HIV-2 env基因在重组痘苗病毒中的表达

以痘苗病毒复制非必需区血凝素（ＨＡ）基因为侧翼，将人Ⅱ型免疫缺陷病毒ｇｐ１２０和ｇｐ３６基因分别置于不同类型的自然型痘苗病毒复合启动子下游，构建了４种表达质粒，经同源重组和血凝素阴性空斑筛选，获得了４株重组痘苗病毒，经免疫荧光试验和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测证明，４株重组病毒均能表达目的蛋白。在重组病毒感染早期、晚期、不同株表达量略有不同，表达产物分子量分别约为５７ｋＤａ和４２ｋＤａ，具有良好的     

重组传染性法氏囊病病毒VP2/VP243基因表达及保护性和免疫原性

目的在重组鸡痘病毒中表达传染性法氏囊病毒 VP2/VP243基因,并研究表达产物的保护性和免 疫原性。方法以 FPV 282E_4株 TK基因为侧翼,分别将鸡法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV) VP2 和VP243目的基因克隆到牛痘病毒A型包涵体(ATI)和痘苗病毒P7.5复合型启动子下游,构建成2个重组表达质 粒,命名为pUTALacVP和pUTA LacVPO。用这2个质粒转染CEF细胞,用X-gal染色法筛选出2株重组病毒vUTA lacVP2和 vUTALacVP0。用这 2株病毒免疫 1周龄 SPF鸡,以常规疫苗为对照。结果 ELISA、SDS-PAGE和 Western blot表明表达产物可与IBDV特异性多克隆抗体反应,并诱导鸡保护性抗体。在使用vvIBDV攻击前,对照组抗体水 平显著高于实验组。但攻击5 d后,实验组抗体水平明显升高。结论vUTALacVP2和 VPO在 CEF细胞中实现了高 效表达,但重组疫苗的保护率低于常规疫苗。