| 黑曲霉中葡萄糖氧化酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达 |
| |
| 引用本文： | 刘虎军,罗玮,范新蕾,余晓斌.黑曲霉中葡萄糖氧化酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[J].食品与生物技术学报,2013,32(6):615-621. |
| |
| 作者姓名： | 刘虎军 罗玮 范新蕾 余晓斌 |
| |
| 作者单位： | 江南大学生物工程学院 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(21176105);中央高校基本科研业务费专项资金项目(JUSRP111A24) |
| |
| 摘 要： | 为了提高葡萄糖氧化酶的生产能力,提取和纯化了黑曲霉Aspergillus niger PCTC的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增获得葡萄糖氧化酶基因,经测序,所得基因全长1 772 bp,编码含有589个氨基酸的蛋白质。将目的基因和表达载体pPIC9K连接经电转化导入毕赤酵母GS115中,在甲醇诱导和α信号肽的转运下,将葡萄糖氧化酶分泌到胞外。经G418梯度抗性平板和显色平板的初筛以及摇床复筛,获得了一株产葡萄糖氧化酶活力较高的菌株,该株菌在30℃、180 r/min的培养条件下,经0.5%的甲醇诱导发酵4 d可获得0.342 U/mL的酶活。对该菌株进行了摇瓶产酶条件优化,其最佳发酵条件为:200 r/min、pH 5、接种体积分数50%、25℃下经1.5%甲醇诱导7 d,酶活达到25 U/mL。实验结果表明:葡萄糖氧化酶基因已经成功转入毕赤酵母,并获得相当的产量。
|
| 关 键 词： | 葡萄糖氧化酶 黑曲霉 异源表达 甲醇毕赤酵母 |
Cloning and Heterologous Expression of Glucose Oxidase Gene from Aspergillus niger PCTC in Pichia pastoris |
| |
| LIU Hu-jun,LUO Wei,FAN Xin-lei and YU Xiao-bin.Cloning and Heterologous Expression of Glucose Oxidase Gene from Aspergillus niger PCTC in Pichia pastoris[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2013,32(6):615-621. |
| |
| Authors: | LIU Hu-jun LUO Wei FAN Xin-lei and YU Xiao-bin |
| |
| Affiliation: | LIU Hu-jun;LUO Wei;FAN Xin-lei;YU Xiao-bin;School of Biotechnology,Jiangnan University; |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《食品与生物技术学报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《食品与生物技术学报》下载全文 |
|
