低温脂肪酶产生菌的筛选、鉴定及其部分酶学性质

从南极乔治王岛冻土来源的76株低温细菌中筛选到13株低温脂肪酶产生菌，对其中的BTsl0022菌株进行鉴定。通过生理生化特征、16s rDNA基因序列的同源性和系统发育分析发现，菌株RTsl0022属于假单胞菌属(Pseudomonas)，但与已定名的假单胞菌有一定的差异，与未定名的Pseudomonas sp．PsB的亲缘关系最接近，故将其暂定名为Pseudomonas sp．BTsl0022。对该菌脂肪酶的酶学性质初步研究表明，酶的最适作用温度为24℃，对热敏感，60℃处理30min仅残留25％酶活性，酶的适宜作用pH范围在7．0～9．0，最适pH为8．0。     

花生种子萌发过程中蛋白酶、脂肪酶及SOD、CAT酶活性变化

以鲁花11号为试验材料研究了花生种子不同萌芽时期,予叶、胚轴、真叶三部位的可溶性蛋白质含量及脂肪酶、CAT、SOD活性.结果表明,花生种子萌发过程中,子叶中的可溶性蛋白质含量在萌发前期较稳定地保持较高水平,第7期陡然升高,但随后又直线下降;下胚轴和真叶中的可溶性蛋白质含量都比较低,各时期之间的绝对变动幅度不大.蛋白酶活性,子叶最低,胚轴居中,真叶最高;子叶蛋白酶活性变化较平缓;胚轴中初期较高,第4期以后基本处于相对稳定状态;随真叶的不断长大,蛋白酶活性逐渐下降.胚轴中的SOD活性相对稳定;真叶和子叶SOD活性变化活跃,出现高-低-高-低波动变化;但总体上各部位、各时期保持较高的SOD活性.胚轴中CAT活性初期较高,中后期低而相对稳定;子叶和真叶CAT活性总体上相对稳定,并保持较高活性.脂肪酶活性子叶保持较高活性,而真叶和胚轴活性较低.     

γ-癸内酯的酶法拆分研究

研究了脂肪酶对γ-癸内酯(GDL)对映催化选择性水解反应,考察了各种因素对酶促水解拆分过程的影响。试验结果表明,水解产物-大量的酸会抑制脂肪酶的活性,采用高浓度的磷酸盐缓冲液可有效地稳定系统的酸碱度,使酶促反应顺利进行。在磷酸缓冲溶液体系中缓冲液pH=7.8,底物浓度为0.6mol/L,反应时间2.5小时,反应温度43℃为γ-癸内酯酶促水解拆分的最佳工艺条件。     

油脂脱臭馏出物富集VE的预处理研究概述

对脱臭馏出物的性状、组成及开发前景进行了介绍,重点对脱臭馏出物的甲酯化预处理特别是酶法预处理进行了阐述,最后列举了VE提取的实例。     

酶促合成生物柴油反应动力学

以Candidasp.99-125脂肪酶为催化剂,甘油三油酸酯和甲醇为底物,采用有序机制模型对酶促合成生物柴油的酯交换反应动力学进行了研究,并与经典乒乓机制模型进行了比较。研究结果表明,反应初速率的实验值与有序机制模型方程的计算值吻合很好。对于固定化Candidasp.99-125脂肪酶催化合成生物柴油的酯交换反应机理进行研究,采用有序机制模型比经典乒乓机制模型更为精确。反应过程中,醇抑制为竞争性抑制,在甘油三油酸酯浓度较小的范围内,醇抑制作用较为显著,醇浓度越低反应初速率越快。该有序机制模型可用来预测生物柴油的生产批次或连续反应器中酯交换反应的速率,确定最佳底物油脂和醇的浓度。     

己酸乙酯酯化菌及酶学研究新进展

本文概述了针对浓香型固态白酒发酵周期长、优质品率低，液态白酒存在“两低、一高”这一老大难问题，为解决这一难题，中科院成都生物研究所“名酒研究组近１０年来步入研究酯化功能菌、酯化酶的基础研究和应用研究，近期开发出高效优质生产浓香型酒的酶工程新技术，经国内南北方生产上的典型性试验观察，证明能大幅度提高优质品率和缩短发酵周期，从而结束了浓香型酒优质品率低的历史。     

脂肪酶不对称立体选择性能改善的研究进展

脂肪酶已广泛用于制备光学纯手性化合物的不对称反应中，但大多数酶催化拆分外消旋化合物的立体选择性不很理想. 目前，改善脂肪酶立体选择性的研究主要从改造脂肪酶酶蛋白结构、优化体系的反应条件、改善反应过程以及对映选择性抑制等方面进行. 通过微波照射也能在一定程度上改善脂肪酶催化反应的立体选择性. 本文主要介绍了几种改善脂肪酶催化不对称反应的立体选择性的方法.     

脂肪酶稳定性研究

研究了淀粉、粗纤维、糖、金属离子、醇、盐类对脂肪酶稳定性的影响.结果表明:从粗酶中分离出来的淀粉和粗纤维再加入到纯酶中,酶稳定性有所下降;从粗酶中分离出来的总糖和金属离子(以金属化合物形式)再加入到纯酶中,对酶稳定性的影响不大;外加一定浓度的氯化钾、四硼酸钠、丁二酸钠、山梨糖、丙三醇均可延长脂肪酶的热稳定性半衰期,而以山梨糖和丙三醇混合使用效果最好,在35℃下可延长脂肪酶的热稳定性半衰期256.8 h.     

脂肪酶和醇腈酶在有机合成中的应用

有机相酶催化反应常用于高附加值产品的合成。脂肪酶是有机合成中一种重要的工具酶，可以催化酯交换反应。脂肪酶催化的酯的氨解反应已经用于手性酰胺的合成，烷氧羰基化也广泛应用于一些天然化合物的化学选择性修饰。以前在有机合成中很少实用的裂合酶如(R)-醇腈酶在合成具有旋光性的氰醇中的应用也开始引起人们的关注。     

响应面优化褶皱假丝酵母脂肪酶催化合成木质甾醇油酸酯

以木质甾醇转化率为指标,考察了10种常见商业化脂肪酶催化合成木质甾醇油酸酯的效果,确定褶皱假丝酵母脂肪酶(CRL)为优选生物催化剂,进一步筛选出正己烷为优选反应介质.在脂肪酶用量、油酸和木质甾醇的物质的量比、反应温度和反应时间这4个单因素考察基础上,通过响应面分析法对酶催化木质甾醇油酸酯合成工艺条件进行优化,并对优化条件进行验证和放大实验.CRL催化合成木质甾醇油酸酯的优化工艺参数为:CRL添加量为木质甾醇质量的10％,油酸与木质甾醇的物质的量比为3.8:1,反应温度为46℃,反应时间为28 h,木质甾醇的转化率为91.56％±0.25％.