下游酪氨酸激酶7在肿瘤发生发展过程中的作用

长期以来下游酪氨酸激酶7(Downstream of tyrosine kinase 7,DOK7)一直被认为与先天性肌无力综合症(Congential myasthenic syndrome,CMS)息息相关,但是近些年的研究表明DOK7还与一些肿瘤表型有着密切的联系,有可能成为特定的肿瘤标志物,而目前在肿瘤领域中与DOK7相关的研究报道还比较少,值得对其进行深入探讨。本文整理了近几年来有关于DOK7与肿瘤发生发展的关联文献并加以总结,为后续研究提供可能的思路与肿瘤治疗策略,同时对DOK7基因的研究具有一定的现实指导意义。     

三氯乙酸终止液对木瓜蛋白酶酶活测定的影响研究

本实验研究了不同的三氯乙酸终止液,对木瓜蛋白酶酶活的影响。通过使用两种检测方法,不同配方的三氯乙酸终止液进行实验。结果表明,使用两种不同配方的三氯乙酸终止液所得的结果相差2倍多。用不同稀释浓度的三氯乙酸终止液,在高浓度时,不同浓度的三氯乙酸终止液得到的结果差别很大,随着三氯乙酸浓度的降低,所测得的酶活不断升高;但是在低浓度时,不同浓度的三氯乙酸终止液得到的结果差别不大。     

L-酪氨酸的消旋研究

L-酪氨酸的消旋是提高DL-酪氨酸拆分过程收率的重要手段.研究发现,L-酪氨酸在乙酸酐的作用下,分别在碱性水溶液和纯乙酸溶剂中都可实现100%消旋过程.今讨论了在碱性水溶液中,L-酪氨酸、乙酸酐和NaOH三者摩尔比例对消旋过程的影响和在纯乙酸溶剂中,乙酸用量和L-酪氨酸与乙酸酐的摩尔比例与消旋温度对消旋过程的影响.结果表明在乙酸酐的作用下,L-酪氨酸在纯乙酸溶剂中的消旋具有消旋速度快,DL-酪氨酸收率高的优点.合适的消旋条件为:消旋温度80～90 ℃,乙酸酐和L-酪氨酸的摩尔比为2∶1,溶剂醋酸的用量为5mL·g-1(L-酪氨酸),在此条件下经4 h即可实现L-酪氨酸100%的消旋,产品收率90%.     

微生物转化法合成L-酪氨酸

以对羟基苯甲醛、海因、氢氧化钠为原料 ,化学合成底物对羟基苯丙酮酸。采用来自大肠杆菌的天冬氨酸转氨酶对对羟基苯丙酮酸进行生物转化 ,并对转化条件进行了初步的研究 ,最终得到L-酪氨酸 ,转化率 75 %。     

芴甲氧羰基酪氨酸苄醚的合成研究

研究了硫酸铜存在下溴苄与酪氨酸反应生成酪氨酸苄醚,收率45%。反应中,铜盐先与酪氨酸的羧基作用,生成4∶1的酪氨酸铜配合物,从而有效地保护了酪氨酸的羧基,使苄基化反应选择性地发生在侧链酚基氧原子上。酪氨酸苄醚与芴甲氧羰酰氯在THF中反应得标题化合物,收率98%。     

Effect of puerarin on the P13K pathway for glucose transportation and insulin signal transduction in adipocytes

To explore the effect of puerarin on insulin receptor (IR), insulin receptor substrate-1 (IRS-1) and protein expression of protein kinase B(PKB) in the P13K pathway of the glucose consumption, transportation and insulin signal transduction in 3T3-L1 adipocytes with insulin resistance. The insulin resistance 3T3-L1 adipocytes model was established by free fatty acid induction. The model cells were managed with puerarin in different concentrations. Glucose consumption was detected with glucose oxidase method, glucose transportation rate was determined by 2-deoxy-3H glucose ingesting method, and the IR, IRS-1 and PKB expression were determined by Western blot. Glucose consumption and transportation were significantly decreased in the model adipocytes, but increased after treated with puerarin (P<0.01). Moreover, the level of tyrosine phosphorylation of IR subunit β was higher in the puerarin treated groups, and that of IRS-1 was higher in the group treated with low dose puerarin than that in the model group. The 3T3-L1 adipocytes of insulin resistance model could be induced by free fatty acid successfully, puerarin could promote the glucose utilization in them to alleviate the insulin resistance, which may be related with the action in advancing the tyrosine phosphorylation of IR and IRS-1.     

生物拆分制备(S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸工艺研究

耐酪氨酸冢村氏菌(Tsukamurella tyrosinosolvens)E105可选择性催化(R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸乙酯生物拆分制备左乙拉西坦关键手性中间体(S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸.通过单因素实验和响应面法对菌株产酶培养条件进行优化,并考察含酶静息细胞催化制备(S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸的反应过程.结果表明:最优产酶培养条件为装液量30%,接种量4%,发酵36h;培养基组成为葡萄糖17.70g/L,酵母膏16.53g/L,NH4Cl 9.5g/L,K2HPO42g/L,KH2PO41g/L,NaCl 0.6g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,初始pH值7.32.在优化条件下,酶活力为19.33U/g,细胞干重达4.13g/L,分别较优化前提高了32.6%和60.1%.当细胞加量为30g/L,底物浓度60mmol/L,反应体系为300mL,拆分24h后,产率和ee值分别为48%和99%,(S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸浓度达28.8mmol/L,较优化前提高了32.1%.     

作用于酪氨酸激酶的抗肿瘤小分子抑制剂γ-氟代Goniothalamin类似物的设计与合成

蛋白酪氨酸激酶在肿瘤细胞的增殖、分化、转移、侵蚀等信号通路中具有重要的调控功能,已成为肿瘤靶向治疗的重点研究对象。基于靶点导向原则和构效关系研究基础,以抗肿瘤活性天然产物Goniothalamin为母体化合物,修饰合成了一系列γ,γ-二氟取代Goniothalamin类似物（4a-4i,6a-6i）和γ-单氟取代Goniothalamin类似物（7a,7b,7h）。γ,γ-二氟取代的Goniothalamin类似物可从具有光学活性的二氟亚甲基取代的锡试剂出发,经Stille偶联和1,5-氧化关环两步关键反应合成。γ-单氟取代Goniothalamin类似物则经Sharpless不对称环氧化、环氧开环亲核氟化、Lindlar氢化、HWE反应和1,5-氧化关环等反应制备。对所合成的这两类Goniothalamin含氟类似物进行了体外肿瘤细胞抑制活性和酪氨酸激酶抑制活性评估研究,结果表明在Goniothalamin分子的γ位引入一个氟原子进行修饰是较为合理的修饰方式。     

二硫化碳氢化性自由基对生物靶分子损伤机理研究

利用脉冲辐解技术研究了二硫化碳（CS2）被氧化生成的阳离子自由基，以时间分辨瞬态吸收光谱方法获取CS2阳离子自由基的特征吸收谱。同时，研究了CS2阳离子自由基损伤生物靶分子的机理，测定了相关的反应动力学常数。结果发现，CS2阳离子自由基能与DNA、dGMP、酪氨酸和色氨酸反应产生新的产物，在CS2对生物靶分子的氧化损伤中可能起着重要的作用。