挤压处理对薏米蛋白组分结构及功能性质的影响

以脱脂薏米粉为原料进行挤压,采用Osborne分级法提取清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白与谷蛋白,探讨挤压处理对4种蛋白组分结构与功能性质的影响。结果表明,挤压后4种蛋白组分的粒径均呈下降趋势（低至3 nm）。挤压导致清蛋白、球蛋白与谷蛋白发生不同程度的聚集融合,游离巯基含量分别降低了72.37%,40.64%和51.71%,蛋白的最大荧光吸收波长蓝移,电泳图谱中高分子质量区域分布的条带逐渐消失,亚基种类减少,而醇溶蛋白无明显变化。除球蛋白外,挤压后清蛋白、醇溶蛋白与谷蛋白中有序结构,即α-螺旋与β-折叠结构的含量明显下降（P <0.05）,分别减小了1.58%,22.88%和7.75%。此外,挤压后清蛋白、球蛋白与谷蛋白的持水性分别提高了1.74,3.18倍和4.89倍,持油性分别增长了2.00,2.23倍和1.67倍。结论：挤压处理诱导清蛋白、球蛋白与谷蛋白的结构性质发生明显改变,而醇溶蛋白具有较高的结构稳定性与抗热剪切能力。研究结果为薏米蛋白组分的工业化制备及在多种食品配方中的应用提供参考。     

4种花生粕蛋白的理化性质及功能特性研究

以花生粕为原料,采用分级提取工艺提取花生清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,研究4种花生粕蛋白的理化性质和功能特性。扫描电镜观察,4种花生粕蛋白的形态结构各不相同。SDS-PAGE法测定分子量表明,清蛋白含有4种亚基,相对分子量分别为70kDa、40kDa、30kDa、25kDa和15kDa;醇溶蛋白含有2种亚基,分子量分别为25kDa和15kDa;球蛋白含有5种亚基,分子量分别为40kDa、38kDa、30kDa、25kDa和15kDa;谷蛋白含有4种亚基,分子量分别为40kDa、30kDa、25kDa和15kDa。花生清蛋白、醇溶蛋白、球蛋白、谷蛋白的等电点分别为pH3.6、pH5.2、pH4.6、pH5.0。功能性质研究表明,球蛋白的持水性最好,为1.52mL/g,其次为谷蛋白1.10mL/g,清蛋白和醇溶蛋白的持水性较低分别为0.49mL/g、0.14mL/g;清蛋白的持油量相对较高为8.21mL/g,其次为球蛋白为7.16mL/g,谷蛋白和醇溶蛋白的持油量相对较低,分别为3.82mL/g和5.49mL/g;清蛋白的乳化性和乳化稳定性相对较高,乳化能力EC值和乳化稳定性ES值分别为71.4% 和83.33%,谷蛋白次之,EC和ES值分别为66.7% 和82.86%,醇溶蛋白和球蛋白相对较低,EC值分别为64.0% 和62.2%,ES值分别为82.35% 和76.67%。综上,花生粕清蛋白的持油性、乳化性和乳化稳定性相对较好。     

蒸制过程中馒头坯蛋白质变化特性研究

研究馒头坯在蒸制过程中蛋白质各组分含量、蛋白质二级结构、游离巯基和二硫键含量、蛋白质分子质量以及蛋白质体外消化率的变化.结果表明:随着蒸制的进行,馒头坯中总粗蛋白含量基本不变,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、SDS可溶性麦谷蛋白的含量呈现显著下降趋势,麦谷蛋白大聚体含量呈现显著上升趋势;蛋白质二级结构中α-螺旋和β-折叠含量均出现明显下降趋势,β-转角含量和无规则卷曲含量呈现上升趋势;二硫键含量显著上升;高分子质量谷蛋白亚基(分子质量 66.2 kD)含量上升,低分子质量谷蛋白亚基和醇溶蛋白(分子质量31.0～66.2 k D)、清蛋白和球蛋白(分子质量31.0 k D)的含量均降低;蛋白质的体外消化率呈显著上升趋势.     

不同花生品种籽仁发育过程中蛋白质组分分析

采用蛋白质组分的连续累进提取法提取4个花生品种籽仁的清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术,对各蛋白组分的亚基组成进行分析。结果表明,花生籽仁发育过程中,清蛋白始终占绝对优势,占花生蛋白质总量的70%以上,最高达95%;球蛋白含量较低,仅占花生蛋白质总量的3%~5%,谷蛋白含量最低,其不足3%,醇溶蛋白痕量;在4种组分中,品种之间球蛋白含量差异最大。SDS-PAGE图谱显示,染色后清蛋白、球蛋白条带清晰可见,谷蛋白条带较为模糊,清蛋白含量高,清蛋白和球蛋白成分较丰富。花生蛋白亚基分子质量在14.4~97.4 ku之间,清蛋白有10~12个亚基,球蛋白有9~10个亚基。采用连续累进提取法可将花生蛋白组分分离,利用SDS-PAGE方法可以得到花生籽仁清蛋白、球蛋白的清晰条带且多态性高,而谷蛋白条带模糊。     

莲子中不同蛋白的结构及理化特性对比分析

该研究分别制备了莲子分离蛋白与莲子分级蛋白（清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白）,并对比研究了不同莲子蛋白的溶解性、乳化性、分子特性等结构变化。研究结果表明,莲子中蛋白质约占干基总量的16.14%,4种分级蛋白所占比例依次约为55:6:0.1:25。对比5种不同莲子蛋白,清蛋白溶解性最高,Zeta电位最低值为-21.3 mV,粒径最小值为75.47 μm,分离蛋白乳化性最好,五种不同蛋白的等电点均在4.9附近。光谱研究表明,醇溶蛋白和谷蛋白荧光更强,清蛋白和球蛋白α-螺旋含量更低,醇溶蛋白和谷蛋白β-转角含量更高。光谱研究表明,分离蛋白、清蛋白（球蛋白）的波长蓝移,清蛋白和球蛋白的α-螺旋含量更低,且α-螺旋、β-折叠、β-转角含量也发生不同变化。这些研究结果也表明清蛋白和球蛋白分子柔性相对更高,与其溶解性、乳化性、疏水性密切相关。通过实验有助于揭示莲子分离蛋白和分级蛋白理化特性与分子结构间的构效关系,并为深入研究莲子蛋白的功能特性提供理论依据。     

小米中四种蛋白的分级提取及结构表征

利用扫描电子显微镜、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、粒径和Zeta电位、傅里叶红外光谱、紫外光谱、荧光光谱以及表面疏水性对小米四种蛋白组分进行结构表征。结果表明：微观状态下的清蛋白和球蛋白存在簇状结构,有聚集成块的趋势,醇溶蛋白和谷蛋白形状完好,没有融合,但堆积程度高,醇溶蛋白亚基带分布明显清晰,亚基分子质量小且不杂乱,清蛋白、球蛋白和谷蛋白亚基带分布广泛,球蛋白的粒径分布区间小,强度高,谷蛋白的Zeta-电位高,其稳定性最好。二级结构表明四种蛋白在各个结构都有分布,但醇溶蛋白的有序结构相比其他三种蛋白最少。三级结构发现四种蛋白在紫外光的照射下均出现不同波长下的特征吸收峰,清蛋白的表面疏水性最低,溶解特性更好,醇溶蛋白疏水性高,溶解性低。     

非洲山毛豆种子蛋白质组分分析

以山毛豆种子为原料,对其蛋白质进行分级分离,测定了各组分蛋白含量、等电点和溶解度。结果表明,脱脂山毛豆粉的总蛋白含量为47.11%(m/m)。其中,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的相对百分含量分别为64.04%、8.83%、11.06%和14.50%,另外含有1.57%难溶的复合蛋白。清蛋白、球蛋白和醇溶蛋白的等电点为pH4.3、pH5.1和pH4.7,谷蛋白的等电点为3.5～3.8。它们在等电点附近溶解度较小,偏离等电点之后即pH>5或pH<4清蛋白和球蛋白的溶解度增大,而醇溶蛋白和谷蛋白的溶解度增加较小。SDS-PAGE电泳表明,非洲山毛豆种子总蛋白的相对分子量差异较大,在20.1～97.2kDa及小于20.1kDa的均有分布,但其谱带分布不明显。清蛋白谱带变化范围为主要有6条,变化区域集中在20.1～66.4kDa及小于20.1kDa的范围。球蛋白在20.1～66.4kDa大约出现了10条谱带。醇溶蛋白在20.1、29.0、44.3kDa分别有3条明显的谱带。谷蛋白在20.1～97.2kDa大约有10条以上的谱带,说明非洲山毛豆种子总蛋白及各组分蛋白均有不同的分子组成。     

樟树籽仁蛋白的物理性质及安全性的研究

开发樟树籽仁蛋白作为一种新型植物蛋白资源。以石油醚低温脱脂的樟树籽仁为原料,采用Osborne法对樟树籽仁蛋白进行分级,得到清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白4种组分。为了较全面系统地了解樟树籽蛋白进行理化性质及动物毒性的测定。结果表明,樟树清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白分别占总蛋白的25.64%,23.51%,2.32%和18.39%;等电点分别为3.1,3.5,3.3和4.5;变性温度分别为45.35℃,46.15℃,43.53℃和52.56℃;清蛋白、球蛋白和谷蛋白的必需氨基酸含量丰富,醇溶蛋白含量较低;清蛋白和谷蛋白表面较规则,球蛋白和醇溶蛋白表面发亮;清蛋白、球蛋白和谷蛋白的二级结构主要为β-折叠,醇溶蛋白主要为无规卷曲。MTT和ELISA测定结果表明,在推荐膳食浓度(1.2 g/kg)下不会对BALB/c小鼠肝细胞和脾细胞引起凋亡及免疫炎症的反应,说明在动物水平上樟树籽仁蛋白是安全无毒的。试验对樟树籽仁分离蛋白的研究,为樟树籽仁蛋白质资源的开发利用奠定基础,也为其他植物蛋白质的研究提供理论依据。     

甜荞蛋白质组分的物化特性研究

研究甜荞不同蛋白组分的物化特性.采用分步提取法分离收集甜荞清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白.结果表明甜荞清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的含量分别占总蛋白的21.91%、19.36%、2.26%和19.95%,等电点分别为pH4.40、5.00、4.80和4.60,变性温度分别为79.39℃、70.36℃、80.04℃和83.09℃,前三种蛋白白色略偏黄,而谷蛋白偏红色.甜荞清蛋白、球蛋白和谷蛋白的必需氨基酸含量丰富.甜荞清蛋白含铁量高,醇溶蛋白含锌量高,球蛋白含镁量高,而铅、锡、砷在各蛋白质组分中的含量均很低.     

吊干杏杏仁蛋白功能特性和结构特性

为提高吊干杏加工副产物的利用率,以吊干杏杏仁为原料,通过Osborne 分级分离法和传统碱溶酸沉法分别提取清蛋白、球蛋白和分离蛋白,分析比较3 种蛋白的氨基酸组成及功能和结构特性。结果表明,吊干杏杏仁中3 种蛋白质的含量丰富,氨基酸配比合理,其中谷氨酸含量最高;在pH 值为7 的条件下,清蛋白溶解性[（50.00±0.87）%]、持油性[（16.06±0.22）g/g]均较好;pH 值由3 增加至9,3 种蛋白的起泡能力呈现先降低后升高趋势。清蛋白和球蛋白泡沫稳定性变化趋势相似,与起泡性变化趋势相反。球蛋白的表面疏水性和游离巯基含量均显著高于清蛋白和分离蛋白（P＜0.05）;3 种蛋白的二级结构均以β-转角和β-折叠为主。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,3 种蛋白亚基含量分布均较广,分子量在11～63 kDa,其中在21、22 kDa 处的谱带最为强烈。     

热处理对大豆11S球蛋白溶解性和二级结构的影响

采用差示扫描量热仪、Lowry法以及傅里叶变换红外光谱法分别对大豆11S球蛋白的热性质、溶解性和二级结构进行测定与分析,研究热处理对11S球蛋白溶解性和二级结构的影响。热处理能够使大豆11S球蛋白Td和ΔH降低,导致蛋白质发生部分或完全变性。80?℃热处理使大豆11S球蛋白的溶解性降低,这可能由于热处理改变了蛋白质的空间结构和表面电荷所致,此时蛋白质的α-螺旋结构逐渐转变为β-折叠和无规卷曲结构。而90?℃和100?℃热处理一定时间后,蛋白质溶解性又稍有升高,这可能是形成可溶性聚集体造成的。此时蛋白质的α-螺旋和β-折叠结构向β-转角和无规卷曲结构转变,表明β-转角和无规卷曲结构对热聚集体的形成具有重要作用。此外,蛋白质变性和氢键断裂是导致二级结构相互转变的重要因素。     

杏鲍菇谷蛋白理化性质及功能特性研究

以杏鲍菇为原料,采用Osborne法提取出杏鲍菇谷蛋白,并对其功能特性及理化性质进行研究。结果表明:杏鲍菇谷蛋白的等电点为4.3,谷蛋白的亚基分子量分布在30.28、25.39 kDa附近,总巯基、游离巯基、二硫键含量分别为67.06、28.90、14.35μmol/g,二级结构占比为α-螺旋31.41%、β-折叠55.15%、β-转角13.45%,变性温度为73.59℃,必需氨基酸占比为40.77%。杏鲍菇谷蛋白随着离子强度的增加,溶解度(solubility,S)及乳化稳定性(emulsification stability,ES)呈先增大后减小的趋势,持水性(water holding capacity,WA)、持油性(oil holding capacity,FA)、起泡性(foam capability,FC)及起泡稳定性(foam stability,FS)、乳化性(emulsion capability,EC)则呈相反趋势;随着温度的升高,S、WA、FC及FS、EC及ES都呈先增加后减小的趋势,FA则呈相反趋势;随着pH值增大,FS和ES呈先增大后减小的趋势,S、WA、FA、FC、EC则呈相反趋势;随着蔗糖浓度的增大,S、WA、FA、FC及EC都呈先增加后降低的趋势,FS及ES则呈相反趋势。     

Polypeptide Compositions and Antigenic Homologies Among Prolamins from Italian,Common and Japanese Millet Cultivars

Prolamins from Italian, common and Japanese millet cultivars were separately extracted with three kinds of alcohol (ethanol, propanol and isopropanol) and their component polypeptides and immunochemical relationships were examined by SDS-PAGE, two-dimensional electrophoresis and immunoblot analysis using the antiserum raised against Italian millet prolamin. Polypeptides of the individual millet prolamins appeared to be primarily composed of two major common subunit complexes with respective molecular masses ranging from about 19 to 23 kDa and from 13 to 14 kDa (groups A and B, respectively), although a few minor variations due to varietal differences were seen. Group A clearly contained one neutral subunit (21 kDa) and one basic one (22 kDa), while group B had one basic 14 kDa subunit. The Italian millet prolamin antiserum strongly bound with all three prolamin polypeptides but neither with the homologous non-prolamin fractions nor with the heterogeneous prolamins of the Triticeae (wheat, barley and rye). Amino acid compositions were found to be almost identical to one another.     

荔枝汁中谷蛋白结构及特性

采用Osborne分级法制备荔枝汁中的谷蛋白,并采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）、差示扫描量热仪、红外光谱等方法分析荔枝汁中谷蛋白的分子质量分布、热稳定性以及二级结构等。结果表明：荔枝谷蛋白分子质量较大,主要集中在50?kDa及以上,而且成分复杂,约有10?个条带,经还原后,少量大分子质量条带消失,出现新的较小分子质量条带,其分子质量集中在50?kDa左右;用蛋白样品结合SDS的能力表征蛋白质的表面疏水特性,得出1?mg的荔枝谷蛋白样品结合（74.25±5.26）μg?SDS;游离巯基含量为（29.83±1.72）μmol/g,总巯基含量为（40.59±2.04）μmol/g,二硫键含量为（5.38±0.18）μmol/g;荔枝谷蛋白的变性峰值为105.24?℃;β-折叠和β-转角为荔枝汁谷蛋白主要结构,所占百分比分别为33.92%和64.7%。因此,可初步推断荔枝谷蛋白组分复杂,分子质量较大,具有较强的表面疏水性,二硫键含量较少,对热较稳定。     

杏鲍菇分离蛋白和清蛋白的理化性质及功能分析

以杏鲍菇为原料,分别利用碱溶酸沉法提取杏鲍菇分离蛋白（Pleurotus eryngii protein isolate,PEPI）、Osborne法分离主要蛋白组分,并研究其理化性质和功能分析。结果表明,杏鲍菇的蛋白质量分数为17.57%（以干质量计）,以杏鲍菇清蛋白（Pleurotus eryngii albumin,PEA）为主,占总分离蛋白组分的81.12%。PEPI和PEA中均含18?种氨基酸,且必需氨基酸含量分别占总氨基酸含量的40.80%和40.51%。与PEPI相比,PEA的表面疏水性（265.25）显著高于PEPI（164.27）（P＜0.05）,而总巯基、二硫键含量较低,分别为61.53?μmol/g和10.39?μmol/g;热变性温度（100.98?℃）低于PEPI（108.27?℃）,且PEA持水性（1.64?mL/g）、持油性（5.59?mL/g）显著低于PEPI（3.58、8.36?mL/g）（P＜0.05）。PEPI和PEA的溶解性、起泡性、泡沫稳定性、乳化性及乳化稳定性随pH值的变化趋势均相似,在等电点时均为最低。傅里叶变换红外光谱显示PEPI和PEA的二级结构主要是β-折叠和β-转角,扫描电镜观察PEPI呈蜂巢结构。相比PEA,PEPI具有更好的理化性质和功能特性。     

Fractionation and characterization of tartary buckwheat flour proteins

Protein fractions (albumin, globulin, prolamin and glutelin) were extracted from defatted tartary buckwheat flour. Albumin was the predominant protein fraction (43.8%) followed by glutelin (14.6%), prolamin (10.5%), and globulin (7.82%). Albumin was relatively rich in histidine, threonine, valine, phenylalanine, isoleucine, leucine and lysine. Globulin had high levels of methionine and lysine. Prolamin was high in histidine, threonine, valine, isoleucine, and leucine. Glutelin was rich in histidine, threonine, valine, isoleucine, and leucine. SDS–PAGE analysis, under non-reductive and reductive conditions, showed that disulfide bonds existed in the four fractions. Non-reduced albumin showed major bands at 64, 57, 41, and 38 kDa, and globulin at 57, 28, 23, 19 and 15 kDa. Reduced albumin and globulin shared two common bands at 41 and 38 kDa. Reduced prolamin showed major bands at 29, 26, 17 and 15 kDa. In vitro pepsin digestibility of the four fractions (from high to low) was: albumin > globulin > prolamin and glutelin.     

Japanese barnyard millet (Echinochloa frumentacea): Protein content,quality and SDS–PAGE of protein fractions

Total protein from five varieties of Japanese barnyard millet (Echinochloa frumentacea,) was separated into albumin/globulin, prolamin and glutelin fractions. The protein fractions were examined by sodium dodecylsulphate polyacrylamide gel electrophoresis. Total protein of the varieties ranged from 110·5 to 139·3 mg g^?1 of which 11·3–17·2% was albumin/globulins, 6·8–9·3% prolamins, 7·5–11·6% prolamin–like, 5·9–9·1% glutelin-like and 39·3–54·4% true glutelins. Amino acid analyses of the total protein showed that the varieties had essentially the same ammo acid composition. With the exception of lysine the amino acid levels adequately matched the provisional FAO scoring pattern. The amino acid composition of the protein fractions was also very similar. Electrophoretic analysis showed that the albumin/globulin fraction contained three or four components; the prolamin and glutelin fractions each had five components. The glutelin fraction had higher molecular weight components than the other two fractions.     

发酵时间对馒头品质及面筋蛋白结构的影响

利用体积仪、质构仪和傅里叶变换红外光谱分别测定馒头比容、质构特性与面筋蛋白二级结构,探究发酵时间对馒头品质及面筋蛋白结构的影响。结果表明：馒头中醇溶蛋白与麦谷蛋白中β-折叠含量均为最高。随着发酵时间的不断延长,醇溶蛋白中β-折叠、α-螺旋相对含量无显著性变化,无规则卷曲逐渐减少,而β-转角则逐渐增加;羟基吸收带逐渐增强,醇溶蛋白的水合作用增强。麦谷蛋白中α-螺旋与无规则卷曲相对含量变化不大,β-折叠相对含量先上升后下降,而β-转角相对含量则是先下降后上升;羟基带强度逐渐减弱;当发酵时间延长到80?min时,麦谷蛋白红外光谱位于1?082?cm－1与1?155?cm－1处的峰消失,可能是蛋白质环状结构的C—C振动减弱。     

Isolation,purification, and characterization of the globulin from wheat germ

This research optimized the extraction and purification of globulin from wheat germ and assessed the molecular weight distribution and structure properties of the globulin obtained. The results showed that the relative extraction efficiency and purity of wheat germ globulin (WGG) reached 18.0% and 89.1% under the enzymolysis conditions of 0.32‰ α-amylase, pH 6.5, and 55 °C. The maximal precipitation rate of WGG (91.3%) was obtained with pH 4.3 (acid precipitation). Additionally, the molecular weight of WGG was mainly distributed below 70 kDa. FT-IR confirmed that random coils (30.95%), β-sheet (27.02%), α-helix (26.55%), and β-turn (15.48%) were the secondary structures of WGG. Furthermore, LTQ mass spectrometry showed that WGG was rich in variety and high in complexity, which retrieved 1274 proteins belonging to 392 proteomes by inverse peptide analysis. The findings endow a great potential of preparing WGG with superior functionality for food applications.     

Characterization and Analysis of Protein Structures in Oat Bran

Globulin, albumin, gluten, and gliadin in oat bran were prepared by the Osborn method using oat bran as starting material. We characterized the secondary and tertiary structures of 4 proteins using circular dichroism, Fourier‐transform infrared spectroscopy, and fluorescence spectroscopy in order to analyze the composition and functional mechanisms. The results showed that the amino acid composition in all the 4 proteins was relatively balanced, and the essential amino acid content in albumin and globulin was high. The molecular weights of albumin, globulin, gliadin, and gluten were 19 to 21, 15 to 53, 20 to 38, and 10 to 90 kDa, respectively. The composition of gluten was a little complex compared to those of the other oat bran proteins. The secondary structure distribution of the 4 proteins differed, and increase in the pH resulted in modification of the β‐sheet structure to α‐helical structure. Moreover, the α‐helix content and surface hydrophobicity were negatively correlated (r = –0.988, P < 0.05). The peak position (λ_max) and intensity of the fluorescence spectra of 4 proteins were in the order of gliadin > globulin > gluten > albumin, indicating that surface hydrophobicity of gliadin was the strongest and that of albumin was the weakest among the 4 proteins.