Box-Behnken响应面优化大豆7S球蛋白含促溶剂的反胶束提取工艺

本试验选取蔗糖和三氯蔗糖作为反胶束提取大豆7S球蛋白的促溶剂,以大豆7S球蛋白为研究对象,通过单因素试验,运用Box-Behnken响应面进行优化试验设计,研究了含有促溶剂的反胶束体系提取大豆7S球蛋白的最佳前萃和后萃条件。结果表明：蔗糖浓度0.04 mol/L、W0为22、pH为8.7、电解质浓度0.2 mol/L、萃取温度55 ℃、萃取时间50 min、固液比为1.5 g/L的条件下,蛋白前萃率最高为83.21%;电解质浓度0.8 mol/L、pH为12.0、萃取温度55 ℃、萃取时间20 min的条件下,蛋白后萃率最高为90.5%;最终蛋白总萃取率为75.31%;SDS-凝胶电泳图显示经含促溶剂的反胶束纯化后大豆7S球蛋白不仅纯度得到了提高,而且蛋白分子的亚基折叠结构也得到恢复。结论：促溶剂的添加可以显著提高反胶束的蛋白萃取率,而且还可以维持7S球蛋白亚基的正常结构。     

不同制备方法对7S和11S球蛋白结构与功能特性的影响

本文采用超声辅助反胶束体系萃取7S、11S的同时,对其功能特性进行了研究;并与传统方法制备的7S和11S球蛋白的结构和特性进行了对照试验。研究表明：超声辅助反胶束体系萃取的蛋白,蛋白含量较高,色泽为纯白色,且该蛋白的持水性、起泡性及起泡稳定性、乳化性及乳化稳定性、溶解性等功能特性均优于传统的制备方法。并利用扫描电镜对4种蛋白的微观结构进行了表征,发现4种蛋白的微观结构有明显的差异。说明制备方法对蛋白的功能特性有一定的影响。     

制备方法对大豆7S和11S球蛋白的结构和热稳定性影响

大豆蛋白的主要组分是β-伴大豆球蛋白(7S)和大豆球蛋白(11S),加工方法不同将会对其结构与热稳定性产生重要的影响。文章采用扫描电镜(SEM)、X-射线衍射(XRD)、傅里叶红外光谱(FTIR)、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及差示热量扫描仪(DSC)等方法对比研究了等电点沉淀法和等电点沉淀结合含促溶剂的反胶束法制备的大豆7S和11S球蛋白结构和热稳定性。结果表明,SEM图像显示2种提取方法制备的7S和11S球蛋白的整体微观结构及蛋白表面都存在显著差异(P<0.05);XRD检测发现2种方法制备的球蛋白骨架结构无显著差异(P>0.05),但含促溶剂的反胶束法可以修饰蛋白的无定形结构;FTIR分析发现含促溶剂的反胶束制备蛋白中β-转角含量较高,β-折叠含量较少;SDS-PAGE图谱显示含促溶剂的反胶束法更能保护蛋白分子的亚基结构,蛋白的纯度也更高;DSC结果展示含促溶剂的反胶束法制备的7S和11S球蛋白的热变性温度显著高于等电点沉淀法(P<0.05)。以上结果表明,等电点沉淀结合含促溶剂的反胶束法改变了7S和11S球蛋白结构和热稳定性,提取效果...     

大豆7S与11S球蛋白分离方法的研究

文章就提取分离低温脱脂大豆粕中大豆7S和11S球蛋白的方法进行了研究.利用SDS-PAGE凝胶电泳来评定不同pH值对分离大豆7S球蛋白和大豆11S球蛋白的纯度的影响.实验结果表明,浸提大豆蛋白的最佳工艺参数为磷酸盐缓冲液浓度为0.02 mol/L、料液比1∶16、浸泡温度45 ℃、pH值为8.5,可得到最高浸提率为89.55%.分离大豆11S球蛋白的最适pH值为6.2,纯度达75.76%;分离大豆7S球蛋白的最适pH值为4.7,纯度达72.99%.     

大豆11S球蛋白提取分离方法研究

以11S球蛋白粗提物中蛋白质含量和纯度为评价指标,比较了Nagano法、Saio法与Thanh法提取分离大豆11S球蛋白的效果,并对Thanh法提取分离大豆11S球蛋白的工艺参数进行了优化。结果表明,Thanh法提取分离大豆11S球蛋白效果较好,Tris-HC l缓冲液是适宜的提取液,最优提取工艺条件为提取时间2h、料液比1∶20、提取温度25℃。     

反胶束法提取核桃粕中蛋白的前萃工艺研究

研究了AOT/正己烷反胶束体系萃取脱脂核桃蛋白的前萃工艺,第1步正交试验,研究了含水量、KCl浓度和pH值对反胶束前萃取核桃蛋白的影响;第2步正交试验,研究了原料粒度、提取时间和料液比对核桃蛋白前萃率的影响。通过2步正交试验,对反胶束体系提取条件进行了优化,得出最优萃取条件为:含水量为20、KCl浓度0.1 mol/L、pH值8.0的反胶束体系,原料粒度80目、提取时间90 min和料液比1∶30,蛋白提取率68.7%,与传统提取方法即碱提酸沉法相比,提取率较高。     

两种反胶束体系制备大豆蛋白的比较

对AOT/异辛烷和CAB/正庚烷-正己醇两种反胶束体系提取的大豆蛋白进行电泳分析和DSC分析.结果表明,市售大豆分离蛋白与反胶束萃取的大豆蛋白所含的亚基比例有明显的差别;随着反胶柬含水量W0值的减小,反胶束萃取较大大豆蛋白质亚基比例明显减少.DSC分析表明,反胶束体系"水池"的极性越大,萃取的大豆蛋白的二级结构破坏程度越大.     

大豆7S球蛋白和11S球蛋白的研究

主要阐述了大豆7S球蛋白和11S球蛋白的分离富集方法及其主要特性。     

纳米SiO2与尿素修饰大豆7S与11S球蛋白胶黏特性的研究

以大豆7S和11S球蛋白为研究对象,采用纳米二氧化硅(SiO2)对其进行分子修饰,添加量分别为蛋白基料的0.5%、1.0%、1.5%,然后用1、3、5 mol/L尿素控制变性相结合的方法来提高7S与11S球蛋白在3种木材(水曲柳、樱桃木、松木)上的胶黏强度。结果表明,经纳米SiO2修饰后,大豆7S和11S球蛋白的胶黏强度明显增大,最佳添加量为1%;当浓度为1 mol/L的尿素与1%的纳米SiO2共同修饰7S和11S球蛋白后,其胶黏强度最大。同时采用差示扫描量热仪测定了大豆球蛋白修饰前后的焓变,并探讨了胶黏作用增强的可能机理。     

大豆7S球蛋白脱敏后功能特性研究

大豆蛋白拥有各种功能特性且广泛用于食品加工中,但大豆蛋白也是主要的致敏原。本文主要对脱敏后大豆7S球蛋白的乳化性、起泡性、表面疏水性和溶解性进行研究,并与脱敏前的大豆7S球蛋白、大豆11S球蛋白以及大豆分离蛋白的功能特性进行比较,结果显示。脱敏后的7S球蛋白溶解性增加。乳化性与大豆分离蛋白相当。起泡性和泡沫稳定性降低。     

Effects of AOT reverse micelle on properties of soy globulins

This study was focused on the influence of AOT reverse micelle on physical–chemical properties of 7S and 11S globulins from soy proteins, and compared with aqueous buffer extraction. The results showed that the contents of the surface hydrophobicity and SH groups of 7S and 11S globulins and SS bonds of 11S globulin, using AOT reverse micelle extraction, were augmented, and SS bonds of 7S globulin decreased. The thermal and rheological properties of 7S and 11S globulins extracted using the two methods were studied by differential scanning calorimetry (DSC) and rheometery. It was found that the peak denaturation temperature and heat of transition of 7S and 11S globulins with aqueous buffer extraction were different from that with AOT reverse micellar extraction. The AOT reverse micelle did not affect the gel properties of 11S globulin, while it influenced 7S globulin’s. Hardness, springiness, gumminess, adhesiveness and chewiness of 7S globulin from AOT reverse micelle were lower than that from aqueous buffer extraction, but gumminess was higher.     

Extraction and physicochemical properties of soya bean protein and oil by a new reverse micelle system compared with other extraction methods

Reverse micelle extraction is a novel technology for the separation of plant components such as proteins and oil. In this study, sodium bis(2‐ethylhexyl) sulphosuccinate (AOT) reverse micelle system and AOT/Tween 85 reverse micelle system were used to extract soya bean protein and oil from soya bean flour. The physicochemical properties of the protein and oil extracted were investigated and compared with traditional extraction methods. The results showed that the efficiency of forward extraction of soya bean protein using an AOT/Tween 85 reverse micelle system was superior to that using an AOT reverse micelle system at the optimal extraction conditions. In addition, soya bean proteins extracted using reverse micelle extraction had no unordered structure under Fourier transform infrared spectroscopy. The acid and peroxide values of oil products from two reverse micelle extractions were lower than that from immersion. The results indicated that AOT/Tween 85 reverse micelle system is effective in extracting soya bean protein and oil.     

AOT反胶束体系萃取大豆蛋白质的研究

研究了AOT反胶束萃取大豆蛋白的工艺,针对影响AOT反胶束萃取大豆蛋白质的各种因素如反胶束直径、缓冲溶液pH值、离子强度、温度、萃取时间进行了研究,得出主要的影响因素为反胶束直径、缓冲溶液pH值和离子强度,并得到最佳的萃取条件为:反胶束直径为4.9nm,此时的Wo值为15.8;pH值为6.5;离子强度为0.1mol/L;萃取温度为45℃;萃取时间为20min。在此条件下蛋白质的萃取率为82.57%。     

不同反胶束体系后萃取花生蛋白质的比较

对AOT[二-(2-乙基己基)琥珀酸酯磺酸钠]/异辛烷,SDS(十二烷基硫酸钠)/异辛烷-正辛醇,DTAC(十二烷基三甲基氯化铵)/正庚烷-正己醇3种反胶束体系萃取花生蛋白质的后萃工艺进行研究.主要研究了缓冲溶液pH值、萃取时间、萃取温度、超声功率、KCl浓度对花生蛋白后萃率的影响,分别得到了3种反胶束体系萃取花生蛋白质的最佳后萃工艺条件,并做验证试验.在最优工艺条件下制备不同的花生蛋白样品.通过色差分析,从宏观上比较不同反胶束体系制备的花生蛋白产品色泽的差异,进一步对比不同反胶束体系制备的花生蛋白的扫描电镜(SEM)照片,分析其微观结构的差别,试验结果表明最适合萃取花生蛋白的反胶束体系是AOT反胶束体系,且该体系萃取花生蛋白的后萃率为83.17％,较另外2种体系的后萃率都高.     

Effect of reverse micelle on conformation of soy globulins: A Raman study

Raman spectroscopy was applied to investigate the main and side chain conformational changes of 7S and 11S globulins from soybean proteins using aqueous buffer and reverse micelle extraction. The 7S and 11S globulins using two extraction methods displayed typical spectral features (such as amide I, III region and the side chain conformations of particular residues) due to characteristic amino acid composition and molecular conformation. In comparison, the degree of molecular disorder increased in both globulins using reverse micelle extraction and new bands appeared. The relative amount of different structures of 7S and 11S globulins could be estimated through accurate measurement of the band intensities. Finally, the increase of the I_850/830 intensity ratio of Raman tyrosine doublet in 11S globulin with reverse micelle extraction suggested a change towards a more exposed state of tyrosine residues, in good agreement with the more disordered conformation taken upon reverse micelle.     

酶解辅助反胶束法萃取小麦胚芽蛋白的研究

采用由AOT(琥珀酸二(2-乙基己基)酯磺酸钠)-异辛烷-KCl缓冲液组成的反胶束体系,联合酶解技术提取小麦胚芽蛋白。探索了酶与底物浓度比、时间、缓冲液pH、温度四个因素对蛋白质前萃率的影响。结果表明:酶解辅助反胶束萃取蛋白是可行的,可以显著提高前萃率,最佳酶与底物浓度比为0.23AU/gPro、时间8h、缓冲液pH8.10、温度60℃。     

反胶束萃取大豆油脂及其与浸出法的比较研究

采用超声辅助2种反胶束体系萃取大豆油脂,分析超声波技术影响反胶束萃取大豆油脂的主要因素,并分析所得油脂的品质与之浸出法进行了对比.经试验研究得到,最佳的工艺条件为超声时间lh、超声温度60℃、超声功率300 W、全脂豆粉加入量为0.04 g/mL;2种不同反胶束体系萃取大豆油脂的萃取率差别不大,AOT反胶束法的前萃率为81.39％,AOT-Tween85反胶束法的前萃率为84.17％.反胶束萃取得到的油脂,酸价及过氧化值比浸出法要低;浸出法、AOT反胶束法、AOT-Tween85反胶束法3种方法提取的大豆油脂脂肪酸组成和含量基本相同,色泽、皂化值也基本相同,碘值稍有差异.     

反胶束法提取花生蛋白后萃工艺的优化

以琥珀酸二(2-乙基己基)酯磺酸钠(AOT)-异辛烷-氯化钾缓冲溶液为前萃体系,对从前萃体系中提取花生蛋白的后萃工艺条件进行了研究。考察了后萃时间、后萃温度、缓冲液pH、KCl浓度对花生蛋白后萃率的影响,并在单因素试验基础上,通过正交试验确定后萃最佳工艺条件为:后萃时间50 min,后萃温度40℃,缓冲液pH9.0,KCl浓度1.0 mol/L。在此最佳工艺条件下,花生蛋白后萃率达到86.49%。     

反胶束提取小麦胚芽蛋白的工艺研究

以副产品小麦胚芽为原料,用反胶束法研究了小麦胚芽蛋白的提取条件,包括前萃和后萃。前萃由琥珀酸二(2-乙基己基)酯璜酸钠(AOT)-异辛烷-氯化钾缓冲溶液组成的反胶束体系从小麦胚芽中提取蛋白;后萃先回收异辛烷,少量KCl的缓冲溶液溶解剩余的固形物,最后用丙酮沉淀得小麦胚芽蛋白。通过单因素实验,考查了AOT浓度、萃取时间、加入小麦胚芽粉量、温度、KCl浓度、缓冲溶液pH、W/O对小麦胚芽蛋白前萃率的影响以及KCI浓度、缓冲液pH、缓冲液加入量对小麦胚芽蛋白后萃率的影响。     

FTIR spectroscopic characterization of soy proteins obtained through AOT reverse micelles

Fourier transform infrared (FTIR) method was used to study the conformations of soy protein obtained through aqueous solution and bis(2-ethylhexyl) sodium sulfosuccinate (AOT) reverse micelle extraction. The results showed that there were changes in signal intensity and/or position of IR bands at 4000–400 cm⁻¹ when the soy proteins were separated by two extraction methods. The FTIR spectral changes were subsequently assessed using the second derivative spectroscopy in the amide I region (1700–1600 cm⁻¹). The contents of α-helix, β-sheet, turn and irregular conformations for soy proteins using aqueous solution extraction were 11.6%, 32.8%, 44.3% and 11.3%, respectively; while using AOT reverse micelle extraction 13.1%, 41.6%, 32.5% and 12.9%, respectively. The amount change of these structures might affect functional properties of soy proteins.