国内外不同产区和类型雪茄烟烟草特有亚硝胺及生物碱含量分析

为明确国内外不同产区雪茄烟叶生物碱组成和含量、烟草特有亚硝胺（TSNAs）含量水平及相关关系,本试验收集了国内外55个茄芯、茄衣和茄套烟叶样品,并分产区和类型进行分析。结果表明,不同产区雪茄烟样品生物碱含量样本间变异性均较大,烟碱含量为0.66%~10.02%,降烟碱含量为0.04%~0.79%,烟碱转化率为2.07%~28.01%。除国内产区雪茄烟叶生物碱含量相对较高外,其他产区间生物碱含量无显著差异,茄芯烟叶总生物碱含量高于茄衣和茄套。各产区和各类型雪茄烟叶烟碱向降烟碱转化问题均较为突出。不同产区雪茄烟样品总TSNAs含量范围为1.46 μg/g~25.75 μg/g,以NNN含量最高,在0.63 μg/g~20.91 μg/g之间,变异性较大。相关分析表明烟叶烟碱转化率较高是造成目前雪茄茄芯、茄衣、茄套烟叶总TSNAs和NNN含量较高的主要原因,针对烟碱转化性状进行品种改良,对生物碱组成进行优化是实现优质低害中式雪茄烟叶生产的重要途径。      

不同叶位雪茄烟叶质量特征变化趋势分析

为研究雪茄烟叶质量特征随叶位的变化趋势,提高烟叶工业可用性,系统分析了6个雪茄烟叶品种每个叶位鲜烟叶、晾制后原烟和发酵后烟叶的质量等级、外观质量和常规化学成分差异。结果表明,随着烟叶着生部位上升,晾制后颜色呈现出黄褐色-浅褐色-褐色-红褐色变化;主支脉逐渐增粗,叶片厚度、油分和光泽均逐渐增加。叶位由下至上,烟叶中烟碱、总氮、总糖、还原糖和氯含量逐渐增加,钾、镁含量逐渐减少。烟叶烟碱、总氮、总糖和还原糖含量间及与6个外观质量指标间呈极显著正相关关系,钾、镁与外观质量显著负相关。综合外观质量和内在化学成分,可将不同叶位的烟叶划分为4个质量不同的叶位组,分别为P1～P3、P4～P10、P11～P14、P15～P16。其中P1～P3、P15～P16主要产出茄芯烟叶;P4～P10主要产出茄衣和茄套烟叶,整株烟的大部分茄衣烟叶产于该叶组;P11～14主要产出茄套烟叶,可少量产出茄衣烟叶。     

发酵条件对雪茄芯叶TSNAs及其前体物含量变化的影响

  目的   探究发酵条件对雪茄芯叶TSNAs及其前体物含量变化的影响。  方法   以茄芯原料什烟1号为材料,设置不同温度（temperature, T）与相对湿度（relative humidity, RH）互作试验,测定发酵前后烟叶样品中的TSNAs及其前体物含量的变化。  结果   1）不同发酵条件下烟叶TSNAs含量存在极显著差异,发酵后烟叶TSNAs含量可从1326.77 ng/g增至1511.60~5240.24 ng/g,增幅13.78% ~ 294.96%。2）发酵湿度对烟叶TSNAs含量的影响最大,贡献率达57.01%,随发酵湿度从70%增加至90%,烟叶TSNAs含量显著下降。3）温度对TSNAs的贡献率为28.33%,随发酵温度的增加,烟叶的TSNAs含量逐渐上升,尤其是超过42℃后,TSNAs含量显著增加。4）温度与湿度的交互作用对TSNAs含量影响较小,贡献率为14.66%。5）前体物生物碱与硝酸盐含量均随湿度的增加而增加,随温度增加,生物碱总量先降低后升高,硝酸盐含量则持续升高。  结论   生产中建议在45℃-RH 80%条件下发酵以抑制发酵过程中TSNAs的形成与积累。      

烟草贮藏过程中包装方式对TSNAs形成的影响

贮藏阶段是烟叶和烟梗内烟草特有亚硝胺（TSNAs）形成的重要时期,为探索有效抑制贮藏期间TSNAs形成的方法,以白肋烟、烤烟、雪茄茄芯和茄衣烟叶叶片和烟梗为材料,研究了不同包装方式对常温贮藏烟叶和高温贮藏烟叶TSNAs含量的影响。结果表明,白肋烟烟叶采用不同包装方式常温条件下贮藏一年后TSNAs增加幅度差异显著,真空包装烟叶TSNAs含量最低,分别比纸箱包装烟叶和塑料袋包装烟叶降低45.45%和46.02%,且真空包装后烟叶中性致香成分含量较高。将不同类型的烟叶叶片和烟梗进行高温贮藏后常规包装（纸箱包装）的叶片和烟梗的TSNAs含量均大幅上升,但真空包装的不同类型烟叶样品中TSNAs增加幅度显著降低,高温贮藏条件下,真空包装的雪茄茄芯叶片和烟梗TSNAs总量分别比常规包装叶片和烟梗降低38.52%、44.80%,茄衣叶片和烟梗分别降低28.57%、35.86%、白肋烟叶片和烟梗分别降低40.65%、20.84%,且以上三种类型烟叶烟梗TSNAs含量显著高于叶片;烤烟叶片和烟梗TSNAs总量分别比常规包装烟叶降低21.52%、38.29%,叶片TSNAs含量显著高于烟梗。采用真空包装贮藏后,可有效地隔绝氧气,有效抑制贮藏过程中TSNAs的形成和积累。      

晾制湿度对雪茄烟叶碳氮代谢关键酶活性及品质的影响

  目的  为调控雪茄烟叶晾制过程中碳氮代谢水平,改善雪茄烟叶质量。  方法  以德雪1号为试验材料,研究了不同晾制湿度条件下雪茄烟叶水分、化学成分、碳氮代谢相关酶活性的变化规律。  结果  1) 不同晾制湿度条件下烟叶中主要化学成分及碳氮代谢相关酶活性变化规律基本一致;2)水分、总糖、还原糖、淀粉、总氮、蛋白质以及质体色素含量呈下降趋势,氨基酸和烟碱含量呈先升高后下降变化,淀粉酶和中性转化酶活性呈单峰变化,但到达峰值的时间略有差异;3)硝酸还原酶和谷氨酰胺合成酶活性呈下降趋势。4)雪茄烟叶晾制过程湿度控制在凋萎期80%~85%、变黄期75%~80%、变褐期70~75%、定色期65%~70%、干筋期45%~50%范围内,烟叶淀粉酶、转化酶、硝酸还原酶和谷氨酰胺合成酶活性高,各化学成分含量适宜,整体物理特性和感官质量较好。  结论  在一定范围内通过调控晾制湿度有利于提高烟叶碳氮代谢能力,促进烟叶内含物质转化,改善烟叶内在品质,提高烟叶的可用性。      

晾制湿度对雪茄茄衣烟叶颜色的影响

为揭示影响雪茄茄衣烟叶颜色的主要因素，采用常规晾制、分阶段取样的方法研究了不同晾制湿度处理雪茄烟叶含水率、叶绿素含量（质量分数）、酶活性、化学成分和色度值的变化规律。结果表明：晾制过程中低湿度处理的雪茄茄衣烟叶失水速度较快，其次为中湿度处理，高湿度处理较慢。在高湿度条件下，雪茄茄衣烟叶叶绿素a和叶绿素b降解较快，类胡萝卜素含量增加较快。过氧化物酶（POD）和多酚氧化酶（PPO）活性高湿度处理高于中湿度和低湿度处理，在晾制后期（20～30 d）更加明显。高湿度处理晾制后雪茄茄衣烟叶色度值较高，中湿度和低湿度处理色度值较低。相关及逐步回归分析表明，雪茄茄衣烟叶还原糖和总氮含量与色度值的相关系数达到极显著（P≤0.01）水平，是影响晾制后茄衣颜色的重要因素。     

外源褪黑素对晾制期间雪茄烟叶膜脂过氧化水平的影响

【目的】为探究外源褪黑素对晾制过程中雪茄烟叶膜脂过氧化作用的影响，改善雪茄烟叶质量。【方法】以德雪1号为试验材料，设置0、60、120、180μg/mL共4个外源褪黑素处理，研究不同褪黑素处理对晾制过程中雪茄烟叶水分含量、化学成分、丙二醛（MDA）、脯氨酸、多酚类物质含量及抗氧化酶活性的影响。【结果】（1）晾制过程中雪茄烟叶膜脂过氧化水平升高，MDA含量持续上升。（2）外源褪黑素处理可降低雪茄烟叶MDA含量，提高烟叶脯氨酸、水分和多酚类物质含量，增加过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和多酚氧化酶活性。（3）相同的晾制时期，以120μg/mL外源褪黑素处理抗氧化效果最佳，多酚类物质降解较完全，化学成分最协调，且感官质量较好。【结论】选用适宜浓度的外源褪黑素有利于降低晾制期间雪茄烟叶的膜脂过氧化水平，促进烟叶内在成分的转化，提高烟叶的品质。     

四川雪茄烟叶种质资源的遗传多样性分析

为促进四川雪茄烟叶种质资源的开发和利用,通过农艺性状和SSR标记对20份雪茄烟叶种质资源进行遗传多样性分析。结果表明,供试种质资源具有较丰富的遗传多样性,各农艺性状的变异系数在6.59%~19.97%之间,遗传多样性指数在1.69~2.18之间,并聚类为4个类群,各类群间的农艺性状有显著差异。基于SSR标记技术的主成分分析和遗传结构分析把供试种质分为3个类群,聚类分析可把供试种质分为4个类群,为德雪1号、德雪2号、德雪3号和什烟一号的溯源研究提供线索。      

16个雪茄烟品种的烟碱转化率及与发酵后烟叶TSNAs含量的关系

  目的  明确不同雪茄烟品种烟碱转化率差异及与烟草特有亚硝胺(TSNAs)含量的关系。  方法  对16个雪茄烟品种的中部叶生物碱、硝酸盐和TSNAs含量进行了测定,并分析了其相关关系。  结果  1) 不同品种雪茄烟叶均存在烟碱向降烟碱的转化问题,参试的16个品种烟碱含量变化范围为1.14%~5.42%,平均为3.02%,降烟碱含量的变化范围为0.11%~1.47%,平均值0.40%,烟碱转化率范围为5.03%~53.12%,平均值为12.66%,品种间烟碱转化率的变异系数高达101.01%。2)茄衣品种的降烟碱含量和烟碱转化率平均值显著高于茄芯品种。3)不同雪茄烟品种烟叶中的TSNAs含量和组成具有显著差异,总TSNAs含量的变化范围为181.74 ng/g~7759.1 ng/g,平均为3010.98 ng/g,以NNN含量最高,且变异性最大,其平均值为1616.59 ng/g,变异系数为97.28%。4)相关分析结果显示,参试的16个品种的雪茄烟叶中降烟碱含量、烟碱转化率都与NNN和TSNAs含量呈极显著的正相关关系,NNN与降烟碱含量的相关系数为0.802。  结论  烟碱转化导致降烟碱含量增高是造成雪茄烟叶中NNN含量和总TSNAs含量增加的主要原因之一。      

遮荫率对福建雪茄茄衣烟生长和晾制后烟叶质量的影响

为探明遮荫率对茄衣烟生长和晾制后烟叶质量的影响，采用不同厚度的聚丙烯网遮荫，研究了不同遮荫率（0、20%、30%、40%、60%）下茄衣烟主要生育期、农艺性状及晾制后中部烟叶的物理指标、化学成分、外观质量和感官质量。结果表明，随着遮荫率的增加，茄衣烟现蕾时间和各部位烟叶的成熟时间推迟；茄衣烟叶叶长、叶宽和叶面积先增加后降低，而支脉宽、叶厚、拉力、单叶质量和叶面密度降低；总糖含量上升，还原糖含量先上升后下降，钾和氯含量下降；成熟度和油分分值下降，烟叶厚度、支脉粗细和支脉平伏度分值升高；香气质、香气量、杂气、刺激性、余味等分值下降，灰色和燃烧性分值上升。综上，遮荫率30%处理的茄衣烟叶具有最为适宜的物理指标和外观质量，化学成分和感官质量也可满足茄衣质量需求。因此，福建烟区茄衣烟叶生产建议以遮荫率30%为宜。     

细菌对白肋烟叶片硝酸盐、亚硝酸盐和烟草特有亚硝胺含量的影响

在不同年份,于采收前一天,对白肋烟品种TN86进行细菌(WB5)喷洒处理,检测晾制期间烟叶TSNA、硝酸盐、亚硝酸盐含量变化。结果表明:TSNA与硝酸盐、亚硝酸盐的变化,两年中表现出相似性。在晾制的前期,TSNA含量比较低且变化幅度较小,晾制中期,TSNA含量都比较高,在晾制末期,喷洒处理的烟叶中TSNA含量都有明显的降低,其中:2003年比同一时期自然条件下烟叶中TSNA含量降低81.32%;2004年比同一时期自然条件下烟叶中TSNA含量降低了68.80%;4种TSNA及其总量与亚硝酸盐都存在着显著的相关性,晾制期间烟叶用WB5的菌量与硝酸盐含量没有显著相关性,与亚硝酸盐、NNN和总TSNA存在着显著的负相关性。     

采收和晾制方式对雪茄烟中上部烟叶品质的影响

为明确采收和晾制方式对雪茄烟CX26烟叶生理生化特性和品质的影响,设置摘叶采收+穿叶晾制（T1）、一次性斩株采收+整株挂晾（T2）和多段斩茎采收+骑杆晾制（T3）等3种采收和晾制处理,同时检测烟叶含水率和化学成分含量（质量分数）,并分析了外观品质、物理特性和等级比例。结果表明,随着晾制进程的推进雪茄烟叶含水率和自由水含量均呈下降的趋势,束缚水含量则先升高后降低,失水速率表现为中部叶低于上部叶。一次性斩株采收+整株挂晾处理的烟叶烟碱、淀粉、氮碱比和钾氯比分别为3.2%、0.8%、0.8和37.8,均在适宜范围内,烟叶化学成分协调;且一次性斩株采收+整株挂晾的处理的叶片薄、结构疏松平整、青斑比例低。中部叶的上等烟比例显著高于上部叶。因此,一次性斩株采收+整株挂晾可作为雪茄烟CX26适宜的采收和晾制方式。      

中美部分品牌烟草制品TSNA及其前体物的含量和关系

[目的]初步了解中美市售部分烟草制品TSNA及其前体物的含量及关系,为雪茄安全性研究提供参考.[方法]收集了中美市售卷烟及雪茄共37款烟草制品,对其TSNA以及其前体物含量进行测定,并进行相关分析.[结果](1)烟碱转化率美国雪茄最高,平均5.50％,中式卷烟样本烟碱转化率最低,平均为2.83％,且与美国雪茄样本存在显...     

TSNAs降解菌05-5402的筛选及其降解特性研究

为分离筛选能够降解TSNAs的微生物,探讨其降解特性,本研究采用替代底物平板稀释法分离和靶标底物点接法筛选相结合的分离筛选策略,筛选到能够利用NNK为唯一碳源和氮源而生长的细菌05-5402菌株,鉴定为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）。白肋烟浸提液经05-5402菌株处理后,TSNAs含量降低了22.2%,其中NNK和NAT的含量分别降低了47.4%和55.7%。晾制的烟叶经05-5402菌株处理后,TSNAs降低17.3%,其中,NAB的含量降低了52.2%。发酵过程中的烟丝经05-5402菌株处理,TSNAs含量下降12.2%。05-5402菌株能实现烟草特有亚硝胺的高效定向降解,具有较大的应用潜力。      

不同氮素形态对烟草硝态氮含量和TSNA形成的影响

于2013 年设置盆栽试验研究不同硝态氮和铵态氮比例对白肋烟和烤烟硝态氮含量、常规化学成分及高温贮藏过程TSNA 形成的影响。结果表明:①白肋烟施用硝态氮肥比例越高,烟叶的硝态氮含量越高,高温贮藏后4 种TSNA 含量和TSNA总量也越高,晾制过程中硝态氮含量显著增加。在45℃条件下贮藏15 d 后的白肋烟四种TSNA 含量及其总量大幅高于低温贮藏烟叶,且TSNAs 的增加量均随硝态氮比例的增加而增加。②烤烟成熟过程和调制过程硝态氮含量则呈降低趋势,调制后各处理烟叶含有较低的硝态氮含量,烤烟烟叶硝态氮含量以及高温贮藏前后TSNA 含量与施用硝态氮比例无明显相关性,其中中部叶施硝态氮肥和铵态氮肥各50% 处理TSNA 总量最低,上部叶施100% 硝态氮肥处理TSNA 总量最低。③随着铵态氮比例的增加,白肋烟烟碱、总氮和蛋白质含量显著增加,烤烟化学成分变化缺乏规律性,但以施硝态氮肥和铵态氮肥各50% 处理烟叶的糖分含量较高,整体化学成分协调性较好。      

雪茄烟叶晾制过程中形态与水分含量的协同变化研究

【目的】为探究雪茄烟叶晾制过程中形态参数、水分含量的变化及其关系。【方法】以德雪3号品种中部叶为试验材料,对晾制过程中6个时期进行取样,测定其形态参数和水分含量,并对其进行回归分析。【结果】（1）随着晾制进程的推进,烟叶的叶片收缩率、卷曲度及厚度收缩率均不断提高,总水含量及自由水含量呈下降趋势,束缚水含量则呈先升高后下降的变化趋势。（2）可根据所筛选出的形态参数与整叶含水率所拟合的方程,结合晾制各时期整叶含水率的适宜范围,确定晾制过程中形态参数的适宜范围,有效调控晾制环境。（3）在变黄期,烟叶的纵向收缩率、纵向卷曲度及叶片厚度收缩率应分别控制在4.7%～8.6%、2.6%～3.4%、20.4%～48.8%范围内,在变褐期则应依次为8.6%～9.5%、3.4%～3.5%、48.8%～61.1%,而在定色期应依次为9.5%～10.7%、3.5%～3.8%、61.1%～63.1%。【结论】在晾制过程中可根据烟叶的纵向收缩率、横向收缩率或叶片厚度收缩率的大小来判断烟叶水分含量,从而实现雪茄烟叶晾制技术的精准调控。