中华真地鳖酶解短肽的抗氧化作用

目的：研究中华真地鳖酶解短肽的体内外抗氧化作用。方法：测定中华真地鳖酶解短肽体外对?OH、O2－?和DPPH自由基的清除作用;并将中华真地鳖酶解短肽灌胃,颈背部皮下注射D-半乳糖致衰老模型小鼠,以小鼠血浆和肝脏中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(T-SOD)及清除?OH活性为指标,研究其体内抗氧化活性。结果：中华真地鳖酶解短肽对?OH、O2－?和DPPH自由基有较强的清除作用,其IC50分别为0.40、8.73、1.32mg/mL;并且与模型组相比,中华真地鳖酶解短肽能显著降低模型小鼠血浆和肝脏中MDA含量(P＜0.01),显著提高其CAT活力(P＜0.05)、GSH-Px活力(P＜0.01)及清除?OH(P＜0.05)能力,显著提高小鼠肝脏T-SOD活力(P＜0.05)。结论：中华真地鳖酶解短肽有较强的体内外抗氧化作用。     

鸡骨胶原蛋白肽对D-半乳糖致衰小鼠抗氧化性的研究

目的:采用D-半乳糖注射昆明种成年小鼠,建立衰老模型,研究鸡骨胶原蛋白肽对D-半乳糖致衰小鼠抗氧化能力的影响。方法:昆明种成年小鼠,随机分为正常组、模型组、低剂量组、高剂量组及VE对照组。以小鼠血清、肝脏及脑组织中的SOD、GSH-Px、CAT的活性及MDA含量为指标,考察鸡骨胶原蛋白肽在体内的抗氧化性能。结果:鸡骨胶原蛋白肽能够显著提高致衰小鼠体内肝组织、脑组织中的GSH-Px、CAT(P<0.05)和SOD活力(P<0.05),而血清、肝组织和脑组织中的MDA含量(P<0.05)则显著降低。结论:摄入适当的鸡骨胶原蛋白肽可以有效地增强小鼠机体的抗氧化能力,从而延缓D-半乳糖诱发的小鼠衰老。     

麦苗中超氧化物歧化酶(SOD)抗氧化活性研究

本研究探讨麦苗中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)在动物体内和体外的抗氧化活性。体外抗氧化试验中将麦苗中经过提取、纯化、干燥制成的SOD成品经蒸馏水配制成溶液,分别采用DPPH·清除法、Fenton反应法和Fe~(3+)还原法测定其对DPPH和羟自由基的清除率及其还原能力。通过饲养昆明种小鼠,经口灌胃受试物SOD酶液以及生理盐水、番茄红素,考察丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(Catalase,CAT)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果表明,体外试验中SOD酶液具有良好的抗氧化能力,SOD(1 mg/mL)酶液在1 mL水平下对DPPH、羟基自由基的清除率分别可达到96.95%、98%,还原能力随剂量的增加呈递增趋势;体内试验中SOD剂量组与对照组相比,小鼠肝组织中MDA差异显著(P0.05),且各个剂量组下MDA含量都有减少。与对照组比较,SOD高剂量组能提高小鼠肝组织中GSH-Px和CAT活力(P0.05)。麦苗中SOD在体外和体内均表现出良好的抗氧化作用。     

鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽的抗氧化活性

选取铁离子还原体系和3 种自由基体系为指标,研究鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽体外清除自由基效果和抗氧化作用。采用超滤膜分离鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽组分,筛选出体外清除•OH活性最好的组分,再建立小鼠衰老模型,将分离得到活性最好的组分采用灌胃法,测定小鼠皮肤中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）及丙二醛（malondialdehyde,MDA）和羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）的含量,研究鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽体内抗氧化和清除自由基作用。结果表明：鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽具有较强的还原能力且对O－2•、DPPH自由基、•OH具有清除效果,质量浓度为10 mg/mL时对•OH、DPPH自由基、O－2•的清除率和对Fe3+ 的还原能力分别为70.48%、68.78%、42.53%和0.676;分子质量小于2 000 D的鮟鱇皮胶原蛋白肽组分对•OH具有较好的清除效果,IC50为15.7 mg/mL;剂量为100 mg/（kg•d）时,显著提高了皮肤中SOD、GSH-Px、CAT的活性,较模型组分别增加20.9%、41.3%和58.1%,且显著抑制MDA的形成。     

美拉德反应对金带细鲹鱼肉蛋白酶解物体内抗氧化性的影响

本文研究了金带细鲹鱼肉蛋白酶解物及其美拉德反应修饰物在动物体内的抗氧化性,通过检测灌胃30 d的对照组和各剂量组小鼠血清和肝脏中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)含量等指标的变化来研究修饰产物在动物体内的抗氧化活性。结果表明:酶解物及其美拉德反应修饰产物均能降低小鼠血清和肝脏中MDA的形成,增加小鼠血清及肝脏中SOD、GSH-Px的活力和GSH的含量,尤其是高剂量组的抗氧化效果明显,抗氧化活性随剂量的增加而增强,美拉德反应修饰产物能够显著增强小鼠血清及肝脏中SOD、GSH-Px的活力和GSH的含量(p0.05)。这表明,美拉德修饰反应可提高金带细鲹鱼肉蛋白酶解物在小鼠体内的抗氧化活性,修饰产物在小鼠体内的抗氧化性可能与其清除自由基能力有关。     

乳清蛋白肽对自然衰老小鼠抗氧化效果及脑内乙酰胆碱脂酶的影响

利用碱性蛋白酶水解制得的乳清蛋白肽(WPP),以青年小鼠、自然衰老的小鼠和灌胃脑复康的自然衰老的小鼠作对照,以灌胃低中高剂量乳清蛋白肽即100,200和400 mg/(kg·d)自然衰老的小鼠为实验组,通过体内抗氧化指标(SOD、MDA、GSH-Px、蛋白质羰基)和脑内乙酰胆碱脂酶来研究乳清蛋白肽对自然衰老的小鼠抗氧化效果及乙酰胆碱脂酶活力的影响,并探究WPP对老龄小鼠学习记忆的影响。灌胃乳清蛋白肽自然衰老小鼠的SOD和GSH-Px活性显著增加,MDA和蛋白质羰基浓度显著降低,同时乙酰胆碱脂酶的活性也有所降低,高剂量组与脑复康对照组结果相近;实验结果表明乳清蛋白肽能显著提高自然衰老小鼠抗氧化能力,并能调节脑组织乙酰胆碱酯酶的活性,提高衰老小鼠学习记忆认知功能。     

米糠抗氧化肽对D-半乳糖致衰小鼠肝线粒体的保护

目的:观察米糠抗氧化肽对D-半乳糖(D-gal)致衰小鼠肝线粒体的保护作用.并初步探讨其机制.方法:昆明小鼠60只随机分成对照组、衰老模型组、米糠抗氧化肽低、中、高剂量治疗组,衰老模型组每日颈背部皮下注射D-gal100mg/ks·bw;米糠抗氧化肽各组除注射D-gal外,分别灌胃抗氧化肽100、200、500mg/kg·bw;对照组每日皮下注射等量生理盐水,连续6w.利用试剂盒分别检测各组小鼠肝线粒体锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量.结果:与衰老模型组相比,米糠抗氧化肤可明显增强小鼠肝线粒体Mn-SOD、GSH-Px、CAT及T-AOC活性,显著抑制MDA含量的上升(P<0.05或P<0.01),并呈量-效关系.结论:米糠抗氧化肽能够显著提高致衰小鼠的抗氧化能力,减轻肝线粒体损伤,其机制可能与该肽直接清除体内自由基、提高机体抗氧化酶活性以及对抗脂质过氧化反应有关.     

桂花黄酮类化合物体内外抗氧化活性的研究

以清除DPPH·、ABTS~+·的能力以及对铁离子的还原能力为指标研究桂花黄酮类化合物体外抗氧化活性;采用连续颈背部皮下注射D-半乳糖建立亚急性小鼠衰老模型作为体内抗氧化作用研究对象,评价桂花黄酮类化合物总对机体抗氧化能力的影响。结果表明,在体外试验中,以抗坏血酸作为阳性对照,一定浓度的桂花黄酮类化合物有相当的抗氧化活性;体内实验中,与空白组相比,模型组小鼠血清、肝及肾组织匀浆中丙二醛(malondialdehyde,MDA)增高,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量下降,且肝脏及肾脏中的谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量降低(P0.05),说明亚急性衰老小鼠模型造模成功;与模型组相比,桂花黄酮高剂量组小鼠血清以及肝、肾组织匀浆中SOD、GSH、GSH-Px的活性显著增加(P0.05),桂花黄酮各剂量组小鼠血清中MDA含量均较模型组显著降低(P0.05),并且桂花黄酮类化合物可改善D-半乳糖致衰老小鼠肝脏组织细胞的形态结构。说明桂花黄酮类化合物在体内外具有较好的抗氧化活性,其机制与清除自由基,提高体内抗氧化酶活性和降低脂质过氧化有关。     

胶原三肽的抗氧化功能研究

研究CTP(胶原三肽)的抗氧化功效并与两种大分子胶原肽进行比较.体外试验采用螯合Fe2+和清除DPPH自由基能力的方法;体内试验采用"D-半乳糖皮下注射制备小鼠衰老模型",以受试小鼠SOD和GSH-PX活力、MDA含量为检测指标,考察CTP等胶原肽产品的抗氧化性能.结果表明,在相同浓度下,CTP螯合Fe2+和清除DPPH自由基的能力均高于对照产品;在相同剂量下,胶原三肽能显著提高衰老小鼠体内SOD活力,降低MDA含量,并优于对照产品.与大分子胶原肽相比,胶原三肽具有较强的抗氧化活性.     

牡丹籽油体外及对脂代谢紊乱大鼠体内抗氧化作用的研究

研究牡丹籽油的体外自由基清除率及对脂代谢紊乱大鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的酶比活力及丙二醛(MDA)含量的影响。采用α,α-二苯-β-苦味肼(DPPH·)法、[2,2-连氮-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐](ABTS)法计算自由基清除率(Inhibition percent,IP);比色法测定脂代谢紊乱大鼠肝组织及血清SOD、GSH-Px酶比活力及MDA含量。牡丹籽油清除自由基能力与其浓度呈明显的量效(正比)关系。与模型对照组比较,中、高剂量组SOD、GSH-Px酶比活力显著提高,MDA含量降低,差异具有统计学意义(P0.05),表明牡丹籽油具有明显的体内外抗氧化作用。     

多棘海盘车营养成分分析及评价

对多棘海盘车生殖腺和体壁的营养成分进行分析,并对其营养品质进行评价。结果表明,多棘海盘车生殖腺的粗蛋白质含量为43.14%;氨基酸种类齐全,必需氨基酸含量为127.73 mg/g,占氨基酸总量的37.32%,各必需氨基酸平均得分为103.79;脂肪含量为39.22%,多不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的48.92%,二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸含量丰富;维生素和无机元素种类丰富且含量较高,无重金属污染,表明多棘海盘车生殖腺具有较高的食用和药用价值。多棘海盘车体壁的蛋白质含量较高,氨基酸种类齐全,富含牛磺酸和胶原蛋白的特征氨基酸--羟脯氨酸;脂肪含量较低,但多不饱和脂肪酸比例高,二十碳五烯酸含量高达16.67%;Ca、Mg等无机常量元素和Zn、Fe、Cu、Mn等微量元素含量丰富,可望用于提取胶原蛋白或开发研制水产动物饲料。     

海星皂苷测定条件优化及其组织分布测定

为了建立快速、简便、准确的海星皂苷含量检测方法,以多棘海盘车为研究对象,分析浓硫酸用量、反应温度、反应时间等比色条件以及脱色、脱脂等样品前处理条件对测定结果的影响,并采用优化后的检测方法对多棘海盘车不同组织中的皂苷含量进行测定。结果表明：适宜采用浓硫酸用量10%、反应温度60 ℃、反应时
30 min的比色条件,样品前处理过程中进行脱色、脱脂以及丙酮沉淀可以显著提高测定的准确性。精密度实验和加标回收率实验结果表明：皂苷含量低、中、高3 组样品对应的相对标准偏差分别为4.71%、1.61%和1.52%,平均加标回收率为99.64%,该方法的精密度和准确性可以满足检测要求。多棘海盘车整体皂苷含量为3.65 mg/g（干基计）,其中消化腺中皂苷含量最高,其次是体壁和生殖腺。     

响应曲面法优化碱性蛋白酶提取林蛙残体胶原蛋白

以提取林蛙油后的剩余林蛙干残体为原料,通过碱性蛋白酶法提取胶原蛋白。以胶原蛋白提取率为指标,对影响胶原蛋白提取pH 值、加酶量、酶解温度和酶解时间4 因素进行研究,在单因素试验基础上,采用响应曲面分析法,得出最优酶提取工艺条件,并根据实际生产优化为：pH10、加酶量1.5%、酶解温度50℃、酶解时间2.5h,在此工艺条件下,林蛙残体胶原蛋白提取率为55.38%,胶原蛋白成品的纯度64.15%。     

东北山葡萄酒自然发酵酵母菌群的研究

从东北山葡萄酒产区山葡萄酒自然发酵过程中共分离到132株葡萄酒相关酵母,通过WL培养基(Wallerstein Laboratory Nutrient Agar)培养得到5种不同类型的菌落。对其中的44株进行5.8S-ITS rRNA基因的RFLP分析,得到19种酶切图谱,表现了东北山葡萄酒产区葡萄酒相关酵母的多样性。其中以酶切类型6为代表的菌株为Dekkera anomala,是山葡萄浆果表面的主要种,以酶切类型19为代表的菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。聚类分析共得到了5个遗传聚类群且与WL培养基初步分类有较高的相关性。     

Proteolysis of type III collagen by collagenase and cathepsin B under high hydrostatic pressure

The effects of high hydrostatic pressures on the kinetics of hydrolysis of type III collagen from calf skin by collagenase and cathepsin B were studied. Collagen hydrolysates sampled at different time intervals (0-90 min) and at different pressures (0.1-300 MPa) were analysed by reverse-phase high pressure liquid chromatography. The rate of collagen hydrolysis decreased up to 300 MPa for both enzymes. The rate of collagen hydrolysis with cathepsin B was drastically reduced between 0.1 and 100 MPa. Significant differences in the populations of the peptides in cathepsin B hydrolysates were observed in chromatograms corresponding to different pressures. This indicated that some amino acid side-chains were less exposed to cathepsin B recognition on the surface of collagen molecules at high pressures. In contrast, the chromatograms of collagenase hydrolysates showed similar patterns, varying only by the peak heights in chromatograms corresponding to the 0.1-300 MPa pressure range. Pressureinduced decreases of the enzyme-apparent activities suggested that the activation volumes for the reaction of both enzymes were positive.     

皮边角废料提取胶原蛋白的功能特性

采用单一酶和复合酶从皮边角废料中提取得到不同分子量分布范围的胶原蛋白及多肽样品 ,对这些样品的功能特性进行了测定。结果表明 :不同分子量分布的胶原蛋白和胶原多肽表现出不同的溶解性、吸水性、润湿性、吸油性、凝胶性、乳化性、起泡性和泡沫稳定性     

山葡萄酒发酵过程中活性物质、抗氧化能力及有机酸的变化

本文探究了山葡萄酒的功能活性物质和抗氧化能力变化规律和相关性,并分析了山葡萄酒中有机酸的变化规律。利用比色法和高效液相色谱法（HPLC）对发酵过程中山葡萄酒中的功能活性物质、抗氧化能力和有机酸含量进行了动态检测。结果表明:山葡萄酒中的总酚和黄酮含量较丰富,分别可达（5482±36）和（1075±2） mg/L,花青素含量（334.8±7） mg/L;三种功能活性物质与Fe3+还原力、DPPH·清除率及ABTS+·清除率的抗氧化能力进行相关性分析,表明山葡萄酒中的功能活性物质和抗氧化能力呈极显著正相关（P<0.01）;随着发酵时间的增加,酒石酸下降明显,柠檬酸和乙酸有少量增加,乳酸增加明显且168 h后含量达2.22 g/L。综上,山葡萄中的活性物质在发酵过程中能充分溶出,增强山葡萄酒的抗氧化能力,突出山葡萄酒的营养价值;有机酸中的酒石酸降低,增加了口感柔和的乳酸含量,使山葡萄酒口感明显改善,从而提高酒体品质。     

东海海参胶原蛋白多肽的制备及清除自由基功能研究

以东海海参为原料,采用酶法提取胶原蛋白。选取木瓜蛋白酶、风味蛋白酶以及复合酶(木瓜-风味),在其最佳水解条件下水解,以自由基清除率为指标,确定最佳水解时间及酶种类。研究结果表明,用木瓜蛋白酶水解4 h得到的多肽清除自由基的能力最强,清除率在70%以上;多肽清除羟自由基和超氧自由基的IC50分别为27.8mg/mL和49.3mg/mL。通过超滤处理及DEAE琼脂糖离子交换柱(DEAE Sepharose FF)分离纯化抗氧化肽,得到分子质量小于5kDa的肽,其功能性最强。利用HPLC测定该肽的氨基酸含量,结果显示该肽段以甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、谷氨酸(Glu)、脯氨酸(Pro)、天冬氨酸(Asp)、精氨酸(Arg)、丝氨酸(Ser)和苏氨酸(Thr)为主。     

微射流-酶处理对罗非鱼皮胶原蛋白结构和理化特性的影响

为了研究微射流-酶复合改性方法对罗非鱼皮胶原蛋白结构及理化性质的影响。本文采用3种蛋白酶分别协同微射流处理鱼皮胶原蛋白,研究不同处理方法对其质构特性、流变特性及微观结构的影响。结果表明:微射流-酶处理的鱼皮胶原蛋白粒径变小,分布更加均匀及黏度上升的特点,微射流-胰蛋白酶和微射流-胃蛋白酶处理的胶原蛋白的网状结构致密均一,凝胶强度、硬度和黏性分别提高75.17%和14.44%,27.26%和77.66%,67.87%和8.90%,但是微射流-木瓜蛋白酶处理的胶原蛋白的网状结构稀疏且分布不均,凝胶强度、硬度和黏性分别降低21.06%,35.96%,28.28%。其中,微射流-胃蛋白酶处理的鱼皮胶原蛋白感官评分最高,具有更容易被人们接受的感官要求。研究结果有利于提升罗非鱼加工副产物的高值化利用水平。     

不同澄清剂对山葡萄酒澄清效果的影响

对不同浓度的4种澄清剂（壳聚糖、果胶酶、皂土、明胶）处理后的山葡萄酒进行澄清度（透光率）、色度、还原糖、总糖、pH、可溶性固形物含量分析,旨在探明不同浓度的4种澄清剂对山葡萄酒澄清效果及理化指标的影响,结合感官分析,确定合理可行的山葡萄酒澄清方法。结果表明,单一使用明胶和皂土对山葡萄酒澄清没有明显效果,壳聚糖最适用量为0.09%～0.15%,果胶酶最适用量为0.04%～0.08%;复合澄清剂（壳聚糖0.09%+果胶酶0.08%）在作用温度15 ℃时对山葡萄酒澄清效果最佳,透光率达到76.2%;理化性质及感官评定分析表明,复合澄清剂澄清后的山葡萄酒口感最优,感官评分为90.5分。