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1.
为提高Western Blotting结果的可靠性,以蛋白溶出率和凝胶电泳蛋白条带完整性为指标,比较提取液种类、研磨方式、酶抑制剂种类及其体积分数和提取时间对南美白对虾肝胰腺蛋白提取效果的影响。采用优化后的提取方法获得高质量蛋白样品,并采用Western Blotting法分析无水环境胁迫后南美白对虾肝胰腺组织中细胞凋亡信号通路相关蛋白的表达水平。结果表明:RIPA裂解液作为提取溶剂所得的蛋白溶出率高于水提和磷酸盐缓冲液,电动匀浆和液氮研磨所得蛋白条带更完整,4%蛋白酶磷酸酶混合抑制剂能有效抑制肝胰腺内源酶引起的蛋白降解;采用Western Blotting法分析无水保活期间南美白对虾肝胰腺蛋白,发现低温诱导休眠的同时会引起细胞轻微凋亡,且凋亡水平呈应激时间依赖性增加,环境胁迫解除后有所回调。 相似文献
2.
以3 mg/kg bw T-2毒素(T-2)对凡纳滨对虾肌肉注射染毒,于5,10,15,30,45,60,120,240,480,960min和1 440 min时间点采集血淋巴及肝胰腺,采用LC/MS-MS法测定对虾血淋巴中T-2浓度,并测定肝微粒体APND及ERND酶活性。使用代谢动力学3P97软件分析及使用Origin 8.5软件对肝微粒体代谢酶活性曲线拟合,探究T-2对凡纳滨对虾毒代动力学及对代谢酶的影响。结果表明,血淋巴中T-2浓度随时间的延长逐渐降低,其曲线拟合方程式为y=8.8+1587.8×0.96x,R~2=0.721;主要代谢动力学参数为k_(12):0.00 min~(-1);k_(21):9.66×10~(-2)min~(-1);k_(13):5.14×10~(-2)min~(-1);k_(31):1.41×10~(-3)min~(-1);k_(10):4.54×10~(-2)min~(-1);t_(1/2)π:7.10 min;t_(1/2)α:7.17 min;t_(1/2)β:1.06×10~3min;AUC:6.01×10~4ng·min/g;CL(s):5.00×10~(-5)g/min;VC:1.10×10~(-3)(mg/kg)/(ng/g)。对虾肝微粒体中ERND与APND代谢酶活性变化趋势符合毒物刺激效应模型,即在暴露T-2后迅速出现激活效应。经拟合曲线分析,与APND酶活相拟合的函数为Gauss,时间-反应拟合方程式为y=66.8(1-e~(-0.03x))_2~(-0).~(27),R~2=0.752;与ERND酶活相对反应度相拟合的函数为Chapman,时间-反应拟合方程式为:y=89.9+48e-2~((x-9.4)/32.5),R~2=0.995。 相似文献
3.
4.
采用Schaal烘箱法,以过氧化值和α-亚麻酸含量为指标,比较了3种脂溶性酚类及人工合成抗氧化剂对紫苏籽油的抗氧化效果。结果表明,当抗氧化剂添加量为100 mg/kg时,基于过氧化值的抗氧化效果为香芹酚百里香酚、丁香酚BHT、BHA。低添加量抗氧化剂(1~100 mg/kg)紫苏籽油中α-亚麻酸含量均高于不添加抗氧化剂的处理组。香芹酚的最适添加量为5 mg/kg,α-亚麻酸含量为6.399 mg/g,与4℃保存的紫苏籽油含量相近;BHT的最适添加量为50 mg/kg,α-亚麻酸含量为6.987 mg/g,高于4℃保存的紫苏籽油;分别添加100 mg/kg的香芹酚与100 mg/kg的BHT的紫苏籽油中α-亚麻酸含量相近,说明二者抗氧化能力相当。研究结果证实了香芹酚、百里香酚、丁香酚对紫苏籽油具有较好的抗氧化作用,为安全高效的天然酚类抗氧化剂的筛选及其在油脂食品中的应用提供理论参考。 相似文献
5.
6.
为了获得对产毒镰孢菌具有抑制效应的海洋细菌,从对虾肠道中分离细菌,并将分离得到的优势细菌与产T-2毒素的禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)(FG1207)进行固体对峙培养,具有抑菌圈的细菌菌落即为产毒镰孢菌的抑制菌。然后选取对FG1207具有抑制作用的细菌与FG1207进行液体共同培养,用LC-MS/MS技术检测菌悬液中T-2毒素含量,最后对具有抑制FG1207的生长和降解T-2毒素效果的细菌进行16s r RNA序列鉴定和VITEK2细菌生化鉴定。实验结果分离得到8株优势细菌,其中一株对FG1207的生长具有明显的抑制作用;LC-MS/MS检测发现该细菌与FG1207共同培养菌悬液中未检测到T-2毒素,说明该细菌不仅能够抑制产毒镰孢菌的生长,还能降解T-2毒素。经16s r RNA鉴定该细菌为海洋尼泊尔葡萄球菌(Nepal Staphylococcus Aureus),相似度为99.93%,VITEK2细菌生化鉴定的相似度为96.86%。 相似文献
7.
植物内生菌抗菌活性物质研究进展 总被引:33,自引:0,他引:33
讨论了利用植物内生菌作为抗菌活性物质重要来源的基本机制 ,简要介绍了内生菌产生抗菌活性物质的研究进展 ,同时提出了利用内生菌筛选抗菌活性物质的策略。 相似文献
8.
为探明冷藏对虾黑变规律,研究了南美白对虾在为期10 d的冷藏过程中黑变与丝氨酸蛋白酶(serine protease,SP)的活性变化及其相关性。结果表明,南美白对虾感官黑变呈现出先慢后快的特征,前2 d基本无变化,第3 d时变化开始加快,第5 d变化最为显著,第6至第10 d黑变速率差异不显著,第4 d是黑变防控的关键期。进一步定量分析表明对虾不同部位的黑变速率存在显著差异,冷藏至第4 d时头部、腹部和尾部间的明度L值差异开始明显,第5 d时三者之间达到显著性差异(P0.05);统计分析表明对虾冷藏过程中不同部位SP活力与黑变存在显著相关性,头部组织对对SP活力变化最为敏感,其斜率k为0.0312,明显大于尾部的0.0271和腹部的0.0128,是黑变调控的关键部位。本研究证明在冷藏南美白对虾体内也存在酚氧化酶激活系统,SP活力水平同样对酚氧化酶原的激活水平起重要调控作用,其规律和机制有待深入研究。 相似文献
9.
介绍了一种多路混合信号光纤传输系统。该系统采用单片机完成信号采集、正理3和传输,大大简人了硬件电路、缩小了产品体积,提高了系统的可靠性。 相似文献
10.