稻幼苗，其细胞内的５－核苷酸酶活性专一性地定位于质膜和胞间连丝上，表现出很强的活性反应；幼苗在１℃低温处理２天后，其细胞内的５－核苷酸酶活性仍是严格定位于质膜及胞间连丝上，只是酶活性比低温处理前明显降低。这些结果进一步证明，质膜是低温伤害的最初部位。     

沿海甜菜的遗传转化和转基因耐盐植株的获得

以沿海甜菜丛生芽芽尖为转化受体,采用农杆菌介导法将来自大肠杆菌的编码胆碱脱氢酶的betA基因和来自拟南芥的突变的。瓜基因转入受体细胞,通过除草剂抗性筛选、耐盐性测定和外源基因的分子检测,获得了转基因耐盐植株。PCR阳性的抗除草剂的转化小芽在分别含有1．5％、2．0％、2．5％和3．0％NaCl的培养基上进行耐盐性检测,其存活率和生物量大幅度高于未转基因的对照小芽。将移栽成活的转基因植株用盐水浇灌,转基因植株表现出比对照明显提高的耐盐性。     

Effect of NdCl_3 on the Growth and i_PA Level of Detached Etiolated Cotyledons of Brasica Chinensis

ＥｆｅｃｔｏｆＮｄＣｌ３ｏｎｔｈｅＧｒｏｗｔｈａｎｄｉＰＡＬｅｖｅｌｏｆＤｅｔａｃｈｅｄＥｔｉｏｌａｔｅｄＣｏｔｙｌｅｄｏｎｓｏｆＢｒａｓｉｃａＣｈｉｎｅｎｓｉｓＣｈｅｎＫａｏｓｈａｎ（陈靠山），ＺｈａｎｇＪｕｒｅｎ（张举仁）（ＢｉｏｌｏｇｙＤｅｐ...